单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,植物细胞有丝分裂的制片与观察,一、实验目的,1.掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术,2.观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形,态特征,二、实验原理,1.,植物根尖、茎尖等分生区细胞能进行有丝,分裂,2.,在有丝分裂过程中，染色体发生规律性动,态变化,3.,染色体可被碱性染料着色，便于观察,4.,根据显微镜下观察到的染色体特点可识别,有丝分裂不同时期,三、实验仪器和药品,1.仪器：,显微镜,、恒温箱、水浴锅、计时器、,烧杯、,载玻片,、,盖玻片,、,剪刀,、,镊子,、,滴管,、刀片、,玻璃皿,2.材料：大蒜,3.药品：诺卡氏固定液 1mol/L的HCl,作为解,离液,、卡宝品红作为染色液,四、实验流程,1,.大蒜根尖培养及固定,：,实验前,3-4d,，将大蒜掰成蒜瓣摆在铺,有四层纱布的托盘里放入温度为25，,一定湿度的培养箱中培养，每天换,水两次待根长到12,cm,将根剪下用吸,水纸吸干水分,将其放入诺卡氏固定液,（乙醇:冰醋酸=3:1）固定424小时。,固定的作用,：杀死细胞，固定细胞形态，,维持染色体的完整性，提,高染色效果,四、实验流程,1,.大蒜根尖培养及固定,2,.装片制作,（1）解离,目 的：,使组织中的细胞分离开,操作：,先用95%的酒精漂洗，在HCL中,60水浴5,min,左右,（c）解离时，细胞已死亡,（a）解离充分是实验成功的必备条件,注意：,（b）解离过度，细胞结构被破坏,解离液：,1mol/L的,HC,l,四、实验流程,1,.大蒜根尖培养及固定,2,.装片制作,漂洗液：,清水（先置于清水中浸泡2min左右）,目的：,洗去解离液，便于染色,次数,：,2-3次,注意：,若不漂洗,解离过度（,HCl,作用）,影响染色（,HCl,与碱性染料反应）,（1）解离,（2）漂洗,备注:将漂洗好的根尖放入盛有清水的培养皿中,四、实验流程,1,.大蒜根尖培养及固定,2,.装片制作,（1）解离,（2）漂洗,（3）取材,部位：,根尖,2-3mm,注意：,要去除根尖乳白色根冠,（,根尖分生区）,大家有疑问的，可以询问和交流,可以互相讨论下，但要小声点,成熟区,伸长区,分生区,根冠,根尖的结构,四、实验流程,1,.大蒜根尖培养及固定,2,.装片制作,（1）解离,（3）取材,（2）漂洗,（4）染色,操作：,用镊子尖把大蒜根尖弄碎,（或者将根尖均,匀切成三份）,用卡宝品红染色,68分钟后,，,盖上盖玻片,再盖上一个载玻片，,用拇指轻,压,载,玻片,随即用一次性筷子进行敲片。,目的：,使细胞分散开，有利于观察,注意：,染色时敲片的力度要适中,染色剂：,卡宝品红染液,时间：,6,-,8,min,（使染色体（质）着色）,染色时间过长,细胞全被染色，,无法观察,染色时间过短,染色体颜色过浅，,影响观察,四、实验流程,1,.大蒜根尖培养及固定,2,.装片制作,解离漂洗取材染色,3,.观察,（1）低倍镜观察：,找到分生区细胞,特点：,细胞呈矩形，排列紧密，有分裂细胞,（2）高倍镜观察：,在低倍镜的基础上换用高倍镜,（3）仔细观察：,先找中期，再找其余各时期，注意染色体特点,（4）移动观察：,慢慢移动装片，完整观察各个时期,四、实验流程,1,.大蒜根尖培养及固定,2,.装片制作,解离漂洗取材染色,3,.观察,低倍镜观察高倍镜观察仔细观察移动观察,注意：,a.观察时应先找到呈矩形的分生区细胞，在 一个视野里观察时，要注意边观察边移动装片，观察有丝分裂各个时期,。,b.显微镜下观察到的都是死细胞，不能看到细胞分裂的动态变化。,c.在显微镜下观察到间期细胞的数目最多,操作要点,1.,解离,：培养好的根尖,先用95,的酒精漂洗再,放入1mol,/,L的HCl中60水浴5min左右,2.漂洗,：先在清水中浸置2min,再用清水洗去解离液2-3,次，最后置于盛有清水的培养皿中,3.取材,：用刀片切取根尖2-3mm处的分生区，并切去乳白,色的根冠,4.染色,：用镊子尖把大蒜根尖弄碎（或者用刀片将根尖,均匀切成三份）,用卡宝品红染色,68min后，,盖上盖玻片,再盖上一个载玻片，用拇指轻压载,玻片随即用一次性筷子进行敲片。,5.观察,：首先在低倍镜进行观察,再到高倍镜下观察。,五、实验结果对比图,间期,前期,中期,后期,末期,后期与末期,的过渡期,六、实验结果展示,前期,中,期,后,期,末,期,六、实验结果展示,间期,后期,中期,末期,1,、,盐酸的作用是什么,？,盐酸起解离的作用，杀死根尖细胞，溶解细胞间质，破坏胞间连丝，使细胞容易发生分离。,2,、,清水漂洗的作用目的是什么？,清水漂洗的作用即洗去材料中的解离液,便于染色。,作用是使细胞中的染色体着色。因为染色体很容易被这样的碱性染料染色。,3,、卡宝品红,的作用是什么？,4,、,装片制作完成，轻轻按压的作用是什么？,使细胞相互分离，在载玻片上平铺成一层，便于观察。,思考,七、作业,1、实验过程中需要注意哪些事项？,2、将实验结果以图片的形式呈现在实验报,告中，若实验失败，请分析失败原因。,3、根据实验结果，请总结植物有丝分裂各,个时期的特点。,请将实验报告发至邱添富邮箱（),