新课导入,学习目标,新知探究,课堂小结,随堂测试,*,*,*,*,第三节 动物的克隆,(第二课时),第三节 动物的克隆,乙肝病毒模式图,一般来说,医院如何检测人体内是否存在乙肝病毒?,检测抗原,乙肝病毒用什么检测?,相应的抗体,思考题,乙肝病毒模式图一般来说,医院如何检测人体内是否存在乙肝病毒?,1.,描述动物细胞全能性的表现程度,说出动物难以克隆的原因,;,2.,简述动物细胞核移植的概念和核移植程序,;,3.,列举动物细胞培养与动物细胞核移植的应用和发展前景。,1.描述动物细胞全能性的表现程度,说出动物难以克隆的原因;,1,、细胞融合与细胞杂交:,诱导方式,物理法:,离心、振荡、电融合技术,化学法:,聚乙二醇,生物法:,灭活的仙台病毒,1、细胞融合与细胞杂交:诱导方式物理法:离心、振荡、电融合技,灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面,细胞膜被病毒颗粒穿通,细胞膜连接,细胞融合形成杂种细胞,灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通,细胞膜连接,植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,比较项目,植物体细胞杂交,动物细胞融合,细胞融合原理,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性,细胞融合的方法,去除细胞壁后诱导原生质体融合,使细胞分散后诱导细胞融合,诱导方法,电刺激,化学(聚乙二醇),电融合、,PEG,、灭活的仙台病毒,用途,获得杂种植株,制备单克隆抗体,植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物,2,、杂交瘤技术和单克隆抗体制备:,(1),传统抗体生产方法:,抗原,动物体内,抗体,刺激,效应,B,(,抗体不纯,),筛选单一效应,B,细胞,不能增值,产生大量抗体,特异性差、纯度低;产量低、反应不够灵敏。,2、杂交瘤技术和单克隆抗体制备:(1)传统抗体生产方法:抗原,(,2,),单克隆抗体制备过程:,设计方案:,一个,B,淋巴细胞,小鼠骨髓瘤细胞,杂交瘤细胞,+,化学性质单一、特异性强的抗体。,特性:,(2)单克隆抗体制备过程:设计方案:一个B淋巴细胞小鼠骨髓瘤,单克隆抗体的应用:,疾病的诊断、治疗和预防,优点:,特异性强,灵敏度高,优越性强,临床应用:,单抗探针,正在研究:,用单克隆抗体治疗癌症,单克隆抗体的应用:疾病的诊断、治疗和预防优点:特异性强,灵敏,受精卵,胚胎干细胞,多能干细胞,单能干细胞,体细胞,3,、动物细胞全能性的表现程度,如多能造血干细胞:可分化为红细胞、白细胞、血小板等,(,2,)低等动物细胞:,全能性一般容易体现,。如水螅的上皮细胞,不经过分裂就可以转变为上皮、肌肉细胞。,(,1,)高等动物细胞,受精卵胚胎干细胞多能干细胞单能干细胞体细胞3、动物细,4,、动物难以克隆的根本原因:,在动物的个体发育过程中,,分化的结果使得细胞在形态和功能上高度特化,,这是由于细胞在伴随着它们发育过程中在时间、空间的变化,,基因表达的调控使得细胞中合成了专一的蛋白质。,4、动物难以克隆的根本原因:在动物的个体发育过程中,,核移植,胚胎细胞核移植,体细胞核移植(难度高),(1),基本过程:,动物体细胞核移植,是将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,.,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体,.,5,、细胞核移植实验和动物的克隆繁殖,核移植胚胎细胞核移植体细胞核移植(难度高)(1)基本过程:动,(2),培育过程,去核卵细胞,体细胞核,细胞核移植,重组细胞,电脉冲刺激,早期胚胎,(,或重组胚胎),胚胎移植,母体子宫,妊娠、出生,个体,(3),原理,动物体细胞核具有全能性,(2)培育过程去核卵细胞体细胞核细胞核移植重组细胞电脉冲刺激,卵细胞,A,母绵羊,B,母绵羊,乳腺细胞,细胞质,细胞核,细胞核移植,8,细胞胚胎,卵裂,C,母绵羊子宫,胚胎移植,多莉羊,分娩,妊娠,重组细胞,多莉羊的培育过程,卵细胞A母绵羊B母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植8细胞胚,重组移核细胞丢失了源于乳腺细胞的调,节蛋白,经过三次分裂后,原乳腺细胞的调,节蛋白便全部被卵细胞质中的蛋白因子替换,了,因此核,DNA,被重新编排,细胞开始表达自,己的基因。,克隆羊成功的分子细胞生理学机理,重组移核细胞丢失了源于乳腺细胞的调克隆羊成功的分子细,多莉羊的克隆成功证明:,1,、高度分化细胞经一定技术处理,也可回复到类似受精卵时期的功能。,2,、在胚胎和个体发育中,细胞质具有调控细胞核(包括异源的细胞核)发育的作用。,多莉羊的克隆成功证明:1、高度分化细胞经一定技术处理,也可回,1,、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是(),A,结果是相同的,B,杂种细胞的形成过程基本相同,C,操作过程中酶的作用相同,D,诱导融合的手段相同,B,1、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是(),2,、单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和,B,淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是(),淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞,B,淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞,A,B,C,D,C,2、单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,,3,、单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是(),A,由小鼠能产生抗体的,B,淋巴细胞与肝细胞融合,B,由小鼠一个,B,淋巴细胞诱导融合而成,C,由小鼠一个,B,淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成,D,由小鼠一个,B,淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成,D,3、单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是()D,4、,动物细胞克隆是指,(),A,一个单细胞培养成一个新的细胞群的技术,B,一个重组细胞经分裂、分化发育成一个动物个体的技术,C,几个同种动物的细胞培养成一个新的细胞群的技术,D,一个卵裂球经胚胎分割发育成四个细胞群的技术,A,4、动物细胞克隆是指()A,5,、,下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是,(,),A,培养中的人效应,T,细胞能产生单克隆抗体,B,培养中的人,B,细胞能够无限地增殖,C,人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株,D,用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞,D,退出,5、下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()D退出,