单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第十一章,第十一章,第十一章,第一节茶叶中咖啡因含量的测定,第二节茶叶中茶多酚含量的测定,第三节茶叶中游离氨基酸总量的测定,第四节茶叶中有害元素含量的测定,一、铅含量的测定,二、汞含量的测定,第五节茶叶检验技能训练,第十一章第一节茶叶中咖啡因含量的测定第二节茶叶中茶多酚,第一节茶叶中咖啡因含量的测定,1.原理,2.仪器试剂,(1)仪器,1)磨碎机：由不吸收水分的材料制成；死角尽可能小，以易于清理；能使磨碎的样品完全通过孔径为6001000m的筛子。,2)样品容器：可用玻璃样品瓶或金属样盒，应清洁、干燥、密闭，用不与样品起反应的材料制成，大小以能装满磨碎样品为宜。,3)恒温水浴。,4)紫外分光光度计。,5)分析天平(分度值为0.0001g)。,(2)试剂所用试剂除另有规定外，均为分析纯(AR)；水为蒸馏水。,第一节茶叶中咖啡因含量的测定1.原理2.仪器试剂(1),第一节茶叶中咖啡因含量的测定,1)500g/L碱性乙酸铅溶液：称取50g碱性乙酸铅，加水100mL，静置过夜。,2)0.01mol/L盐酸：取0.9mL盐酸，用水稀释至1L，摇匀。,3)9mol/L硫酸：取硫酸250mL，用水稀释至1L，摇匀。,4)50mg/L咖啡因标准溶液：称取100mg咖啡因(质量分数不低于99)溶于100mL水中，作为母液，从中准确吸取5mL，加水至100mL，作为标准溶液。,3.操作步骤,(1)样品的制备,1)紧压茶以外的各类茶：先用磨碎机将少量样品磨碎，弃去，再磨碎其余部分。,第一节茶叶中咖啡因含量的测定1)500g/L碱性乙酸铅溶液,第一节茶叶中咖啡因含量的测定,2)紧压茶：在不同形状(砖、块、饼)的紧压茶表面，分别取不少于5处的采样点，用电钻或台钻钻洞取样，混匀，按上述规定制备样品。,(2)试液的制备称取3g(准确至0.001g)磨碎的样品置于500mL锥形瓶中，加入热蒸馏水450mL，立即移入沸水浴中浸提45min(每隔10min摇动一次)，浸提完毕后，立即趁热减压过滤，将滤液移入500mL容量瓶中，用少量热蒸馏水将残渣洗涤23次，并将滤液滤入上述容量瓶中，冷却后，用蒸馏水稀释至刻度。,第一节茶叶中咖啡因含量的测定2)紧压茶：在不同形状(砖、块,第一节茶叶中咖啡因含量的测定,(3)测定用移液管准确吸取试液20mL移入250mL容量瓶中，加入10mL 0.01mol/L盐酸和2mL 500g/L碱性乙酸铅溶液，用水准确稀释至刻度，充分混匀，静置澄清后过滤，准确吸取滤液50mL，注入100mL容量瓶中，加入0.2mL 9mol/L硫酸溶液，加水稀释至刻度，混匀，静置澄清后过滤。,4.结果计算,第一节茶叶中咖啡因含量的测定(3)测定用移液管准确吸取试,第二节茶叶中茶多酚含量的测定,1.原理,2.仪器,1)分析天平：分度值为0.001 g。,2)水浴：温度为70 1。,3)离心机：转速3500 r/min。,4)分光光度计。,3.试剂,1)乙腈：色谱纯。,2)甲醇。,3)碳酸钠(Na,2,CO,3,)。,4)甲醇水溶液(7+3)。,5)福林酚试剂。,第二节茶叶中茶多酚含量的测定1.原理2.仪器1)分析,第二节茶叶中茶多酚含量的测定,6)10%(体积分数)福林酚试剂：将20 mL福林酚试剂转移至200 mL容量瓶中，用水定容并摇匀。,7)75 g/L碳酸钠溶液：称取37.5 g0.01 g碳酸钠，加适量水溶解，转移至500 mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀，室温下可保存1个月。,8)没食子酸标准储备液(1 mg/mL)：称取0.110 g0.001 g没食子酸(GA，相对分子质量为188.14)，于100 mL容量瓶中溶解并定容至刻度，摇匀。,9)没食子酸标准溶液：用移液管分别移取1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL没食子酸标准储备液置于100 mL容量瓶中，分别用水定容至刻度，摇匀，质量浓度分别为10 g/mL、20 g/mL、30 g/mL、40 g/mL、50 g/mL。,4.操作步骤,第二节茶叶中茶多酚含量的测定6)10%(体积分数)福林酚,第二节茶叶中茶多酚含量的测定,(1)样品溶液的制备,1)母液：称取0.2 g(精确至0.0001 g)均匀磨碎的样品置于10 mL离心管中，加入在70 水浴中预热过的70%甲醇溶液5 mL，用玻璃棒充分搅拌均匀，立即移入70 水浴中，浸提10 min(隔5 min搅拌一次)，浸提后冷却至室温，转入离心机，在3500 r/min转速下离心10 min，将上层清液转移至10 mL容量瓶。,2)测试液：移取母液1.0 mL置于100 mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，待测。,(2)测定用移液管分别移取没食子酸标准溶液、水(作空白对照用)及测试液各1.0 mL置于刻度试管内，在每个试管内分别加入5.0 mL的10%(体积分数)福林酚试剂，摇匀，反应38 min后，加入4.0 mL 75 g/L碳酸钠溶液，加水定容至刻度，摇匀，室温下放置60 min。,第二节茶叶中茶多酚含量的测定(1)样品溶液的制备1),第二节茶叶中茶多酚含量的测定,5.结果计算,6.注意事项,第二节茶叶中茶多酚含量的测定5.结果计算6.注意事项,第三节茶叶中游离氨基酸总量的测定,1.原理,2.仪器与试剂,(1)仪器分析天平(分度值为0.0001g)、分光光度计。,(2)试剂,1)pH8.0的磷酸盐缓冲液：按茶多酚测定中的规定，配制1/15mol/L磷酸氢二钠和1/15mol/L磷酸二氢钾溶液，然后取95mL磷酸氢二钠溶液和5mL磷酸二氢钾溶液混匀。,2)20g/L茚三酮溶液：称取水合茚三酮(质量分数不低于99%)2g，加50mL水和80mg氯化亚锡，搅拌均匀，分次加少量水溶解，放在暗处，静置一昼夜，过滤后加水定容至100mL。,3)100mg/L茶氨酸或谷氨酸标准溶液：称取100mg茶氨酸或谷氨酸(质量分数不低于99%)溶于100mL水中，作为母液。,第三节茶叶中游离氨基酸总量的测定1.原理2.仪器与试剂,第三节茶叶中游离氨基酸总量的测定,3.操作步骤,(1)样品的制备按咖啡因含量测定中的规定制备样品。,(2)试液的制备按咖啡因含量测定中的规定制备试液。,(3)测定准确吸取试液1mL，注入25mL容量瓶中，加0.5mL pH8.0的缓冲液和0.5mL 20g/L茚三酮溶液，在沸水浴中加热15min，待冷却后，加水定容至25mL，放置10min后，用5mm比色杯，在570nm处以试剂空白溶液作参比，测定吸光度,A,。,4.结果计算,第三节茶叶中游离氨基酸总量的测定3.操作步骤(1)样品的,一、铅含量的测定,1.双硫腙比色法,(1)原理同第二章第四节中铅含量的测定方法1。,(2)仪器与试剂同第二章第四节中铅含量的测定方法1。,(3)操作步骤,1)样品的消化,第四节茶叶中有害元素含量的测定,一、铅含量的测定1.双硫腙比色法(1)原理同第二章第四节,一、铅含量的测定,硝酸-硫酸法：称取5.00或10.00g粉碎样品，置于250或500mL定氮瓶中，先加少许水使其润湿，再加数粒玻璃珠和1015mL硝酸-硫酸混合液，放置片刻，用小火缓慢加热，待作用缓和，放冷，沿瓶壁加入5mL或10mL硫酸，加热至瓶中液体开始变成棕色时，不断沿瓶壁滴加硝酸-硫酸混合液至有机质分解完全，然后加大火力至产生白烟，待瓶口白烟冒净后，瓶内液体再产生白烟，说明消化完全，此时溶液应澄明无色或微带黄色，放冷，加20mL水煮沸，除去残余的硝酸至产生白烟为止，如此处理两次，放冷，将冷后的溶液移入50mL或100mL容量瓶中，用水洗涤定氮瓶，将洗液并入容量瓶中，放冷，加水至刻度，混匀。定容后的溶液每10mL含有1g样品，相当于加入1mL硫酸。,一、铅含量的测定 硝酸-硫酸法：称取5.00或10.00,一、铅含量的测定,灰化法：称取5.0g样品，置于坩埚中，加热至炭化，然后移入高温炉中，于500灰化3h，放冷，取出坩埚，加1mL硝酸，润湿灰分，用小火蒸干，于500灼烧1h,放冷，取出坩埚，加1mL硝酸(1+1)，加热，使灰分溶解，移入50mL容量瓶中，用水洗涤坩埚，将洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。,2)测定：同第二章第四节中铅含量的测定方法1。,(4)结果计算同第二章第四节中铅含量的测定方法1。,(5)注意事项同第二章第四节中铅含量的测定方法1。,2.原子吸收分光光度法,(1)原理同第二章第四节中铅含量的测定方法2。,(2)仪器与试剂同第二章第四节中铅含量的测定方法2。,(3)操作步骤,一、铅含量的测定 灰化法：称取5.0g样品，置于坩埚中，加,一、铅含量的测定,1)样品的处理：去除杂物，碾碎，混匀，从中称取510g样品(精确到0.01g)，置于50mL瓷坩埚中，用小火炭化，然后移入电阻炉中，于500以下灰化16h后，取出坩埚，放冷后再加少量混合酸，用小火加热，不使其干涸，必要时再加少许混合酸，如此反复处理，直至残渣中无炭粒。,2)萃取分离：同第二章第四节中铅含量的测定方法2。,3)测定：同第二章第四节中铅的测定方法2。,(4)结果计算同第二章第四节中铅含量的测定方法2。,一、铅含量的测定1)样品的处理：去除杂物，碾碎，混匀，从中称,二、汞含量的测定,1.双硫腙比色法,(1)原理样品经消化后，汞离子在酸性溶液中可与双硫腙生成橙红色配位化合物，溶于三氯甲烷，与标准系列溶液比较定量。,(2)仪器与试剂,1)仪器：消化装置、分光光度计。,2)试剂：同第二章第四节中汞含量的测定方法1。,(3)操作步骤,1)样品的消化：称取20.00g样品，置于消化装置的锥形瓶中，加数粒玻璃珠及80mL硝酸、15mL硫酸，转动锥形瓶，防止局部炭化。,2)测定：同第二章第四节中汞含量的测定方法1。,(4)结果计算同第二章第四节中汞含量的测定方法1。,2.原子吸收分光光度法,二、汞含量的测定1.双硫腙比色法(1)原理样品经消化后，,二、汞含量的测定,(1)原理汞蒸气对波长为253.7nm的共振线具有强烈的吸收作用。,(2)仪器与试剂,1)仪器：同第二章第四节中汞含量的测定方法2。,2)试剂,硝酸。,硫酸。,300g/L氯化亚锡溶液：称取30g氯化亚锡，加少量水，再加2mL硫酸使之溶解，加水稀释至100mL，放置于冰箱中保存。,无水氯化钙(干燥用)。,混合酸(1+1+8)：量取10mL硫酸，再加10mL硝酸，慢慢倒入50mL水中，冷却后加水稀释至100mL。,二、汞含量的测定(1)原理汞蒸气对波长为253.7nm的共,二、汞含量的测定,汞标准储备液：准确称取0.1354g于干燥器干燥过的氯化汞，加混合酸(1+1+8)溶解后移入100mL容量瓶中，并稀释至刻度，混匀(此溶液每毫升相当于1.0mg汞)。,汞标准使用液：吸取1.0mL汞标准储备液，置于100mL容量瓶中，加混合酸(1+1+8)稀释至刻度(此溶液每毫升相当于10g汞)。吸取此液1.0mL，置于100mL容量瓶中，加混合酸(1+1+8)稀释至刻度(此溶液每毫升相当于0.1g汞)，临用时现配。,(3)操作步骤,1)样品的消化：称取10g样品，置于消化装置的锥形瓶中，加玻璃珠数粒，加45mL硝酸、10mL硫酸，转动锥形瓶防止局部炭化。,二、汞含量的测定 汞标准储备液：准确称取0.1354g于干,二、汞含量的测定,2)测定：吸取10.0mL样品消化液，置于汞蒸气发生器中，连接抽气装置，沿壁迅速加入3mL 300g/L氯化亚锡溶液，立即通入流速为1.0L/min的氮气或经活性炭处理的空气，使汞蒸气经过氯化钙干燥管进入测汞仪中，读取测汞仪上的最大读数，同时做试剂空白试验。,(4)结果计算,二、汞含量的测定2)测定：吸取10.0mL样品消化液，置于汞,第五节茶叶检验技能训练,1.试剂及仪器的准备,(1)仪器分光光度计。,(2)试剂乙腈、甲醇、碳酸钠、甲醇水溶液(7+3)、10%(体积分数)福林酚试剂、75 g/L碳酸钠溶液、没食子酸