单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验三、细胞膜的渗透性,一、实验目的,了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞的速度。,二、实验原理,与人工脂双层膜不同的是，生物膜不但允许水和非极性分子借简单的物理扩散作用透过，还允许各种极性分子，如离子、糖、氨基酸、核苷酸及很多细胞代谢产物通过特有的机制通过。,实验三、细胞膜的渗透性 一、实验目的,血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为,溶血现象。,将红细胞放置在各种溶液中，渗入红细胞的溶质能提高红细胞渗透压，使水进入红细胞，引起溶血及细胞膜破裂。,由于溶质透入速度不同，溶血时间也不同。因此，可通过溶血现象来测量各种物质通透性的差别。,血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。,三、材料、试剂和仪器,1,材料 一龄鸡，将鸡血溶于含有抗凝剂的等渗液中（肝素钠,0.2mg/mL,一般范围在,0.01-0.2mg/mL,；等渗液为,0.15mol/L NaCl,）,2.,试剂,0.17 mol,L,氯化钠，,0.17 mol,L,氯化铵，,0.17 mol,L,硝酸钠，,0.32 mol,L,葡萄糖，,0.32 mol,L,甘油，,0.32 mol,L,乙醇，,0.32mol,L,丙醇；,0.12 mol,L,硫酸 钠，,0.10 mol,L,草酸钠，,0.10mol,L,醋酸钠，,3.,器材 试管，,1mL,移液枪，载玻片，盖玻片，光学显微镜等。,三、材料、试剂和仪器1材料 一龄鸡，将鸡血溶于含有抗,血液的主要成分,（一）血浆,血浆相当于结缔组织的细胞间质，为浅黄色液体，其中除含有大量水分以外，还有无机盐、纤维蛋白原、白蛋白、球蛋白、酶、激素、各种营养物质、代谢产物等。,血液的主要成分（一）血浆,（二）血细胞,血细胞分为三类：红细胞、白细胞、血小板。,1,、红细胞,呈双面凹陷的圆盘状，直径约为,7.5,微米，没有细胞核，细胞质内没有细胞器而有大量血红蛋白。血液的颜色就是由血红蛋白决定的。血红蛋白具有与氧和二氧化碳结合的能力。,（二）血细胞血细胞分为三类：红细胞、白细胞、血小板。,细胞生物学实验课件：细胞膜的渗透性,2,、白细胞,在血液中呈球形，能以变形运动穿过毛细血管壁进入周围组织中。,根据细胞质中是否含有特殊颗粒，可把白细胞分为粒细胞和无粒细胞。,无粒细胞分为两种，淋巴细胞和单核细胞。,粒细胞分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞。,2、白细胞,3,、血小板,也称血栓细胞，在流动的血液中呈双面凸的圆盘状，侧面看呈梭形，直径,2-4,微米。血小板的功能是参与止血与凝血。,3、血小板也称血栓细胞，在流动的血液中呈双面凸的圆盘状，侧面,细胞生物学实验课件：细胞膜的渗透性,红细胞压积：又称血细胞比容，指的是血细胞在血液中所占的容积百分比。正常成年男性为,40%,50%,，女性,37%,48%,，它反映了血液中红细胞和血浆的相对数量变化。,血清：血液经自然凝固,1,2,小时，血凝块回缩，析出淡黄色透明液体即血清。,两个概念,红细胞压积：又称血细胞比容，指的是血细胞在血液中所占的容积百,抗凝血剂的种类与特点,常用抗凝血剂包括：,1.,非肠道用药抗凝血剂：如肝素；,2.,香豆素抗凝血剂类：常用的有双香豆素、华法令和新抗凝等，,通过拮抗维生素,K,使肝脏合成凝血酶原及因子,、,和,减少而抗凝；,3.,抗血小板凝集药物：如阿司匹林，,对血小板环氧化酶有抑制作用；,4.,蛇毒溶栓剂：如去纤酶、抗栓酶和清栓酶，,可溶解已形成的血栓使血管再通，从而起到抗凝血作用。,抗凝血剂的种类与特点常用抗凝血剂包括：,肝素的作用机理,肝素在体内、体外均有强大抗凝作用。,与其带大量负电荷有关，可使多种凝血因子灭活。这一作用依赖于抗凝血酶,III,（,antithrombin III,，,AT III,）。,At III,是凝血酶及因子,、,、,、,等含丝氨酸的蛋白酶的抑制剂。肝素与,At,所含的赖氨酸结合后引起,AT,构象改变，使,At,所含的精氨酸残基更易与凝血酶的丝氨酸残基结合，形成,At III,凝血酶复合物而使酶灭活，,肝素可加速这一反应达千倍以上。,肝素的作用机理肝素在体内、体外均有强大抗凝作用。,四、实验程序,1,血红细胞悬液：,用注射器吸入,2mL,含有肝素的等渗液后从鸡翼下静脉取鸡血,5mL,，加 入,50mL,烧杯，将鸡血用等渗液进行,1,：,10,稀释,。,四、实验程序,2,溶血现象观察：,取试管一支加入,3mL,蒸馏水，加入,1,滴或,2,滴稀释的鸡血，轻混一下，然后静止注意观察溶液的颜色变化。由于红细胞发生破裂，溶液颜色由浑浊的红色逐渐清亮。此即为溶血现象。,2 溶血现象观察：,3,、溶血前后的镜检观察,在溶血前、后分别取一滴血细胞，滴于载玻片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的形态差异。,3、溶血前后的镜检观察,4,鸡红细胞的渗透性记时比较,（,1,）分别取,3,只试管，各加入,3ml,的,0.17 mol,L,氯化钠，,0.17 mol,L,氯化铵，,0.17 mol,L,硝酸钠，加入,2-3,滴血红细胞悬液，观察反应现象。,（,2,）分别取,4,只试管，各加入,3ml,的,0.32 mol,L,葡萄糖，,0.32 mol,L,甘油，,0.32 mol,L,乙醇，,0.32mol,L,丙醇；加入,2-3,滴血红细胞悬液，观察反应现象。,4 鸡红细胞的渗透性记时比较,4,鸡红细胞的渗透性记时比较,（,3,）分别取,3,只试管，各加入,3ml,的,0.12 mol,L,硫酸钠，,0.10 mol,L,草酸钠，,0.10mol,L,醋酸钠，加入,2-3,滴血红细胞悬液，观察反应现象。,（,4,）在反应前、后分别取,1-2,滴血细胞，滴于载玻片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的形态差异。,4 鸡红细胞的渗透性记时比较,五、结果与分析,将观察到的现象记录，并进行分析,五、结果与分析,六、思考题,1.,推断下列溶液的溶血反应会如何。,0.17 mol/L,氯化钾、,0.17 mol,L,硝酸钾,0.12mol,L,氯化镁、,0.12 mol,L,氯化钙、,0.10 mol,L,硫酸钾、,0.10mol,L,醋酸钾、,0.10mol/L,柠檬酸钠、,0.32 mol,L,甘露醇、,0.32mol/L,蔗糖。,2.,抗凝血剂的种类有哪些？肝素抗凝血作用的机理？,六、思考题,渗透压（,osmotic pressure,）,用符号,表示，单位：,atm,的大小可用渗透计测定，或用渗透平衡时高出水面的溶液对下部产生的静水压力表示（,hs,比重,=,体积,比重）。也可用,Vant Hoff,提出的公式计算：,=icRT,或,=n/VRT,c=,溶液的摩尔浓度；,i=,等渗系数,是溶液的渗透压（,kPa,），,V,是溶液的体积（,dm,3,),，,n,是溶质的物质的量，,R,是摩尔气体常数，约,8.314,。,渗透压（osmotic pressure）用符号表示，单位,渗透压的大小和溶液的重量、摩尔浓度、溶液温度和溶质解离度相关，因此有时若得之渗透压的大小和其他条件，可以反推出溶质分子的分子量。,渗透压的大小和溶液的重量、摩尔浓度、溶液温度和溶质解离度相关,