单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,CL-BIII,八通道残留农药测定仪使用说明,上海博纳新技术研究所,2006年4月,CL-BIII八通道残留农药测定仪使用说明上海博纳新技术研究,1,农残常识1,有机磷和氨基甲酸酯类杀虫、杀螨剂的特点。两类农药的作用机理均为抑制动物体内乙酰胆碱酯酶的活性，破坏神经传导，引起一系列的神经中毒症状，直至死亡。二者的主要区别在于：有机磷类杀虫、杀螨剂对乙酰胆碱酯酶的抑制是不可逆的，而氨基甲酸酯类杀虫、杀螨剂对乙酰胆碱酯酶的抑制是可逆的。,农残常识1 有机磷和氨基甲酸酯类杀虫、杀螨剂的特,2,农残常识2,酶抑制率法和酶系酶源：国家标准GB/T 5009.199-2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测推荐的酶抑制率法能方便、快速、准确、成本低廉检测出农产品中的农药残留，也同时肯定了乙酰胆碱酯酶作为快速检测推荐试剂的活性量和具体要求。近年来，我们通过对动物源和植物源的多种丁酰胆碱酯酶、乙酰胆碱酯酶进行检测实验和比较研究，发现乙酰胆碱酯酶对农药的检测敏感度和综合指标优于丁酰胆碱酯酶；确定了有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酸有较专一性的抑制作用；分析出在抑制率70%以下，大多数农药浓度和乙酰胆碱酯酶抑制率呈较好的线性关系，并能实现对单种农药的定量分析；解决了酶的活性和稳定性控制等技术,农残常识2 酶抑制率法和酶系酶源：国家标准GB,3,农残常识3,什么是间接比色法:由于只有当底物与产物之间，在光学性质或其它理化性质有显著差异时，才可能直接用分光光度计法测定，因此对酶活性浓度的监测大多是采用间接监测法。如对胆碱酯酶的测定：底物（硫代乙酰胆碱）及酶水解产物（硫代胆碱和乙酸）并不具有颜色，不能用分光光度计法测定。所以必须设法在原来反应体系中添加一些试剂，这些试剂必须不与酶作用也不影响酶活性，同时又能与酶反应物迅速作用，产生可以被直接测定的物质。这就产生了Ellman的胆碱酯酶测定法即间接连续监测法。目前国内大多厂家生产的快速农药测定仪都采用了 Ellman的胆碱酯酶测定法即间接比色法。该方法通过监测底物（硫代乙酰胆碱），酶水解产物硫代胆碱与添加的二硫代硝基苯甲酸（DTNB）作用立刻生成黄色化合物的反应速度来测定酶活性变化。,农残常识3 什么是间接比色法:由于只有当底物与产物,4,农残常识4,什么是连续监测法：50年代，Warburg首先用分光光度计测定酶的活性。该方法不需停止酶反应就可测定反应物的变化，容易观察到反应的整个过程和干扰情况（通过绘制反应曲线）。因此逐步取代了固定时间法成为目前测酶活性的主要方法。该方法是利用连续对反应过程进行高灵敏度检测，并通过绘制整个酶反应曲线避开延滞期和非线性反应期，只在线性反应期测定最大反应初速度。由于仪器的高精密度，连续监测法能在很短时间，甚至在1分钟反应时间内就能准确测定出活性的抑制率。,农残常识4 什么是连续监测法：50年代，Warburg,5,技 术 指 标,CL-BIII八通道残留农药测定仪的技术指标：,测量波长：410nm,通道数：8,检测用样品器皿：10mm比色皿,光电流漂移：0.5%(3min),暗电流漂移：0.5%(3min),抑制率显示范围：0-100%,抑制率测量范围：10-100%,农药检测：（用甲胺磷农药标样测试）,抑制率示值误差：10%,抑制率重复性误差：5%,技 术 指 标CL-BIII八通道残留农药测定仪的技术指标：,6,第一部分 试剂配制,第二部分 联机使用,第三部分 单机使用,第四部分 相关技巧与常识,目 录,第一部分 试剂配制目 录,7,第一部分,试剂配制,第一部分试剂配制,8,1、试剂的配制,提取液,：把提取液甲乙粉末倒入大玻璃瓶中，并加入,510ml蒸馏水溶解。,酶试剂,：用移液枪取3.1ml提取液，加入酶试剂瓶中。,显色剂,：用移液枪取20ml提取液，加入显色剂瓶，溶,解后倒入棕色瓶中。,底 物,：用移液枪取3.1ml蒸馏水，加入底物瓶中。,1、试剂的配制提取液：把提取液甲乙粉末倒入大玻璃瓶中，并加入,9,2、试剂的保存及注意事项,返回目录,1、本试剂适用的国家标准为：GB/T5009.199-2003。,2、未配制的试剂，要保存在0以下的冷冻箱里。（保质期可达1年）,3、配制好的酶和底物试剂，要保存在4的冷藏箱内。,（保质期为一周）,4、配制好的提取液常温下可以长期保存。,5、配制好的显色剂需避光保存；常温或冷藏，可以 保存1年。,2、试剂的保存及注意事项返回目录1、本试剂适用的国家标准为：,10,第二部分联机使用,第二部分联机使用,11,第一步 仪器连接,第一步 仪器连接,12,1、连接电源,将仪器的电源接头和数据信号线接好。如图：,1、连接电源将仪器的电源接头和数据信号线接好。如图：,13,2、连接电脑,把数据信号线（串口线）接入电脑主机背后的COM口（串口）上，然后把数据信号线与仪器联接起来，这样就完成了仪器与电脑的硬件连接。,2、连接电脑 把数据信号线（串口线）接入电脑主机背后的,14,第二步 软件安装,第二步 软件安装,15,安装“农产品质量安全检测软件”,把“农产品质量安全检测软件”光盘放入电脑光驱中，等自动读取或在光盘目录下找到并双击“setup”后，按提示点击“下一步”安装。安装完成以后，桌面上会出现“食品质量安全检测平台”的图标。,安装完成桌面上出现的图标,安装“农产品质量安全检测软件”把“农产品质量安全检测,16,第三步 仪器设置,第三步 仪器设置,17,仪器设置,打开仪器电源，按仪器“确认”键2次，然后按1次“设置”键，再按“确定”键，选择“受控”后再按1次“确定”键。,打开检测软件，检测软件的用户名默认为“管理员”，密码是“111111”。,检测软件登陆,设置为受控状态,仪器设置打开仪器电源，按仪器“确认”键2次，然后按1次“设置,18,调0/100,注：以上是一个检测窗口的步骤，其他七个窗口都是如此。,等待10-15秒,按“确定”,放入黑块,等待10-15秒,按“确定”,拿出黑块,按“”键,按“”键,按“”键,按“”键,调0/100注：以上是一个检测窗口的步骤，其他七个窗口都是如,19,第四步 空白对照,第四步 空白对照,20,空白对照,用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中,用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中,用小移液枪取0.1ml底物加入试管中,迅速摇匀并倒入比色皿,放入比色池,按“开始对照分析”键,等待对照结束,用大移液枪抽取2.5ml提取液放入试管中,空白对照 用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中 用小移液枪,21,装入对照,按“装入对照分析”键,选择所需对照,选择需要装入对照的通道号（在通道号码前）,按“读取”键完成装入工作,注：对照结束后，对照曲线会自动保存.（标准对照库中已有30种蔬菜的对照，在做这30种蔬菜时，请参照这些对照。）,装入对照 按“装入对照分析”键选择所需对照选择需要装入对照的,22,装入标准对照库,按“装入对照分析”键,选择所需的空白对照和相应的样品修正值,选择需要装入对照的通道号（在通道号码前）,按“读取”键完成装入工作,装入标准对照库 按“装入对照分析”键选择所需的空白对照和相应,23,第五步 样品检测,第五步 样品检测,24,用天平称取1克果蔬,剪成2cm见方,放入烧杯中，用大移液枪抽取5ml提取液加入到烧杯中,静置15分钟（或震荡1分钟）,用大移液枪从烧杯中抽取2.5ml浸泡液移至空试管中,用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中,用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中,静置15分钟,用小移液枪取0.1ml底物加入试管中,迅速摇匀并倒入比色皿,放入比色池,按“开始样品分析”键,等待检测结果,放入烧杯中，用大移液枪抽取5ml提取液加入到烧杯中 静置1,25,第六步 保存检测结果,第六步 保存检测结果,26,保存检测结果,样品结束后，系统自动弹出“检测结果”对话框,选择该通道所测蔬菜名,填写（选择）检测单位,按“退出”键,填写（选择）被检单位和生产单位,按“保存”键，保存检测结果,保存检测结果样品结束后，系统自动弹出“检测结果”对话框 选择,27,备 注,“统计分析”中的“农残检测数据查询统计”对话框有所有保存过的检测数据，在该对话框中有“开始日期“、“结束日期”、“果蔬品种”、“被检单位”等九项选项，对这些选项进行组合选择后，再按“查询”键，就可以将您需要的信息从所有的数据中筛选出来。,另外，“农残检测数据查询统计”对话框中还有“统计分析”和“转存”等功能，当选择出需要的检测数据后，就可以按“统计分析”键或者“转存”键，对数据进行统计分析或制成相应报表。,如果需要打印单项检测结果，则点选该结果后，按“打印当前记录”键，浏览打印效果，再按打印键后打印。,备 注“统计分析”中的“农残检测数据查询统计”对话框,28,检测结果上传,打开“设置”项下的“系统选项”,在“系统选项”中在“注册ID号”处填入ID号 及ID密码,通过右半边的条件选择，查询出需要上传的数据,点击“发送”下的“发送查询的数据”,当检测结束后需要发送数据时，打开“统计汇总”中的“农残检测数据查询统计”,返回目录,检测结果上传打开“设置”项下的“系统选项”在“系统选项”中,29,第三部分单机使用,第三部分单机使用,30,第一步 设置仪器,第一步 设置仪器,31,1、连接电源,将仪器电源连接好，（如需打印，则要将专用打印机连接到仪器的打印接口上。）如图：,1、连接电源将仪器电源连接好，（如需打印，则要将专用打印机连,32,2,、,仪器设置,打开仪器开关后，按提示进入仪器操作主界面。按“设置”键进入仪器设置功能，在“设置”里可以对“日期”、“打印方式”、“对照查询”等进行设置。设置完成后再按“设置”键退回到主界面。,2、仪器设置 打开仪器开关后，按提示进入仪器操作主界面。按“,33,3、调0/100,在主界面状态下，按0/100键，根据屏幕提示逐一调1-8通道的100值，最后按“确定”键结束。,3、调0/100 在主界面状态下，按0/100键，根据屏,34,第二步 空白对照,第二步 空白对照,35,空白对照,注：对照的时间默认为3分钟，如需修改，则先要在“设置”中进行设置。,用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中,用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中,用小移液枪取0.1ml底物加入试管中,迅速摇匀并倒入比色皿,放入第一通道的比色池,按“对照”键，并选择“新建”,等待对照结束,用大移液枪抽取2.5ml提取液放入试管中,空白对照注：对照的时间默认为3分钟，如需修改，则先要在“设置,36,第三步 样品检测,第三步 样品检测,37,用天平称取1克果蔬,剪成2cm见方,放入烧杯中，用大移液枪抽取5ml提取液加入到烧杯中,静置15分钟,用大移液枪从烧杯中抽取2.5ml浸泡液移至空试管中,用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中,用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中,静置15分钟,用小移液枪取0.1ml底物加入试管中,迅速摇匀并倒入比色皿,放入比色池,按“样品”键,等待检测结果,注：按“样品”键后，会从1-8通道依次提示是否准备好开始进行检测，如果该通道不需要进行检测，则选择“不用”。,放入烧杯中，用大移液枪抽取5ml提取液加入到烧杯中 静置1,38,第四步 数据打印及退出,第四步 数据打印及退出,39,数据打印及退出,返回目录,按“打印”键,按“确定”键,用,/,键选择检测数据的编号,按“打印”键进行打印,按“确定”键退出打印状态,数据打印及退出返回目录按“打印”键 按“确定”键 用/键,40,第四部分相关技巧与常识,第四部分相关技巧与常识,41,常见问题及相关技巧1,1.仪器联机操作的情况下，在检测过程中或者开始检测时，电脑出现“没有检测到指定的设备”，是怎么回事？,一般来说出现这种提示说明您的检测仪与电脑硬件连接出现问题，检查的步骤如下：,第一步、确定检测软件的设备设置中相关设置与硬件连接相匹配；,第二步、电脑串口通讯故障，检测方法