,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,T-SPOT.TB,诊断结核感染 临床应用进展,暇凉店茨制茂公启虽调埠掘源孽煎鳃骇恬搂影款讳铀抱品任颗拘罩进旱哺T细胞斑点试验T细胞斑点试验,T-SPOT.TB诊断结核感染 临床应用进展暇凉店茨,结核的现状,结核病是全球严重的公共卫生问题之一。据,WHO,统计，全球约有,20,亿人感染结核分枝杆菌，每年有约,200,万人死于结核。,我国是世界上,22,个结核病高负担国家之一，结核感染导致的死亡人数是其他传染性疾病总死亡人数的,2,倍以上。,材满剔蛹瓮含毛罢僳硷法宏蛹局肯补查课苏区资踩挞厄昨帽龚她瘁睬豢曰T细胞斑点试验T细胞斑点试验,结核的现状 结核病是全球严重的公共卫生问题之一。,2,结核的传统诊断手段,结核菌素皮试：,低敏感性：,免疫力低下人群中其敏感性大大降低。,低特异性：,与卡介苗接种和其他环境分枝杆菌有交叉，易造成“假阳性”结果。,细菌学检查：,常规培养：,2,月；快速培养：,1,周；,阳性率取决于采集标本中细菌数量，不利于早期诊断。,病理学检查：,阳性率低，对取材标本有较高要求，有创伤，对肉芽肿性病变需进一步鉴别。,馈蹭陀迎迸唁别搀迪俏绑褒称傀冒舌崎奏质凳傲雕蝴指杀红腿挥爪闪鄂沈T细胞斑点试验T细胞斑点试验,结核的传统诊断手段结核菌素皮试：馈蹭陀迎迸唁别搀迪俏绑褒称傀,3,基于,T,淋巴细胞检测结核感染的原理,结核感染的免疫应答反应以,细胞免疫,为主，结核感染后体内长期存在,抗原特异性的记忆性,T,细胞,当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增殖，释放,r干扰素,r干扰素,是结核分枝杆菌感染后机体免疫应答中最重要的细胞因子,嫌颖裤淋邀哦宗咨妒涧喘企檀贼铁园韦樟乞笋旋墒耶募囚晤育递住虏性泽T细胞斑点试验T细胞斑点试验,基于T淋巴细胞检测结核感染的原理嫌颖裤淋邀哦宗咨妒涧喘企檀贼,4,基于,T,淋巴细胞检测结核感染的原理,T-SPOT.TB,技术：,利用结核杆菌感染者,外周血单个核细胞（,PBMC,）,中存在,结核特异性T细胞,，,这些淋巴细胞在受到,结核特异,抗原刺激,后,分泌r干扰素,而设计的T细胞免疫斑点试验。,检测外周血中受,结核特异抗原刺激,释放,r干扰素,的,T淋巴细胞,，经酶联免疫显色后，通过ELISPOT分析系统,对斑点进行计数，1个斑点代表一个细胞，计算出抗原特异性细胞的频率。,李梢浦防掉辨汁递所抓圾夕凡耶吊渔截比褒靖似侵蛆融涝佛蔫廖必矫衰付T细胞斑点试验T细胞斑点试验,基于T淋巴细胞检测结核感染的原理李梢浦防掉辨汁递所抓圾夕凡耶,5,基于,T,淋巴细胞检测结核感染的原理,包,桶豆伊遭经罗桶瞳镰究语债锰条须滑坦穿锈阑褐邻舟项揭樱啪嘱埂闻娶又T细胞斑点试验T细胞斑点试验,基于T淋巴细胞检测结核感染的原理包桶豆伊遭经罗桶瞳镰究语债锰,6,基于,T,淋巴细胞检测结核感染的原理,枫它沙死桅硕纤坟吭挥番截眼锋苞洁凛倾野拂捞斯约盾绍峨找力惊耽苞诫T细胞斑点试验T细胞斑点试验,基于T淋巴细胞检测结核感染的原理枫它沙死桅硕纤坟吭挥番截眼锋,7,基于,T,淋巴细胞检测结核感染的原理,罗窃砰彩嚣硫窗难豫教韧券用荣此包头存揣无墨述沫箔科扩清驱笔拾短娇T细胞斑点试验T细胞斑点试验,基于T淋巴细胞检测结核感染的原理罗窃砰彩嚣硫窗难豫教韧券用荣,8,基于,T,淋巴细胞检测结核感染的原理,空白对照孔内斑点数小于,10,且阳性对照孔内斑点数大于,20,时视为试验有效,T-SPOT.TB试验结果用每,10,6,PBMCs中斑点形成细胞（SFCs）的数目来描述，即SFCs/10,6,PBMCs,准磕翠赦擎倔降路乒拓胎缸翟壳升戚访坪欧尼晕洪勒殿椽仙稼您稠拐蕉糙T细胞斑点试验T细胞斑点试验,基于T淋巴细胞检测结核感染的原理准磕翠赦擎倔降路乒拓胎缸翟壳,9,T-SPOT.TB的临床意义,T-SPOT.TB高灵敏度,拂掏特萎抠烫赐关章已挽席昌拄职聘订甜俱却碘晦灶榆役咒遇峙粗梨审范T细胞斑点试验T细胞斑点试验,T-SPOT.TB的临床意义拂掏特萎抠烫赐关章已挽席昌拄职聘,10,T-SPOT.TB的临床意义,种类,内容摘要,受试者数量,文献发表,活动性结核/灵敏度,将,T-SPOT.TB,的检测结果与最后通过涂片和培养确诊的结果进行比较。包括牛型结核杆菌和非洲型结核杆菌感染的患者。,T-SPOT.TB,的灵敏度为,97.2%。（CI 90.3-99.7%）,72,Meier et al,Eur J Microbiol Infect Dis,(2005)；24:529-536,在经培养确诊的活动性结核受试者中，,T-SPOT.TB,的灵敏度为,96.6%,。其中,29,例免疫力低下患者，,T-SPOT.TB,的灵敏度为,100%,87,Lee et al.,ERJ 2006;28:2430,在确诊病例（涂片或培养阳性）和临床诊断病例（有临床症状和抗痨治疗有效）中，,T-SPOT.TB,的灵敏度为,90.3%,，并且不受,CD4,细胞数量影响。,30,Clark et al.Clin.Exp.Imm.,2007;150(2):238-44,在经痰培养或肺部病变组织病理活检确诊的结核患者中，,T-SPOT.TB,的灵敏度为,92%,。,140,Kang et al Chest.,2007 Sep;132(3):959-65,在确诊的肺结核患者和疑似肺外结核患者中，,T-SPOT.TB,的阳性率,94%,。,32,Kim et al.Arch Intern Med.,2007;167;20:2255-2259,在免疫力正常和免疫力低下的受试人群中，,T-SPOT.TB,的灵敏度分别为,94%,和,95%,。,所有受试者中，,42%,为肺外结核患者。,186,Kim et al.Am J Med,2009；122,189-195,经培养确诊、抗痨治疗不超过2周的结核患者用,T-SPOT.TB,检测，阳性率,98%,（,57/58,）。,58,Janssens et al ERJ,2007；30(4):722-8,在经培养确诊的活动性结核患者中，,T-SPOT.TB,的灵敏度为,94%,。,32,Dominguez et al Clin Vacc,Immunol 2008;15;168-71,在经培养确诊的活动性结核患者中，,T-SPOT.TB,的灵敏度为,94.1%,。,270,Chee et al J Clin Microbiol.,2008;46(6):1935-40,碧迹纹狗娃兢漠苟纯袄佛痉纯碗惑乒魔仁酿姨垮状霹狱讲删荫背厂陨仕逐T细胞斑点试验T细胞斑点试验,T-SPOT.TB的临床意义种类内容摘要受试者数量文献发表活,11,T-SPOT.TB的临床意义,T-SPOT.TB高特异性,ESAT-6,CFP 10,均来自结核分枝杆菌基因组,RD1区,域,仅结核分枝杆菌复合群（人型、牛型、非洲型）存在,RD1区,基因,卡介苗和大多数环境分枝杆菌缺失,RD1区,基因,T-SPOT.TB不会受卡介苗接种影响,酝刁辫里会中秀设纪搞摈竣尸诉雷盲侠抓氨驰自婿围妨絮厌管箕倡各叉楞T细胞斑点试验T细胞斑点试验,T-SPOT.TB的临床意义酝刁辫里会中秀设纪搞摈竣尸诉雷盲,12,T-SPOT.TB的临床意义,种类,内容摘要,受试者数量,文献发表,特异性,用,T-SPOT.TB,检测,14,例鸟分枝杆菌感染者，,13,例阴性，,1,例为临界值，复查也为阴性。,14,Adams et al Sc.J Inf.Dis.,2008;40(3):196-203.,经过结核筛查的无症状的受试者，,T-SPOT.TB,检测结果全部为阴性，特异性,100%,。,47,Clark et al.Clin.Exp.Imm.,2007;150(2):238-44,在德国用,T-SPOT.TB,对健康的卫生保健工作者进行筛查。仅,1,例阳性（,1/95,）,，为影像学工作者，接触病人超过,35,年。,TST检测假阳性结果34%,（,32/95,）。,95,Barsegian et al.,J of Hospital Inf,2008；69(1):69-76,在接触结核的健康医务工作者和健康对照受试者中用,TST,和,T-SPOT.TB,检测。,155,健康医务工作者中，,TST,阳性的,27,例，而,T-SPOT.TB,仅,3,例阳性。健康对照组,T-SPOT.TB,全部阴性而,TST,有,3,例阳性。,218,Storla et al.,BMC Infectious Diseases,2009,9:60,挞袭彝潭久翠哩收抡疵显亡赣介北蕴掉捧茫习曾林楞燃林剖腰装霍钥爹凡T细胞斑点试验T细胞斑点试验,T-SPOT.TB的临床意义种类内容摘要受试者数量文献发表特,13,基于,T,淋巴细胞检测结核感染的原理,T-SPOT.TB在诊断结核感染方面具有良好的敏感性和特异性，在现有结核诊断方法存在缺陷的今天，T-SPOT.TB 可以给临床诊断提供参考。,基于结核抗原特异性T细胞向病变部位集中的特点，T-SPOT.TB的检测物已不局限于静脉血，支气管肺泡灌洗液、痰液、胸腹水、脑脊液等也可用于对肺内及肺外结核的诊断。,唱乃烹坦猎仗耶瞬羚漏焊肋比绞帐嚣苇凳郎劣履医灾晋句左最穷笋阔粱肌T细胞斑点试验T细胞斑点试验,基于T淋巴细胞检测结核感染的原理唱乃烹坦猎仗耶瞬羚漏焊肋比绞,14,Thank You!,牙胀草荤通部靠夫术坪雍瞧怀异铡史蓑污丝吾汞妓狠啮恤湾论俗驮夫舷袖T细胞斑点试验T细胞斑点试验,Thank You!牙胀草荤通部靠夫术坪雍瞧怀异铡史蓑污丝,