,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,第二节,基因工程的应用,第三节,蛋白质工程,第二节基因工程的应用,1,【考纲考情】,最新考纲及要求,三年考情(以山东高考卷为例),2014年,2013年,2012年,基因工程的应用,T36非,选择题,无,无,蛋白质工程,无,无,无,【考纲考情】最新考纲及要求三年考情(以山东高考卷为例)201,2,【知识梳理】,考点一,基因工程的工具,1.转基因植物：,类别,应用实例,抗虫,杀虫基因主要有Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等,抗病,抗病毒基因：病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因,抗真菌基因：几丁质酶基因和抗毒素合成基因,【知识梳理】类别应用实例抗虫杀虫基因主要有Bt毒蛋白基因、蛋,3,类别,应用实例,抗逆,抗盐碱和抗干旱的调节细胞渗透压基因、抗冻蛋白基因、抗除草剂基因,改良,转基因玉米中赖氨酸的含量比对照提高30%,转基因延熟番茄储存时间可延长12个月,转基因矮牵牛呈现出自然界没有的颜色变异,类别应用实例抗逆抗盐碱和抗干旱的调节细胞渗透压基因、抗冻蛋白,4,2.转基因动物：,类别,应用实例,提高生,长速度,转外源生长激素基因绵羊和转外源生长激素基因鲤鱼生长速率快、体型大,改善畜,产品品质,将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组，使获得的转基因牛分泌的乳汁中，乳糖的含量大大减低，而其他营养成分不受影响,2.转基因动物：类别应用实例提高生转外源生长激素基因绵羊和转,5,类别,应用实例,生产药物,在牛和山羊等动物乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和-抗胰蛋白酶等重要药品,作器官移,植的供体,利用基因工程方法对猪的器官进行改造，抑制抗原决定基因的表达,设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官,类别应用实例生产药物在牛和山羊等动物乳腺生物反应器中表达出了,6,3.基因治疗与基因诊断：,原理,操作过程,进展,基因,治疗,基因,表达,利用正常基因导入有基因缺陷的细胞中，以表达出正常性状来治疗,临床,实验,基因,诊断,碱基互,补配对,制作特定DNA探针与病人样品DNA混合分析杂交带情况,临床,应用,3.基因治疗与基因诊断：原理操作过程进展基因基因利用正常基因,7,考点二,蛋白质工程与基因工程,1.区别：,项目,蛋白质工程,基因工程,过程,预期蛋白质功能设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列,目的基因的获得重组载体的构建重组载体的导入和筛选目的基因的表达和鉴定,实质,定向改造或生产人类所需的蛋白质,定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品,结果,可生产自然界没有的蛋白质,只能生产自然界已有的蛋白质,考点二 蛋白质工程与基因工程项目蛋白质工程基因工程过程预,8,2.联系：,(1)蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。,(2)基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造。,2.联系：,9,类型一,基因工程的应用,【典例1】,(2015济南模拟)图1表示科学家通过基因工程培,育抗虫棉时，从苏云金杆菌中提取抗虫基因，将其“放入”,棉花细胞中与棉花的DNA分子结合起来而发挥作用的过程示意,图。请据图回答下列有关问题：,类型一 基因工程的应用,10,(1)图2表示在图1过程中同时利用EcoR、EcoR52切割目的基因和,载体，以形成两种不同的黏性末端，这种双酶切的优点是_,。,(1)图2表示在图1过程中同时利用EcoR、EcoR52,11,(2)图1中过程涉及的生物技术是,；在含,四环素的培养基中培养植物细胞，导入重组质粒的细胞能否增殖?,，依据是,。,(3)判断基因转化是否成功，应对转基因植物进行鉴定，如果培育,成功的植株能抗虫，还应进行,水平鉴定，以确定该变异,能否遗传给后代。将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后，往往,有很多植株不再具有抗虫性，原因是_,，,为获得稳定遗传的转基因植株，,还需要对转基因植株进行严格的_。,(2)图1中过程涉及的生物技术是；在含,12,(4)图3表示苏云金杆菌细胞中的某些生命活动过程，则处需要有,酶的催化，两处共有的一种碱基配对方,式是,。,(4)图3表示苏云金杆菌细胞中的某些生命活动过程，则处需要,13,【解题指南】,解答本题应明确以下三点：,(1)限制性内切酶的特点。,(2)三幅图示代表的过程。,(3)基因转化成功的标志。,【解析】,(1)使用双酶切，质粒上的黏性末端不同，用DNA连接酶处理时，质粒不能自身环化，同样技术获得的目的基因也不能自身环化。能够保证目的基因定向插入到特定的位置。,(2)图1中过程是重组载体的构建，是导入受体细胞，是由受体细胞获得棉花植株，原理是植物细胞的全能性，技术手段是植物组织培养。分析图示，目的基因插入的位置是四环素抗性基因所在,【解题指南】解答本题应明确以下三点：,14,位置，即四环素抗性基因被破坏，倘若培养基中含有四环素，则导入重组质粒的细胞不能增殖。(3)生物变异分为可遗传变异和不可遗传变异，不可遗传变异不涉及遗传物质，是由环境条件变化引起的，可遗传的变异涉及遗传物质，因此，此种变异能否遗传，要通过基因(分子)水平的鉴定。抗虫基因导入植物细胞后会整合到细胞中的染色体上，两条同源染色体上只有一条会整合抗虫基因，相当于杂合体植株。(4)分析图示，处进行的生命活动是转录过程，处进行的是翻译过程。,位置，即四环素抗性基因被破坏，倘若培养基中含有四环素，则导入,15,答案：,(1)保证目的基因定向插入特定位置、防止目的基因和质粒环化(答对一点即可),(2)植物组织培养不能在构建基因表达载体的过程中，四环素抗性基因片段被切除,(3)分子(基因)抗虫植株产生的雌雄配子中各有1/2不含抗虫基因，受精时雌雄配子随机结合，可以产生1/4左右的不具有抗虫性植株连续自交,(4)RNA聚合AU,答案：(1)保证目的基因定向插入特定位置、防止目的基因和质粒,16,【互动探究】,(1)图1中过程常用方法有哪些?,提示：,农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。,(2)对转基因抗虫棉进行分子水平的鉴定有哪些方法?,提示：,转录的鉴定：核酸分子杂交；,翻译的鉴定：抗原和抗体杂交。,【互动探究】,17,【加固训练】,乳腺生物反应器是基于转基因技术平台，将外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺，利用动物乳腺能够天然、高效合成分泌蛋白。如图为利用生物工程技术让羊生产治疗心脏病药物tPA的大致过程。请据图分析回答：,【加固训练】乳腺生物反应器是基于转基因技术平台，将外源基因导,18,(1)图中过程选择受精卵作为tPA基因受体细胞的主要原因是,。,(2)图中表示检测与筛选过程，通常采用的方法是_、,。,(3)除利用乳腺、膀胱等生物反应器外，人们还可以利用_,、,等方法来生产上述物质，而传统生产上,述药品是,中提取的，存在的缺点是_,。,(1)图中过程选择受精卵作为tPA基因受体细胞的主要原因是,19,【解析】,(1)受精卵细胞质基质中含有很多个体发育所需的营养物质，容易产生完整的个体，全能性最高。,(2)考查目的基因的检测和表达：用DNA分子杂交技术检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因；用分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA，即用标记的目的基因作探针与mRNA杂交；用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否翻译成蛋白质，即从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交，有时还需进行个体生物学水平的鉴定，通过生物性状表达与否来检测基因工程的成功与否。,【解析】(1)受精卵细胞质基质中含有很多个体发育所需的营养物,20,(3)乳腺生物反应器和膀胱生物反应器是转基因动物生产药物的新方法，传统生产多以微生物发酵工程或动物细胞工程为主要方法，但由于受操作条件相对较苛刻等的限制，所以价格较高。,(3)乳腺生物反应器和膀胱生物反应器是转基因动物生产药物的新,21,答案：,(1)受精卵发育的全能性最容易表达,(2)分子杂交个体生物学水平鉴定DNA分子杂交抗原抗体杂交(答对任意两种即可),(3)工程菌培养动物细胞培养直接从生物组织、细胞或血液由于受操作条件相对较苛刻等的限制，价格十分昂贵,答案：(1)受精卵发育的全能性最容易表达,22,类型二,蛋白质工程的应用,【典例2】,(2013新课标全国卷节选)阅读如下资料：,资料：T,4,溶菌酶在温度较高时易失去活性。科学家对编码T,4,溶菌酶的基因进行了改造，使其表达的T,4,溶菌酶第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T,4,溶菌酶的耐热性。,类型二 蛋白质工程的应用,23,回答下列问题：,该资料属于_工程的范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对_进行改造，或制造一种_的技术。在该实例中，引起T,4,溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的_序列发生了改变。,回答下列问题：,24,【解析】,资料中对基因进行改造，结果得到耐热性提高的蛋白质，因此属于蛋白质工程的范畴。蛋白质工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新蛋白质的技术。对基因进行改造后，第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了二硫键，引起了空间结构的改变，所以最终是由于氨基酸序列的改变导致了空间结构的改变。,答案：,蛋白质现有的蛋白质新蛋白质氨基酸,【解析】资料中对基因进行改造，结果得到耐热性提高的蛋白质，因,25,【加固训练】,胰岛素可以用于治疗糖尿病，但是胰岛素被注射入人体后，会堆积在皮下，要经过较长时间才能进入血液，而进入血液的胰岛素又容易分解，治疗效果受到影响。如图是用蛋白质工程设计的速效胰岛素的生产过程，请据图回答有关问题：,【加固训练】胰岛素可以用于治疗糖尿病，但是胰岛素被注射入人体,26,(1)构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键，图中构建新的胰岛素,模型的主要依据是,。,(2)图中从新的胰岛素模型到新的胰岛素基因的基本思路是什么?,(3)新的胰岛素基因与载体(质粒)结合过程中需要限制性内切酶和,DNA连接酶。已知限制性内切酶的识别序列和切点是-G,GATCC-。,请画出质粒被限制性内切酶切割后所形成的黏性末端：,。DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列,是否有专一性要求?,。,(1)构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键，图中构建新的胰岛,27,(4)若将含有新的胰岛素基因的表达载体导入植物细胞中，最常用,的方法是,。,(5)若要利用大肠杆菌生产速效胰岛素，需用到的生物工程有,、,和发酵工程。,(4)若将含有新的胰岛素基因的表达载体导入植物细胞中，最常用,28,【解析】,(1)构建新的胰岛素模型的主要依据是蛋白质的预期功能。,(2)根据蛋白质的预期功能，推测新的胰岛素中氨基酸的序列，进而,推断基因中的脱氧核苷酸序列来合成新的胰岛素基因。,(3)将目的基因导入植物中，最常用的转化方法是农杆菌转化法。,(4)限制性内切酶识别特定的核苷酸序列，产生特定的黏性末端或平,末端，而DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列却没有专一性要求。,(5)生产自然界中本来没有的蛋白质需要用到蛋白质工程、基因工程,等技术。,【解析】(1)构建新的胰岛素模型的主要依据是蛋白质的预期功能,29,答案：,(1)蛋白质的预期功能,(2)根据新的胰岛素中氨基酸的序列，推测出其基因中的脱氧核苷酸序列，然后利用DNA合成仪来合成新的胰岛素基因。,(3)否,(4)农杆菌转化法(5)蛋白质工程基因工程,答案：(1)蛋白质的预期功能,30,【资源平台】,蛋白质组计划和人类基因组计划的比较,项目,蛋白质组计划,人类基因组计划,启动,时间,2003年正式启动,1990年正式启动,主要,内容,“肝脏蛋白质”和“血浆蛋白质”的研究,测定人类基因组24条染色体上全部DNA序列,参加,国家,16个国家，80多个实验室,6