,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,免疫组织化学,实验技术,免疫组织化学,免疫组织化学的定义,免疫组织化学（,immunohistochemistry,IHC,）技术是应用免疫学基本原理,抗原抗体反应，对组织或细胞内抗原或抗体物质定性和定位的组织化学技术。,免疫组织化学的定义免疫组织化学（immunohistoche,定性与定位,定性与定位,免疫组织化学的分类,免疫荧光法,免疫酶法,免疫胶体金法等,免疫组织化学的分类,实验所用标本,组织标本,石蜡切片,冰冻切片,病理切片,组织芯片,石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究,实验所用标本组织标本石蜡切片冰冻切片病理切片组织芯片石蜡切片,实验所用抗体,单克隆抗体：一个,B,淋巴细胞克隆分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。,多克隆抗体：将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个,B,淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。,实验所用抗体单克隆抗体：一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，应用细,酶联免疫组织化学,三步法,二步法,荧光标记免疫组织化学,常用染色方法,酶联免疫组织化学常用染色方法,SP,法,SP法,SP,法检测,ERalpha,在绵羊输出管中的分布,SP法检测ERalpha在绵羊输出管中的分布,酶标二步法,酶标二步法,免疫荧光（,FITC,）检测垂体中,LH,免疫荧光（FITC）检测垂体中LH,免疫荧光法（,TRITC,）检测,PRL,免疫荧光法（TRITC）检测PRL,组织切片脱蜡水化,二甲苯，,10min,2,无水乙醇，,5min,90%,乙醇，,5min,80%,乙醇，,5min,70%,乙醇，,5min,蒸馏水，,5min,1.,脱蜡和水化,免疫组织化学步骤,组织切片脱蜡水化1.脱蜡和水化免疫组织化学步骤,抗原修复,高压修复,微波修复,胰酶修复,抗原修复,免疫显色,PBS,洗,3,3min,；,3%H,2,O,2,，室温,5,分钟；,PBS,洗,3,3min,10%,正常山羊血清封闭液,室温,10,分钟,滴加一抗，,4,于湿盒中孵育过夜。,免疫显色 PBS洗,33min；3%H2O2，室,免疫显色,PBS,洗,3,3min,；,二抗孵育,PBS,洗,3,3min,三抗孵育,PBS,洗,3,3min,DAB,染色，苏木素复染,免疫显色 PBS洗,33min；二抗孵育 P,脱水封片,70%,乙醇，,5min,80%,乙醇，,5min,90%,乙醇，,5min,无水乙醇，,5min,二甲苯，,10min,2,取出切片，滴加,30 L,中性树胶，用盖玻片封片晾干后观察结果，进行分析统计。,脱水封片,组织化学结果图片,组织化学结果图片,Journal,IF,Articles,Cell and Tissue Research(,德国,),2.670,171,Histochemistry and Cell Biology(,德国,),2.594,112,Journal of Histochemistry&Cytochemistry(,美国,),2.513,172,Histology and Histopathology(,西班牙,),1.931,135,Applied Immunohistochemistry&Molecular Morphology(,美国,),1.402,63,Cells Tissues Organs(,瑞士,),1.319,58,Acta Histochemica(,荷兰,),0.895,42,European Journal of Histochemistry(,意大利,),0.845,51,Folia Histochemica et Cytobiologica(,波兰,),0.672,38,Acta Histochemica et Cytochemica(,日本,),0.460,36,SCI,收录的组织化学相关杂志,Journal IFArticlesCell and Tis,免疫组织化学(一)课件,免疫组织化学(一)课件,相关抗体及组化相关产品公司,DAKO,Novocastra,Serotec,Zymed,Santa Cruz,Chemicon,R&D,Neomarker,相关抗体及组化相关产品公司DAKO,免疫组织化学相关英文缩写词汇,IHC,，,immunohistochemistry,，免疫组织化学,ICC,，,immunocytochemistry,，免疫细胞化学,AP,，,Alkaline phosphatase,碱性磷酸酶,HRP,，,horseradish peroxidase,，辣根过氧化物酶,PAP,，,peroxidase anti-peroxidase,，过氧化物酶抗过氧化物酶复合物,DAB,，,3,，,3-diaminobenzidine,，二氨基联苯胺,TMB,，,3,，,3,，,5,，,5-tetrametylbenzidine,，四甲基联苯胺,NBT,，,Nitroblue tetrazolium,，四唑氮蓝,BCIP,，,5-bromo-4-chloro-3-indolyl-phosphate,，,5-,溴,-4-,氯,-3-,吲哚磷酸盐,免疫组织化学相关英文缩写词汇IHC，immunohistoc,ABC,，,avidin-biotinylated horseradish peroxidase complex,，,ABC,复合物,FITC,，,fluorescein isothiocyanate,，异硫氰酸荧光素（在荧光显微镜下呈黄绿色荧光）,TRITC,，,tetrametrylrhodarnine isothiocyante,四甲基异硫氰酸罗丹明（在荧光显微镜下呈橙红色荧光）,免疫组织化学相关英文词汇及缩写,ABC，avidin-biotinylated horse,谢谢大家！,谢谢大家！,