单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,二级,三级,四级,五级,2021/9/7,#,微专题提升,细胞周期同步化,微专题提升细胞周期同步化,1,2017,全国卷,IIIT29,利用一定方法使细胞群体处于细胞周期的同一阶段,,称为细胞周期同步化。,以下是能够实现动物细胞周期同步化的三种方法。回答下列问题:,(1)DNA,合成阻断法:在细胞处于对数生长期的培养液中添加适量的,DNA,合成可逆抑制剂,处于,_,期的细胞不受影响而继续细胞周期的运转,最终细胞会停滞在细胞周期的,_,期,以达到细胞周期同步化的目的。,(2),秋水仙素阻断法:在细胞处于对数生长期的培养液中添加适量的秋水仙素,秋水仙素能够抑制,_,,使细胞周期被阻断,即可实现细胞周期同步化。经秋水仙素处理的细胞,_(,填“会”或“不会”,),被阻断在间期。,(3),血清饥饿法:培养液中缺少血清可以使细胞周期停滞在间期,以实现细胞周期同步化,分裂间期的特点是,_(,答出,1,点即可,),。,DNA,的复制和有关蛋白质的合成、细胞体积略有增大,分裂,分裂,间期,纺锤体的形成,阻止染色体移向两极,不会,2017全国卷IIIT29利用一定方法使细胞群体处于,2,(1)DNA,合成阻断法,教材和试题中经常会出现,DNA,复制抑制剂,,DNA,合成抑制剂顾名思义就是,DNA,合成的抑制剂,可以不影响其他时期细胞的运转,种类也有许多种,如,5-,氟脱氧尿嘧啶、羟基脲、阿糖胞苷、氨甲蝶呤、,高浓度,AdR,、,GdR,和,TdR,等。,试题中出现最多的就是,TdR,,因为它对细胞的毒性相对要小,,历年高考试题中出现过,,如,3,H,标记胸腺嘧啶核苷(,3,H,TdR,)和,5,溴尿嘧啶(,5,BrdU,)。,(1)DNA合成阻断法,3,DNA,合成双阻断法的原理:,利用,TdR,可以抑制,DNA,合成,而不影响其他时期细胞的运转,最终可将细胞群阻断在,S,期或,G/S,交界处,使细胞同步化。,DNA,合成双阻断法的过程:,第一次:在细胞处于对数生长期的培养基中加入过量,TdR,,,S,期细胞被抑制,其它细胞继续运转,最后停在,G1/S,交界处。,S,期细胞如何进入到,G1/S,交界处需要进行第二次。,第二次:移去,TdR,,洗涤细胞并加入新鲜培养液、细胞又开始分裂,当释放时间大于,S,时,所有细胞均脱离,S,期,再次加入过量,TdR,,细胞继续运转至,G1/S,交界处,被过量,TdR,抑制而停止。,DNA合成双阻断法的原理:利用TdR可以抑制DNA合成,而不,4,解析:第,1,次阻断时间相当于,G2,、,M,和,G1,期时间的总和或稍长,释放时间不短于,S,期时间,而小于,G2+M+G1,期时间,这样才能使所有位于,G1/S,期的细胞通过,S,期,而又不使沿周期前进最快的细胞进入下一个,S,期。,第,2,次阻断时间同第,1,次,再释放。,TdR,的浓度不同,表现出的作用不同。,适当浓度的,TdR,就可以像其它四种脱氧核苷酸一样作为底物参与,DNA,合成,所以,3,H-TdR,能标记,S,期的细胞,高浓度,TdR,就会是一种抑制剂,其中高浓度,TdR,对,S,期细胞的毒性较小,因此常用,TdR,双阻断法诱导细胞同步化。,解析:第1次阻断时间相当于G2、M和G1期时间的总和或稍长,,5,高浓度,TdR(,胸腺嘧啶核苷,),阻断,DNA,的合成,(一),高浓度TdR(胸腺嘧啶核苷)阻断DNA的合成(一),6,典例,1,:,(,不定项,),利用一定的方法,使细胞群体处于细胞周期的同一阶段,称为细胞周期同步。,高浓度,TdR(,胸腺嘧啶核苷,),双阻断法是常用的同步化方法。它可逆地起作用,且不影响其他时期细胞的活动,最终可使细胞停留在,S,期或,G1/S,期交界处。研究人员利用胡萝卜细胞,经下图过程的处理,成功将所有细胞阻断在,G1/S,期交界处。下列叙述正确的是,(,),。,注,:,胡萝卜细胞周期中,G1,为,1.3 h,S,为,2.7 h,G2,为,2.9 h,M,为,0.6 h,A.,细胞周期同步利于研究某一时期细胞的代谢、增殖、基因表达或凋亡,B.,通过抑制纺锤体的形成,可使细胞同步于,M,期,C.,若,t2,处理,2.7 h,则,t1,、,t3,都应大于或等于,4.8 h,D.t1,、,t2,和,t3,三次处理的总时长为,7.5 h,C,典例1:(不定项)利用一定的方法,使细胞群体处于细胞周期的同,7,适当浓度,TdR(,胸腺嘧啶核苷,),参与,DNA,的合成,3,H-TdR,能标记,S,期的细胞,(二),适当浓度TdR(胸腺嘧啶核苷)参与DNA的合成3H-TdR能,8,典例:,某哺乳动物体细胞在培养中能够分裂,在培养过程中将适量的,H-TdR,(,H,标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)和某促进细胞分裂的药物加入到培养液中,培养一段时间,可观察和测量到(),A.G1,期变短,该期有大量,3H-TdR,进入细胞核,B.S,期变长,该期有,DNA,复制和核糖体的增生,C.G2,期变短,该期细胞核中有纺锤丝蛋白,D.M,期相对较短,该期细胞的核膜始终完整,C,典例:某哺乳动物体细胞在培养中能够分裂,在培养过程中将适量的,9,(2011年浙江高考试题)为了探究某物质(X)的作用,研究者提出了以下实验思路,(1)实验分组:,甲组:培养液+Y细胞+,3,H-TdR(,3,H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)+生理盐水,乙组:培养液+Y细胞+,3,H-TdR+X(用生理盐水配制),每组设置若干个重复样品。,(2)分别测定两组的CRD(细胞内的放射性强度),求每组的平均值。,(3)将各样品在适宜条件下培养合适时间后,测定其CRD,求每组平均值并进行统计分析。,(要求与说明:答题时用X、CRD、,3,H-TdR表示相关名词;Y细胞是能增殖的高等动物体细胞),请回答:,(1)实验目的,。,(2)预测实验结果及结论:,。,(3)实验中采用,3,H-TdR的原因是:,。,探究X对Y细胞增殖(DNA合成)的影响,如果乙组CRD明显高于甲组,说明X对Y细胞增殖(DNA合成)有促进作用。,如果乙组CRD与甲组基本相同,说明X对Y细胞增殖(DNA合成)无影响。,3,HTdR是DNA合成的原料之一,可根据CRD变化来判断细胞增殖(DNA合成)情况。,(2011年浙江高考试题)为了探究某物质(X)的作用,研究者,10,DNA,复制抑制剂,种类也有许多种,(三),如:,HU,(羟基脲)、,5,溴尿嘧啶(,5,BrdU,),DNA复制抑制剂,种类也有许多种(三)如:HU(羟基脲)、,11,在高等动物,Z,细胞的细胞周期中,各时期经历时间依次为,G1,期为,8h,、,S,期,6h,、,G2,期,5h,、,M,期,1h,。,HU,(羟基脲)是一种,DNA,合成抑制剂,,对,S,期以外的细胞无影响,但可以阻止细胞进入,S,期而停留在,G1/S,交界(看作,G1,期细胞)。科学家利用,Z,细胞和,HU,做了如下实验,每组设置多个重复样品。,A,组:培养液,+Z,细胞,+HU,(用生理盐水配置),B,组:培养液,+Z,细胞,+,生理盐水,培养,14h,后,检测统计,A,、,B,两组各时期细胞数所占百分比(第一次检测)。,将,A,组中的,HU,全部洗脱,更换新鲜培养液培养,10h,,再向,A,组中加入,HU,。,培养,12h,时间后,检测统计,A,、,B,两组各时期细胞数所占百分比(第二次检测)。,请回答:,(,1,),A,组培养液中加入,DNA,合成抑制剂,处于,_,期的细胞立刻被抑制。,(,2,),G1,期细胞发生的主要变化是,_,。,S,期的启动需要一种蛋白质分子作为启动信号,这种蛋白质在,S,期之前合成并存在于,S,期全过程中。若将,S,期和,G1,期细胞融合,则,G1,期细胞核进入,S,期的时间将,_,(填“不变”或“提前”或“延后”)。,(,3,)设计一张表格,并将,A,、,B,两组第一次检测统计的预测结果填入表中。,A,组的第二次检测统计结果是,_,。,在高等动物Z细胞的细胞周期中,各时期经历时间依次为G1期为8,12,分析:(,1,),DNA,复制的时期是分裂间期的,S,期,所以向,A,组培养液中加入,DNA,合成抑制剂,则处于,S,期的细胞立刻被抑制。,(,2,),G1,期细胞发生的主要变化是合成,DNA,所需蛋白质的合成和核糖体的增生。将,S,期和,G1,期细胞融合后,,G1,期的细胞中含有作为启动,S,期信号的蛋白质,使,G1,期的细胞比正常培养下提前进入,S,期。,(,3,),A,组培养液中加入了,HU,,而,HU,能抑制,DNA,合成,阻止细胞进入,S,期而停留在,G1/S,交界(看作,G1,期细胞),因此培养,14h,后,,S,期细胞占细胞周期的比例为,30%,,其余细胞均处于,G1,期,即比例为,70%,。,B,组培养液中没有加入,HU,,细胞正常分裂,因此培养,14h,后,,G1,期,40%,、,S,期,30%,、,G2,期,25%,、,M,期,5%,。据此绘制表格如下:,DNA,合成抑制剂,TdR,及其应用,将,A,组中的,HU,全部洗脱,更换新鲜培养液培养,10h,,再向,A,组中加入,HU,,则,A,组中,30%,处于,S,期的细胞也均进入,G1,期,因此,A,组的第二次检测统计结果是细胞都是,G1,期(或细胞都是,G1/S,交界)。,答案:(,1,),S,(,2,)合成,DNA,所需蛋白质的合成和核糖体的增生 提前,(,3,)表格如上,细胞都是,G1,期(或细胞都是,G1/S,交界),分析:(1)DNA复制的时期是分裂间期的S期,所以向A组培养,13,2019,年,4,月选考试题:,在含有,BrdU,的培养液中进行,DNA,复制时,,BrdU,会取代胸苷掺入到新合成的链中,形成,BrdU,标记链。当用某种荧光染料对复制后的染色体进行染色,发现含半标记,DNA,(一条链被标记)的染色单体发出明亮荧光,含全标记,DNA,(两条链均被标记)的染色单体荧光被抑制(无明亮荧光)。若将一个细胞置于含,BrdU,的培养液中,培养到第三个细胞周期的中期进行染色并观察。下列推测错误的是,A,1/2,的染色体荧光被抑制,B,1/4,的染色单体发出明亮荧光,C,全部,DNA,分子被,BrdU,标记,D,3/4,的,DNA,单链被,BrdU,标记,D,2019年4月选考试题:在含有BrdU的培养液中进行DNA复,14,细胞周期同步化,细胞周期同步化,15,