,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,微生物和微生物学检验,微生物和微生物学检验,1,绪论,绪论,2,一、微生物（,microorganisms）：,概念：一群肉眼看不见的微小生物，包括：,细菌、螺旋体、立克次体、衣原体、支原体、放线菌,（原核）、病毒（非细胞）、真菌（真核）。,原核与真核细胞的区别：细胞核的区别,一、微生物（microorganisms）：概念：一群肉眼看,3,最新生物进化分类法：,古细菌,：,(,Archaeobacteria),嵌合进化或共生进化,真细菌：,真核生物：,最新生物进化分类法：,4,微生物与人类的关系：,（1）大多数不致病，甚至是对人、动、植物有益和必需的，如：固氮菌；酿酒、制醋、抗生素、肠道正常菌群。,（2）病原微生物:,pathogenic microorganisms,微生物与人类的关系：（1）大多数不致病，甚至是对人、动、植物,5,二、微生物学(,microbiology)：,微生物的进化分类、生命活动规律及与动植物、人类、自然相互关系。,按研究对象分：细菌、病毒、真菌学,按应用领域分：工业、农业、医学、兽医,按研究方向分：基础微生物、分子微生物学、,微生态学 等,二、微生物学(microbiology)：微生物的进化分类、,6,医学微生物学(,medical microbiology,)：,与医学有关病原微生物的生物性状、致病机理、免疫性及有关技术和理论的应用。,临床微生物学(,clinical microbiology,)：,测重研究感染性疾病诊断方法，提供诊断依据和指导用药。,医学微生物学(medical microbiology)：与,7,三、医学微生物学发展简史,1、微生物学的经验时期：,（）酿酒、制醋、腌腊等食品生产、保存；,（）师道南天愚集：清乾隆年间，,“东死鼠，西死鼠，人见死鼠如见虎。鼠死未几日，人死如圻堵”；“三人行未十步路，忽死两人横截路”,（）人痘接种法：免疫最早概念。,三、医学微生物学发展简史1、微生物学的经验时期：,8,2实验微生物学时期（17世纪始）：,显微镜培养基,（）微生物的发现：列文虎克、巴斯德（发现微生物的作用，创立巴氏消毒法）、李斯特、郭霍氏（固体培养、染色技术）,郭霍氏法则：、。逐渐被淘汰。,新的病原确定方法：,核酸确定法,（）免疫学的兴起、分离：,牛痘、巴斯德（霍乱、炭疽、狂犬疫苗）、白喉抗毒素动物血清治愈白喉。,（）抗生素的发现：,目前遇到的问题：滥用导致耐药性增高,2实验微生物学时期（17世纪始）：,9,3 现代微生物学时期：近二、三十年,（1）新病原微生物的发现,a,传统病原卷土重来；,b,新型病原。,（2）致病机理的深入研究,a,采用新技术；,b.,各种致病因素的分子机理及调控。,3 现代微生物学时期：近二、三十年,10,（3）诊断技术的发展：,三大标记技术,各种分子生物学技术：核酸杂交，,PCR，,微量化，自动化。,（4）各种新型疫苗的研制,传统疫苗、亚单位疫苗、基因工程疫苗、,DNA,疫苗。,（5）免疫学独立,远远超越感染免疫的范畴。,（3）诊断技术的发展：,11,思考：,（）预测微生物学发展下一阶段；,（）目前科学界研究热点？,思考：,12,4基因组微生物学,（）微生物在基因组前时代在生物学研究中的地位；,（）结构简单，可做为模型，,模式生物,；,（）在基因组时代，作为急先锋；,（）微生物基因组的研究成功，必然极大地改变微生物学科现状。,因此，微生物学研究正面临前所未有地机遇和挑战。,从上看出，医学微生物学的发展，也是各种技术方法的发展，也是临床微生物学的发展历史。,4基因组微生物学,13,四、临床微生物学的任务,研究感染性疾病的病原体特征：,传统的病原微生物,条件致病菌,提供快速、准确的病原学诊断；,指导合理使用抗生素；,目前检验科的主要任务。,对医院感染进行监控。,四、临床微生物学的任务研究感染性疾病的病原体特征：,14,五、临微学习方法：,重要性：与毕业后工作紧密相关。,（）平时注意预习、复习；,（）对内容上，紧紧围绕诊断，诊断又是由各种典型特性建立的方法来进行的,抓特性、去共性,（）注意新动向。,五、临微学习方法：重要性：与毕业后工作紧密相关。,15,第一篇微生物学,细菌学总论,第一篇微生物学 细菌学,16,一、细菌(,bacterium),的形态与结构,（一）形态：,个体微小、形态各异,球菌（,coccus）,杆菌 (,Bacillus,),弧菌与弯曲菌,螺旋菌及螺旋体,不规则形。,一、细菌(bacterium)的形态与结构（一）形态：个体微,17,（二）结构：,（二）结构：,18,基本结构：包括胞壁、胞膜、胞浆及核质,细胞壁,：,主要成分,肽聚糖,。,基本结构：包括胞壁、胞膜、胞浆及核质,19,乙酰胞壁酸,聚糖骨架,.4,糖苷键,乙酰葡糖胺,四肽侧链,五肽桥（苷氨酸）,菌肽聚糖厚、层数多、立体状坚固。,乙酰胞壁酸,20,图 金黄色葡萄球糖细胞细胞壁的,肽聚糖结构,图 大肠杆菌细胞壁的肽聚糖结构,图 金黄色葡萄球糖细胞细胞壁的图 大肠杆菌细胞壁的肽聚糖,21,膜磷壁酸,菌细胞壁 壁磷壁酸,特殊结构 表面蛋白：,SPA、M,蛋白,菌细胞壁 磷脂,特殊结构 脂蛋白,类脂,：毒性部分,(外膜),脂多糖（,LPS，,内毒素,）：,核心多糖：属和组特异,特异多糖：种和型特异,膜磷壁酸,22,和,菌细胞壁差异,：,特 征,革兰氏阳性菌,革兰氏阴性菌,强度,较坚韧,较疏松,厚度,厚，2080,nm,薄，510,nm,肽聚糖层数,多，可达50层,少，13层,肽聚糖含量,多，可占胞壁干重5080%,少，占胞壁干重1020%,磷壁酸,+,-,外膜,-,+,结构,三维空间（立体结构）,二维空间（平面结构）,和菌细胞壁差异：特 征革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌 强,23,型细菌,：细胞壁缺陷型细菌。,高渗培养基中：油煎蛋样菌落。,在临床上注意型带来的漏诊。,型细菌：细胞壁缺陷型细菌。,24,2.特殊结构,荚膜,(,capsule)：（）,保护作用；（）致病作用：侵袭力；（）免疫原性；（）鉴别与分型。,2.特殊结构,25,鞭毛,(,flagellum)：,运动器官，抗原。,鞭毛(flagellum)：运动器官，抗原。,26,菌毛,(,Pilus),：（）普通菌毛：粘附素；（）性菌毛：根，长而粗，,菌转移质粒，耐药及毒力质粒。,菌毛(Pilus)：（）普通菌毛：粘附素；（）性菌毛：,27,芽胞,(,Spore,)：不利环境中的一种抵抗形式，是,休眠体,而非繁殖体。,芽胞(Spore)：不利环境中的一种抵抗形式，是休眠体而非繁,28,二、细菌的繁殖与新陈代谢：,掌握几个概念：,自养菌、异养菌；,需氧菌、专性厌氧菌、兼性厌氧菌、微需氧菌,。,二、细菌的繁殖与新陈代谢：掌握几个概念：,29,专性厌氧菌有氧不生长，原因有二：,厌氧菌缺乏细胞色素与细胞色素氧化酶，因此不能氧化那些氧化还原电势较高的氧化型物质。,厌氧菌缺乏过氧化氢酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶,不能清除有氧环境下所产生的超氧离子（,O,2-,）,和过氧化氢（,H,2,O,2,），,因而难以存活。,专性厌氧菌有氧不生长，原因有二：,30,群体细菌的生长繁殖曲线：,迟缓期、,对数期,、稳定期、衰退期,群体细菌的生长繁殖曲线：,31,三、消毒与灭菌,掌握几个概念：,消毒,（,Disinfection）：,杀灭病原微生物的方法。,灭菌,（,Sterilization）：,杀灭物体上所有的微生物（包括病原体和非病原体的繁殖体和芽胞）的方法。,无菌,（,Asepsis）：,物体上或容器内无活菌存在的意思。,防腐,（,Antisepsis）：,防止或抑制微生物生长繁殖的方法。,三、消毒与灭菌掌握几个概念：,32,四、微生物的遗传变异,（一）遗传变异的物质基础,染色体,质粒,（,plasmid）：,细菌存在于染色体外的少部分（约12%）,DNA，,可决定细菌的一些生物学特性。,转位因子：插入顺序、转座子、转座噬菌体,四、微生物的遗传变异（一）遗传变异的物质基础,33,质粒的生物学性质：,1,质粒并非细菌生存所必不可少的遗传物质。,2,质粒的传递（转移）是细菌遗传物质转移的一个重要方式。,3,质粒可自行失去或经人工处理而消失。,4,质粒可以独立复制。,5,可有几种质粒同时共存在于一个细菌内。,质粒的生物学性质：,34,（二）细菌的变异现象,形态与结构变异,培养特性变异,毒力变异,耐药性变异,（二）细菌的变异现象,35,（三）细菌变异的机制,突 变,基因的转移和重组,转化,（,transformation）,是受体菌直接摄取供体菌游离的,DNA,片段，通过与染色体重组，获得了供体菌的部分遗传特性。,转导,(,transduction),是噬菌体为媒介，把供细菌的基因转移到受体菌内，导致后者基因改变的过程。,接合,(,conjugation),是两个通过直接接触，在暂时的沟通中进行基因转移的过程。,（三）细菌变异的机制,36,微生物检验学课件,37,(四,),遗传变异研究的实际意义,在细菌分类上的应用,在诊断中的应用,在预防中的应用,在治疗中的应用,检查致癌物质的作用,在遗传工程方面的应用,(四)遗传变异研究的实际意义,38,五、微生物的致病性与感染,（一）微生物与宿主的关系,常居菌,正常菌群,过路菌 （）抵抗力下降；,（）长期化疗、放 疗、,条件致病菌,：免疫抑制剂患者；,（）外伤；,（）,菌群失调,：菌群失调症,。,五、微生物的致病性与感染（一）微生物与宿主的关系,39,正常菌群的生理意义：,（）生物拮抗；,（）促进机体免疫；,（）与衰老有关：双歧杆菌；,（）合成维生素和细菌素。,正常菌群的生理意义：,40,（二）细菌的致病物质及作用,：,细菌的表面成分：参与粘附、定植和侵入；,毒素及毒性蛋白和酶：,外毒素：,内毒素,：,（二）细菌的致病物质及作用：,41,细菌外毒素举例,细菌种类,革兰氏染色,引起疾病,毒素名称,毒素作用方式,白喉杆菌,+,白喉,白喉毒素,坏死性,霍乱弧菌,-,霍乱,肠毒素,引起小肠过度分泌液体,鼠疫杆菌,-,鼠疫,鼠疫毒素,可能坏死性,破伤风杆菌,+,破伤风,破伤风溶血毒素,溶血性心脏毒素,破伤风痉挛毒素,引起骨骼肌痉挛,产生荚膜杆菌,+,气性坏疽,-,毒素,溶血性卵磷脂酶，坏死性,-,毒素,溶血性心脏毒素,-,毒素,溶蛋白性,细菌外毒素举例 细菌种,42,外毒素与内毒素的主要区别,区别要点,外毒素,内毒素,存在部位,由活的细菌释放至细菌体外,为细菌细胞壁结构成份，菌体崩解后释出,细菌种类,以革兰氏阳性菌多见,革兰氏阴性菌多见,化学组成,蛋白质（分子量27，000900，000）,磷脂一多糖一蛋白质复合物（毒性主要为类脂,A）,稳定性,不稳定，60以上能迅速破坏,耐热，60耐受数小时,毒性作用,强，微量对实验动物有致死作用（以,ug,计量）。各种外毒素有选择作用，引起特殊病变，不引起宿主发热反应。抑制蛋白质合成，有细胞毒性、神经毒性、紊乱水盐代谢等,稍弱，对实验动物致死作用的量比外毒素为大。各种细菌内素的毒性作用大致相同。引起发热、弥漫性血管内凝血、粒细胞减少血症、施瓦兹曼现象等,抗原性,强，可刺激机体产生高效价的抗毒素。经甲醛处理，可脱毒成为类毒霉，仍有较强的抗原性，可用于人工自动免疫,刺激机体对多糖成份产生抗体，不形成抗毒素，不能经甲醛处理成为类毒素,外毒素与内毒素的主要区别区别要点,43,医院感染,：,医院中发生的一切感染。包,括在医院中活动的所有人群。,外源性感染,内源性感染,医院感染：医院中发生的一切感染。包,44,