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,*,按一下以編輯母片標題樣式,按一下以編輯母片,第二層,第三層,第四層,第五層,按一下以編輯母片標題樣式,按一下以編輯母片,第二層,第三層,第四層,第五層,*,光学显微镜的使用方法,实验一,一、光学显微镜构造和使用,目的要求,用品材料,实验内容,复习预习,目的要求,用品材料,实验内容,复习预习,光学显微镜构造和使用,显微镜的构造和使用,目的要求,熟悉光学显微镜根本结构和用途;,掌握显微镜维护的根本知识;,初步掌握低倍镜、高倍镜使用方法。,显微镜的构造和使用,用品材料,玻片标本,字母装片、头发装片、玻璃纤维,实验材料,显微镜、擦镜纸、载玻片、擦布、香,柏油、二甲苯,显微镜的构造和使用,实验内容,重新认识显微镜的结构,显微镜的正确使用方法,显微镜使用的本卷须知,其他常用的光学显微镜,显微镜的构造和使用,实验内容,机械系统局部,光学系统局部,照明系统局部,图像记录系统,光学显微镜的构造,机械局部,调焦器,镜筒,物镜转换器,载物台,推片器与游标卡尺,镜座,镜柱,活动关节,镜臂,光学系统局部,目镜,(,接目镜,),物镜,(,接物镜,),“5,“10的含义。目镜指针,低倍镜,(8x,,,10 x),:,0.25,160,高倍镜,(40 x,45x):0.65,160/0.17,油 镜,(90 x,100 x):1.25,160/0.17,如何计算显微镜的放大倍数?,照明系统局部,光 源,反光镜,聚光镜,光 圈,:,内光源与外光源,:,凹面镜与平面镜,:,升高与降低聚光镜,:,放开与关闭光圈,如何调节观察视野的明暗度?,普通生物显微镜,显微图象系统,生物显微镜,(,含摄影系统,),数码生物显微镜,返回上一层,显微镜的构造和使用,实验内容,光学显微镜的使用,取镜,放镜,对光,放片,调焦,(,粗调焦和细调焦,),低倍镜的使用,显微镜的构造和使用,实验内容,光学显微镜的使用,定位,换镜,调焦,(,细调焦,),高倍镜的使用,显微镜的构造和使用,实验内容,字母装片:,观察中注意字母像与实际装片的位置关系,为什么?,头发装片:,调节推片器定位头发的十字交叉点,玻璃纤维:,调节推片器定位玻璃纤维的十字交叉点,问题思考:,对颜色深的标本与颜色浅的标本在观察过程中有何不同?,使用练习,光学显微镜的使用,返回上一层,显微镜的构造和使用,实验内容,显微镜使用本卷须知,显微镜持取正确姿势,使用前后的镜头维护,注意标本的放置方向,观察时注意双目齐睁,高倍镜不得使用粗调,严禁拆卸任何部件,使用后恢复机器原貌,返回上一层,显微镜的构造和使用,实验内容,其他常用光学显微镜,检测显微镜,解剖显微镜,倒置显微镜,偏光显微镜,检测显微镜,SFC-86,双筒解剖显微镜,其他几种显微镜介绍,其他几种显微镜介绍,倒置显微镜光路图,倒置显微镜,偏振光显微镜,返回上一层,显微镜的构造和使用,复习预习,复习“使用显微镜的本卷须知,预习“生物绘图的要求及方法(p10),预习第二次实验“细胞形态和显微测量,携带实验报告纸、铅笔、橡皮擦、直尺,目的要求,用品材料,实验内容,实验报告,复习预习,二、细胞形态和显微测量,细胞形态和显微测量,目的要求,掌握光镜下细胞的根本形态结构;,掌握临时制片和显微绘图的方法;,进一步掌握显微镜的正确使用方法;,了解细胞显微测量的原理。,细胞形态和显微测量,用品材料,玻片标本,人口腔上皮细胞、平滑肌装片、牛脊髓横,切片、小鼠肝细胞切片、蛙血涂片,实验材料,显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、小镊,子、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、纱布、,擦镜纸、吸水纸、解剖刀、剪刀等,细胞形态和显微测量,实验内容,细胞的形态观察,细胞的显微测量,细胞形态和显微测量,实验内容,扁平细胞,人类口腔上皮细胞,柱状细胞,小鼠小肠上皮细胞,星形细胞,牛脊髓神经细胞,梭形细胞,小鼠平滑肌细胞,圆形细胞,蛙血,(,示红细胞,),小鼠肝细胞切片观察,第一局部,细胞的形态结构观察,返回上一层,人口腔上皮细胞制备,(,临时制片,),取口腔上皮细胞,盖上盖玻片,亚甲基蓝染色,观 察,取干净载玻片,滴入,0.9%NaCl,溶液,人口腔上皮细胞,扁平上皮细胞,扁平上皮细胞,蟾蜍扁平上皮细胞,(HE,染色,),柱状上皮细胞,蝾螈小肠切片,(HE,染色,),星状细胞,离体培养的新生老鼠脊髓神经细胞(HE染色),平滑肌细胞,小鼠平滑肌细胞,小鼠肝细胞切片,小鼠肝细胞内DNA的显示(Feulgen反响),圆形细胞,人血涂片,(Giemsa,染色,),(,红色箭头示白细胞,兰色箭头示红细胞,),细胞形态和显微测量,实验内容,细胞的显微测量需要以目镜测微尺来进行,但其分度值随着放大倍数的变化而变化,长度也不一样,因此需要事先进行标定。而镜台测微尺的长度是的,目镜测微尺的标定是通过镜台测微尺来进行的。,第二局部,细胞的显微测量,返回上一层,0.01mm,0,1,2,3,4,0,1,2,3,4,5,6,7,8,目镜测微尺,(,长度随放大倍数发生改变,),镜台测微尺,(,每一大刻度值为,0.1mm,,小刻度值为,0.01mm),目镜测微尺与镜台测微尺,细胞形态和显微测量,实验内容,标定镜台测微尺,蛙红细胞的测量,细胞的显微测量,放镜台测微尺于载物台,调节使镜台测微尺与目镜测微尺平行,取下镜台测微尺,*,装入目镜测微尺,记录二者在重合线之间的刻度,计算标定值,目镜测微尺的标定,如在低倍镜下重合线之间目镜测微尺的长度为50格,镜台测微尺的长度为68格,那么:,50:68=1:x,x=1.36格,即目镜测微尺的1小格相当于镜台测微尺的1.36格,而镜台测微尺每1小格的长度为10um,那么目镜测微尺每1小格的长度为13.6um。,标定时应注意的问题,标定时必须严格按照操作规程,以免损坏测微尺;,重合线的判断应在二者刻度线完全重合;,比例式的计算;,标定值只能在同一放大倍数下进行测量。,如何进行蛙细胞的显微测量?,目镜测微尺,短轴,长轴,转动目镜镜筒,细胞形态和显微测量,实验报告,描绘在显微镜下观察到的口腔上皮细胞,记录蛙红细胞显微测量结果,细胞膜,细胞质,细胞核,蛙红细胞示意图,分别记录,5,个蛙红细胞的长径和短径,并计算平均值。,蛙红细胞测量结果,单位:,m,1,2,3,4,5,平均,长径,短径,目镜测微尺标定,1标定物镜:40,2重合线之间,,目镜测微尺 格,镜台测微 尺格,3求值:,目镜测微尺的每一小格相当于镜台测微尺的 小格,目镜测微尺的标定值为 微米,细胞形态和显微测量,复习预习,预习实验一中“血涂片的制作方法(p6),预习第三次实验“细胞的化学成分,Thank You,
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