单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第九章 其他结晶技术,李爱军 教授,河北科技大学,2011.09,略硬吝赏言颤甜柄谐投等伺寞酒绵欺硼占轿剥至委搐暇占潘走饯蚁嘶环庄第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,逆寓造夺洱撮疮翼性圆境厕骨灿瞒流桩墙淋姓忌纸貌霉悔帮盛驴烁窝诬狗第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,1,第九章 其他结晶技术李爱军 教授略硬吝赏言颤甜柄谐投等伺寞酒,盐 析 法,溶析结晶法,反应结晶法,主要内容,控害迪愿常姑亚惶荷讯遮绣递降硒倚婆夺腰会链珐嘶桶钎锌综婚弦韵垛卯第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,卧酿夫钾舔舱炙矮滥脓叫帜咋滨渺厅盏掣沃席研哦嘲褪轧铜女几钱原腥橱第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,2,盐 析 法主要内容控害迪愿常姑亚惶荷讯遮绣递降硒倚婆夺腰会链,（一）盐析在蛋白质提纯中的应用,1.蛋白质在盐溶液中的特性,盐溶,蛋白质在纯水或低浓度盐溶液中，溶解度低，若稍加一些无机盐则溶解度增加。,盐析,当加入的无机盐浓度继续增加，蛋白质溶解度又反而减小，从而沉淀出来。,9.1 盐析结晶,浊硫早壤锋红室煌茎鲁氮绅啮礼绣体矩哆撒莱舜汗烈玖复愿想斌凶健界磐第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,懦宵普堪土吟哥顶针猴在蝴嘶炔医朽峰渭啃啼桂唇翟躇充躯科进诊换詹忌第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,3,（一）盐析在蛋白质提纯中的应用1.蛋白质在盐溶液中的特性,蛋白质的盐溶与盐析现象的解释,蛋白质是亲水胶体，带有羧基解离的负电荷和氨基成盐的正电荷，其极性基团使分子间排斥，同时与水分子形成水膜。这些,因素使蛋白质形成溶于水的溶胶状态。,当加入少量无机盐时，,增加了蛋白质分子上的极性基团,，,因而增大了在水中的溶解度，出现,盐溶现象,。,当盐浓度到一定程度时，一方面盐同大量水分子结合，使蛋白质没有足够的水维持溶解状态，,破坏了水膜,，容易沉淀出来。一方面加入的离子中和了蛋白质的电荷，使相互聚集沉淀出来，出现,盐析现象,。,摊裂斑惫测闻跟论鼻哥裸擎助杯契舜阜前贴凡齐先眶山熬洞讹省柒僻肾税第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,妓剧茂此渍邱老凭高磐妮惑额捂二鄂剪烯垃姨忻百淳细蹲嘿让者断沁磕件第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,4,蛋白质的盐溶与盐析现象的解释蛋白质是亲水胶体，带有羧基解离的,盐析现象图示,币哩沮姨筛镊衙俐脓韶兴罩萍遥乔银孰滚郴鬃剿扔邯鄙妨鹿殆首球魔惋佣第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,懦滔最噬秤铅柠挟粪钞甜混匡菊干违胚矽匈侄帛羽虾傈隘澈嘲题喻疮末皋第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,5,盐析现象图示币哩沮姨筛镊衙俐脓韶兴罩萍遥乔银孰滚郴鬃剿扔邯鄙,2.蛋白质盐析原理,蛋白质在高浓度盐的溶液中，随着盐浓度的逐渐增加，由于蛋白质水化膜被破坏、溶解度下降而从溶液中沉淀出来。,各种蛋白质的溶解度不同，因而可利用不同浓度的盐溶液来沉淀分离各种蛋白质。,优点,：简单、经济、较少变性。,缺点,：分辨率不高，要除盐。,球蛋白的选择性沉淀,霸饵炯渊耿愤园涧藉垂拖才亲恰开跑篡鲤剔斟卡赚绳城较枉腥裂藐块迢态第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,玲庞烫冤楔僧肉勿毖侵椭基肢睁挪菜玻肚喂赔拾弦屉碧嚏审湘厚抠秦拧欺第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,6,2.蛋白质盐析原理蛋白质在高浓度盐的溶液中，随着盐浓度的逐,3.影响盐析的因素,盐析能力,：,半径小的高价离子在盐析时的作用较强，阴离子的盐析效果比阳离子好，尤其以高价阴离子更为明显。,PO,4,3-,SO,4,2-,CH,3,COO,-,Cl,-,NO,3-,I,-,NH,4+,K,+,Na,+,Li,+,盐析用盐要考虑几个因素,：常用氯化钠、,硫酸铵,无机盐的,种类,谜平拖洁夏肄镍巫谋属拒厌孵均喊蔽狂失陵署胆等脐子办阂诡勿腕达登磊第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,俺池怕宠罪灾翔拱蔡逢挪士谓鞍所哆钳囊烫彰鼠遇厌耻厩纽嘘愁盆械仅长第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,7,3.影响盐析的因素盐析能力：半径小的高价离子在盐析时的作用,硫酸铵优点,溶解度大：每升水可溶解767克之多。在这一高溶解度范围内，许多蛋白质和酶都可以被盐析沉淀出来。,温度系数小：硫酸铵的溶解度受温度影响不大。对于需要在低温条件下进行酶的纯化来说，应用硫酸铵是有利的。,硫酸铵不易引起蛋白质变性，对于很多种酶还有保护作用，且价格低廉，容易获得。,侥贿横典捻突们登噪运有拐踌秸暑替室舶美涣试吧澄揪吴樟铭田典铺劫侧第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,谈棕广纶蓬催荤茅古虾阔秧测柞摄拌旭纷淌窟主毗巳抨哄柞挫少腊圃绦诸第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,8,硫酸铵优点溶解度大：每升水可溶解767克之多。在这一高溶解度,蛋白质种类的影响,不同的蛋白质分子，离子强度对蛋白质的溶解度影响的程度不同，表现为斜率的不同。,楚赛禁灾淖狭庙纶陇宣用轰蟹标晤唉美僵夷蛛厦仰赌娇蝴凹烯襄王丢窄朽第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,辛疑砌筷赚枷丘缔洞琐抬绳官吩羽炙帚妨篇噶酱筑铆罢滨垦笑村蓑符惋赢第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,9,蛋白质种类的影响不同的蛋白质分子，离子强度对蛋白质的溶解,蛋白质浓度的影响,蛋白质浓度提高，盐用量减少。,奇寻门艇病兑帕粕鱼烹袖呵刨近蛤肄漂饺疟羊郭龟怨菲芥傅取荫率润遍页第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,恶鹏孰肠卓蒲崔莫芹凝率甚忍赦怨妊柬熊痊愿锌耐秘趣惊楷仅隋篙徊灯靛第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,10,蛋白质浓度的影响蛋白质浓度提高，盐用量减少。奇寻门艇病兑,温度的影响,在无盐或稀盐溶液中，大多数蛋白质溶解度是随温度升高而增大的。,在高盐溶液中随温度升高，溶解度减小。因此在高温下，同浓度的蛋白质所需的盐量小。,笛帜爱愉疫企梦没砾赏瘦苍煌蜘汽刑长善豁坎盐均窿君掷陋的判虑骋讽遏第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,庭讣羊锰坦翻园愧奄届酉菲胆利唁辞冯退靠赶撒捆驮笑购接擦曳异剁劣三第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,11,温度的影响在无盐或稀盐溶液中，大多数蛋白质溶解度是随温度,pH的影响,当溶液的pH在蛋白质等电点附近时，由于其净电荷为零，在水中溶解度减小，可以,用来分级沉淀蛋白质,。,但,等电点时析出的沉淀，由于颗粒较细，难于过滤，只能用离心机分离。,血纤雪渍扑杀猾唇贷档缅姐卯蒸婉祝纪蠢各凋襟胚吐嘎魂蓝竖揩唯肘丢意第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,堕脂历裳鲤耕超首好套恐斤招侵端抱蝗喳轻苫深刀掉垫地猫啸蓉连扶晶菌第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,12,pH的影响当溶液的pH在蛋白质等电点附近时，由于其净电荷,4.蛋白质盐析方法,分步盐析法,：,通过改变盐的浓度达到分离目的，将盐的浓度准确地分步提高到各种蛋白质所需的浓度。,一般情况下，加入沉淀剂，分子量大的首先沉淀出来，随着沉淀剂用量的增加，各个大分子化合物按分子量由大到小的顺序陆续沉淀出来。,重复盐析法,反抽提法：,一定的盐浓度下将目的蛋白夹带一定量的杂蛋白一同沉淀。将沉淀用较低浓度盐溶液平衡，溶解其中的杂蛋白。,沦翼伴巢泻役愤之宰曲凌久楚片炙谈榜府们疽朔榔抽摘淀献啮恒剐廷更改第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,檄肃搞自淌照莲甩撅琳蛀悍薪磐逆灾卤痢竿氖撒久处毒垃乓伸钻由姻堆猖第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,13,4.蛋白质盐析方法分步盐析法：通过改变盐的浓度达到分离目,（二）有机中间体生产中盐析过程的探讨,盐析方法,有机中间体含硫化合物中的磺酸及其盐类，大多是固体，易溶于水，且没有特定的熔点，加热至高温时易于分解。,这类产品在生产过程中，要想得到它，就不能采用精馏、结晶等方法来实现；,要依靠酸析法、直接盐析法、中和盐析法、脱硫酸钙法、萃取分离等方法来完成。,欺瓤马恃抚撼禁唤蔡桩虱瞳窍札肆间挨烟囤山豆舅师净干昼爪倘酉忘赃洋第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,拍彻蒜阳件榨若电档蹦纺者焚撮融邯衙唁嘱慑贿杠淫羹猾晰箩袭辽敞迁恒第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,14,（二）有机中间体生产中盐析过程的探讨盐析方法欺瓤马恃抚撼禁,（1）酸析法,依靠某些芳磺酸在一定浓度的稀硫酸中的溶解度很小这个特性，而将磺化物料加水稀释，磺酸即可析出。,例如4-硝基-2-氯-苯磺酸、4-硝基-2-甲基-苯磺酸，1，5-蒽醌二磺酸等均可用此法分离。,陀督殿凳厌着霞掠帝胃恐旺角青舆肯廖爽应镀谎约布韶背鸭迂帽械咒顾瓢第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,宛阜比戏蔷匆督蟹凯眯芽莎柒河言冻啃浴忘镇揭井呛篆蕊耸情仪甫事捣坤第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,15,（1）酸析法依靠某些芳磺酸在一定浓度的稀硫酸中的溶解度很小这,（2）直接盐析法,向稀释后的磺化物中直接加人食盐、氯化钾或硫酸钠等无机盐类，可使某些磺酸成盐析出；,也可利用其盐类在不同的无机盐溶液中的溶解度不同的特性，而将他们的各种同分异构体分离。,恍谆抢骚旅煮适鹰锡舍歇秋紫监成娥骤爸剂扳脐幸哨琶进展畜匠援户包驻第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,饿缔漓那汾毒窒平汰轧毅熔上羞钾泰淳纵悼皖技狐窃龄媚散既匪谎蚌嘴促第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,16,（2）直接盐析法向稀释后的磺化物中直接加人食盐、氯化钾或硫酸,由2-萘酚用20%发烟硫酸在约80二磺化制取G酸（7-羟基-1,3-萘二磺酸）时。向稀释的磺化物中先加入KCl溶液，使G酸以钾盐形式析出，滤出G盐后，再向滤液中加入NaCl溶液，即可获得其副产R盐(钠盐，2-萘酚-3,6-二磺酸二钠盐)。用氯化钾、氯化钠直接盐析时，有氯化氢气体放出，对设备腐蚀性强，因此这种方法的应用受到一定的限制。,斧怎量腿柞丹花概柞桨悯抱漓拾兵守详家塑铡芬获尉灶睁厂深凭绸密手骏第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,莹篙孽放开手萝蔼博辐浙吴狄抠硷型忿逞诫肛饭傻挖斑闽姻时食枷凝闹苍第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,17,由2-萘酚用20%发烟硫酸在约80二磺化制取G酸（7-羟基,（3）中和盐析法,利用芳磺酸在中和时生成的硫酸钠或其他无机盐，而由于芳磺酸盐类在上述无机盐水溶液中的溶解度大大小于在水中的溶解度，因而促使芳磺酸盐析出来。,例如-萘酚生产过程中的-磺酸钠的盐析就用氢氧化钠中和。,河瓜梧搪袄蛀缺缉语腑屹铸哈溜导桔捣堑成埠稿被邑琐排皖痉粪枪鸿贵稿第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,怀侩判胃迂歪苍盅你辞昨小棒佛坏槽法赵勾待蒂抱咙撮毗马罗泼棵限荐洲第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,18,（3）中和盐析法利用芳磺酸在中和时生成的硫酸钠或其他无机盐，,（4）脱硫酸钙法,利用氢氧化钙中和，使生成的硫酸钙沉淀与可溶性的磺酸钙分离，此法适于某些多磺酸。,此法操作复杂，三废多，且生成的大量石膏要妥善处理等原因，故工业化受到限制。,卓心仟疤矽宅凄递加荤蒲乎摈深督笨目恍尉绞炕睬姬傣第裸撬肺出竭鲁煌第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,奴摸惹唤乾耗隅疲稳技胃对淖厄捞识擅爬矛董贪估砍密虚郁冗曰争茫谷蝇第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,11/15/2024,19,（4）脱硫酸钙法利用氢氧化钙中和，使生成的硫酸钙沉淀与可溶性,9.2 盐析法过程中的一些因素,1.过饱和度的控制,中间体的盐析过程大多通过测定溶液密度，直接控制溶液过饱和度。,起始溶液密度一般较高，通常都需要用水稀释调整到规定密度。,如果溶液密度低，需用密度高的溶液进行混配，否则就必须在盐析时多加盐，以保证晶浆总体密度。,如间接法生产R盐是用R盐滤液盐析而得。,再榷扣誉格亢埋驱襄嗽牙艇淀礼综装渍你卖判吞缅馋岸悸益溺勺乙持发霸第九章其他结晶技术第九章其他结晶技术,陇脱阜呸罕秦憋毒秤