单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,四、血细胞比容测定,血细胞比容（,Hct,，,HCT,，,PCV,）是指一定体积的全血中红细胞所占体积的相对比例。,HCT,高低与红细胞数量、平均体积及血浆量有关，主要用于贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断、血液稀释和血液浓缩变化的测定、红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度的计算等。,【,检测原理,】HCT,直接测定采用离心法，间接测定采用血液分析仪法。,1,离心法 常用微量法和温氏法，其检测原理基本相同，但离心力不同。血液离心后分,5,层，自上而下分别为血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原红细胞层和氧合红细胞层。读取结果以还原红细胞层为准（图,2-19,）。,图,2-19,血细胞比容结果判断,2,血液分析仪法 由红细胞计数和红细胞平均体积导出,HCT,，,HCT,红细胞计数,红细胞平均体积。,【,方法学评价,】HCT,测定的方法学评价见表,2-18,。,【,质量保证,】,【,参考区间,】,成年 男性：,0.40,0.50,；女性：,0.37,0.48,。新生儿,0.47,0.67,。儿童：,0.33,0.42,。,【,临床意义,】HCT,的临床意义与红细胞计数相似。,HCT,减低是诊断贫血的指标，若红细胞数量正常，血浆量增加，为假性贫血；,HCT,增加可因红细胞数量绝对增加或血浆量减少所致（表,2-19,）。,HCT,的主要应用价值为：,1,临床补液量的参考,2,真性红细胞增多症诊断指标,3,计算红细胞平均指数的基础,五、红细胞平均指数,红细胞平均指数包括红细胞平均体积（,MCV,）、红细胞平均血红蛋白量（,MCH,）和红细胞平均血红蛋白浓度（,MCHC,）。红细胞平均指数有助于深入认识红细胞特征，为贫血的鉴别诊断提供线索。,【,检测原理,】,1,手工法 根据,RBC,、,Hb,、,HCT,测定结果计算红细胞平均指数（表,2-20,）。,2,血液分析仪法,MCV,由血液分析仪直接测定导出；由仪器测定,HGB,、,RBC,可计算出,MCH,HGB/RBC,；,MCHC,HGB/,（,RBCMCV,）。,【,方法学评价,】,手工法红细胞平均指数由,RBC,、,HGB,、,HCT,测定后计算而来，因此，必须采用同一抗凝血标本，且所检测的结果必须准确。仪器法红细胞平均指数的测定同样依赖于,RBC,、,HGB,和,MCV,测定的准确性。,【,参考区间,】MCV,、,MCH,、,MCHC,的参考区间见表,2-21,。,【,临床意义,】,红细胞平均指数可用于贫血形态学分类（表,2-22,）及提示贫血的可能原因。但红细胞平均指数仅反映了红细胞群体平均情况，无法阐明红细胞彼此之间的差异。,图,2-20,网织红细胞,六、网织红细胞计数,网织红细胞（,Ret,，,RET,）是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡细胞，略大于成熟红细胞，其胞质中残存的嗜碱性物质,RNA,经碱性染料活体染色后，形成蓝色或紫色的点粒状或丝网状沉淀物。,ICSH,将网织红细胞分为,4,型（表,2-23,，图,2-20,）。,网织红细胞检测的目的：,鉴别贫血的类型（增生性、非增生性、增生增高性）。,检查骨髓的功能。,检测贫血的治疗效果。,评估骨髓移植后、再生障碍性贫血细胞毒药物诱导治疗后或,EPO,治疗后的红细胞造血情况。,【,检测原理,】,1,普通显微镜法 活体染料的碱性着色基团可与网织红细胞,RNA,的磷酸基结合，使,RNA,胶体间的负电荷减少而发生凝缩，形成蓝色的点状、线状或网状结构。,2,血液分析仪法 特殊染料与网织红细胞中,RNA,结合后进行,RNA,定量，可精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数（,Ret%,），并可根据,RNA,含量将网织红细胞分类及计算网织红细胞其他参数。,【,方法学评价,】,网织红细胞计数的方法学评价见表,2-24,。,【,质量保证,】,以手工计数法为重点。,1,选择合适的染料 用于网织红细胞检测的活体染料很多，有煌焦油蓝（,brilliant cresyl blue,）、新亚甲蓝（,new methylene blue,）、中性红、亚甲蓝、甲苯胺蓝等。网织红细胞活体染料的评价见表,2-25,。,2.,正确辨认网织红细胞 外周血液网织红细胞主要为,型，凡含有,2,个或,2,个以上颗粒、且颗粒必须远离细胞边缘的红细胞均应计为网织红细胞。红细胞各种颗粒或包涵体的鉴别见表,2-26,。,3,网织红细胞计数方法,（,1,）,Miller,窥盘法：,ICSH,及我国卫生部临床检验中心推荐使用,Miller,窥盘法（图,2-21,）进行网织红细胞计数。,（,2,）显微成像系统：,图,2-21 Miller,窥盘结构示意图,ICSH,建议，为控制,CV,在,10%,内，应根据网织红细胞比率，决定在连续视野中,Miller,窥盘小方格内实际需要计数的红细胞数量（表,2-27,）。,【,参考区间,】,成人、儿童：,0.51.5,。,新生儿：,2.0,6.0,。,成人绝对值：（,24,84,）,10,9,/L,。,【,临床意义,】,网织红细胞计数是反映骨髓造血功能的重要指标，常见网织红细胞参数及评价见表,2-28,。,1,评价骨髓增生能力，判断贫血类型,2,评价疗效,3,放疗和化疗的监测,4,药物影响,七、嗜碱性点彩红细胞计数,嗜碱性点彩红细胞是不完全成熟的红细胞，胞质内残存的核酸变性、聚集形成颗粒，经碱性染料（如亚甲蓝）染色后，细胞内可见到深染的颗粒；若以,Wright,染色，则在粉红色的胞质中出现蓝黑色颗粒，故名嗜碱性点彩红细胞。,【,检测原理,】,制备血涂片，甲醇固定，亚甲蓝染色。选择细胞分布均匀的区域，油镜下计数,1 000,个红细胞中嗜碱性点彩红细胞的数量，或油镜下计数,50,个视野中的嗜碱性点彩红细胞，同时计数,5,个视野中的正常红细胞数量，计算百分率。,【,参考区间,】,0.03%,。,【,临床意义,】,嗜碱性点彩红细胞计数增高主要见于铅、汞、银、铋等重金属及硝基苯、苯胺中毒，对慢性重金属中毒具有辅助诊断价值。溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、白血病、恶性肿瘤时也可见嗜碱性点彩红细胞增高。,八、红细胞沉降率测定,红细胞沉降率（,ESR,）简称血沉，是指在规定条件下，离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率。,ESR,是传统且应用较广的指标，用于诊断疾病虽然缺乏特异性，但操作简便，具有动态观察病情与疗效的实用价值。,【,检测原理,】,1,魏氏（,Westergren,）法 将枸橼酸钠抗凝血置于特制的刻度血沉管内，在室温下垂直立于血沉架,1h,后，读取上层血浆的高度，即为红细胞沉降率。血沉测定实际上是测量单位时间内红细胞下沉后血浆段的高度，而并非真正红细胞沉降的速度。,2,自动血沉仪法 全自动血沉仪根据红细胞下沉过程中血浆浊度的改变，采用光电比浊法、红外线扫描法或摄影法，动态分析红细胞下沉各个时段血浆的透光度，以微电脑记录并打印结果。,【,方法学评价,】,魏氏法为传统方法，为国内规范方法。,ICSH,、,CLSI,以及,WHO,均有血沉检测的标准化文件。,ICSH,方法（,1993,）及,CLSI,（,2000,）方法均以魏氏法为基础，建立了新的,ESR,检验“参考方法”和供常规使用的“选择方法”，后者简称“常规工作方法”，分别制定了新的操作规程。血沉测定的方法学评价见表,2-29,。,【,质量保证,】,血沉测定迄今仍未建立决定性方法，目前首选参考方法，其次为标准化方法（相当于二级参考方法），再次为选择方法即常规工作方法。,1,ICSH,规定的参考方法 可用于验证其他方法的可靠性 未稀释标本结果纠正公式为：,纠正,ESR,（,mm/h,）（未稀释标本,ESR0.86,）,12,其结果在,95%,限定值范围内（表,2-30,），表明方法满意。因,ESR,影响因素复杂，新方法应建立特定的自身参考区间。,2,魏氏法对抗凝剂、血液标本及物理条件的要求 魏氏法对抗凝剂、血液标本及物理条件的要求见表,2-31,。,3,质控方法 参考方法常作为常规试验的质控方法，但参考方法费时、费力，通常采用替代的稳定化全血质控品作为每日质控。,进行质控必须要满足以下条件：,EDTA,抗凝，,HCT,为,0.35,左右，,ESR,在,15,105 mm/h,范围，检测前将标本颠倒混匀,16,次。,4.,血沉测定影响因素 影响血沉测定的因素见表,2-32,。,【,参考区间,】,魏氏法：男性,0,15mm/h,，女性,0,20mm/h,。,【,临床意义,】,血沉是一项常规筛检试验，虽然特异性差，但仍然具有一定的参考价值。临床上，血沉主要用于观察病情的动态变化、区别功能性与器质性病变、鉴别良性与恶性肿瘤等。,1,血沉加快,（,1,）生理性血沉加快：血沉受年龄、性别、月经周期等影响。,（,2,）病理性血沉加快：对于疾病鉴别和动态观察具有一定参考价值，病理性血沉加快的临床意义见表,2-33,。,2,血沉减慢 见于真性红细胞增多症、低纤维蛋白原血症、充血性心力衰竭、红细胞形态异常等。,