,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,显微镜的基本知识,核工业417医院检验科,王军锋,一、显微镜的基本结构,光学系统,主要包括：物镜、目镜、聚光镜和光源系统四个主要部件。其次还包括滤光片、载玻片和盖玻片,。,机械装置,主要包括：镜座与镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台与移动器、粗动调焦机构、微动调焦机构。,物 镜,物镜一般都是在物镜转换器上旋着。它是显微镜的最主要部件。显微镜的放大及分辩作用主要由它来担当。其优劣直接决定了显微镜的主要光学性能。,物镜都由多块透镜组成，而且放大倍数越高，结构越复杂。,在有的高倍物镜和油镜内还装有弹簧，在物镜前端受压时，镜头可以退缩回来。这样一方面可以保护镜头，另一方面也不会把载玻片和盖玻片压碎。这种物镜称为弹簧物镜。,物镜的分类,根据象差校正情况可分三类：,消色差物镜、复消色差的物镜、平场物镜。,根据物镜的放大倍率不同可分为：低倍、中倍和高倍物镜,。,根据使用方法的差异可分：干燥系、浸液系物镜（据浸液的种类可分为油浸系和水浸系两类）两大类,物镜上的数字和符号,物镜通常都标有表示物镜光学性能和使用条件的一些数字和符号,.,如,“40/0.65”“160/0.17”,。此处的40表示它的,放大倍数,（有的写成40或40：1）；0.65表示它的,数值孔径,（有的写成或,A.0.65）；160,表示使用该物镜时，显微镜的,机械筒长,应为160,mm；0.17,表示使用该物镜时，,盖玻片的厚度,应为0.17,mm。,有些低倍物镜，在有、无盖玻片的情况下都可以使用，所以不标0.17而代之以横线-。有些油镜上标有油（,oil）,字,目 镜,目镜通常插在镜筒上。其作用是把物镜放大后的像作进一步的放大，使人眼睛能够清楚地观察标本。它有单目和双目两种工作方式。,现代目镜均用复合透镜，这样便于将倍率色差、慧差和象差等缺点加以纠正。目镜有两个透镜，近物的称为场镜,，近目的称为目镜。,聚 光 器,聚光器大都通过手旋螺丝固定在镜台下面。,由聚光镜和可变光阑两个部件组成。聚光镜的作用是将光源来的光线会聚到标本上，以便观察。可变光阑又叫光圈或虹彩光阑，装在聚光镜的下方，由十几块金属薄片组成。中央通光孔为圆形，移动可变光阑的把手，可以任意调节通光孔的大小。,光源系统,光源系统用来供给照明标本用的光线。显微镜所用的光源有自然光和电光源两种。,使用电光源的显微镜，其光源系统由光源灯电路、光源灯、透镜、反射镜的等组成,系统通常安装在灯座内。,其 它,滤光片：使用滤光片后可以有选择地滤除某些光线，使观察效果更佳。,载玻片和盖玻片,：载玻片是用来承载样本的，盖玻片是用来覆盖样本的。通常观察标本时，标本夹在两块玻璃之间。下面的一块叫载玻片，上面的叫盖玻片。二者一般是用透明玻璃片制成，只是大小、薄厚有所区别。标准盖玻片的厚度为,0.17,mm;,载玻片的厚度则为,1.1,mm,。,镜座与镜臂,镜座：是显微镜的基座，用以支撑整个镜体。电光源显微镜的镜座为多方形，其内部装有电光源系统。,镜臂：呈弓形，立于镜座的上端。主要用它来支撑镜筒和与镜筒相连接的光学元件。现在的显微镜都和主体并在一起。,镜 筒,镜筒上端可插目镜，下端连接物镜，可分为单目、双目和三目三种。,单目镜筒：现在已经很少用。,双目镜筒：为了适应两眼距离不同的人使用，,调节,瞳距,范围通常是在55-75,mm,。,之间,；,伸缩调节方式,，,其目的是为了适应视力不同的人使用,，,调节范围通常在500度近视和远视之间。,三目镜筒,：,三目镜筒是为显微摄影需要配置的。,物镜转换器,物镜转换器装于镜筒下端，用来安装和转换物镜。按安装物镜的孔数不同，可分为四孔式、五孔式、六孔式、七孔式等几种。以五、六孔居多。,载物台与移动器,载物台用于承放标本。它与显微镜的光轴垂直，,台面中央有一个圆形的通光孔,。,为了便于操作，常在固定式的载物台上增加一个移动器。当,标本被夹入移动器后，使用移动器的横向和纵向调节旋钮，以便上下左右移动标本,。,粗动,调焦机构和,微动,调焦机构,粗动调焦机构简称粗调，是用来快速调焦的装置。由粗动手轮控制。旋转手轮，可以使物、目镜与载物台快速相对移动。,微动调焦机构简称微调，是显微镜作精细调焦用的一种慢动装置。它的总调节距离一般为,1.83,mm,，,由微动手轮控制。旋转微动手轮时，光学系统的移动非常慢。,二、显微镜的使用,使用环境与工作习惯,使用前的准备,反射镜、聚光器的用法和对光方法,1、使用环境与工作习惯,显微镜的工作场所应当清洁、干燥、无震动、无腐蚀性气体存在。,台面和凳子的高度要适当。,调节,瞳距,和,伸缩调节,使双眼均可以清楚观察到影像。,2、使用前的准备,(光学系统的安装),对新购或已经卸掉光学系统的显微镜，使用前必须安装光学系统。安装时，为了防止向下掉灰尘，应按照,先上后下,的顺序，即按照目镜、物镜、聚光镜、反射镜的顺序来安装。,2、使用前的准备(光学系统的安装),安装物镜,:先将镜筒升高，使转换器与载物台之间保持一定的距离。然后，握住物镜，把它放入转换器的螺丝口处，先略向反时针方向旋转，待物镜配上丝纹后，在按顺时针方向旋入，旋至中等程度松紧即可。安装三个以上的物镜时，应根据物镜的放大倍数，,从小到大顺时针安装,，转换物镜时，不要用手推着物镜旋转，那样会使物镜的光轴歪斜。最好用手捏着转换器的转动盘旋转，或用手扶着与物镜转换器衔接处的滚花外圆旋转。,2、使用前的准备(光学系统的安装),安装聚光器:,目镜和物镜装好后，再将聚光器插入载物台的下面的聚光器支架内。插入的高度应使聚光器生至最高时，聚光镜上透镜的端面稍低于载物台的平面，以免载玻片与聚光器的镜头相碰。然后，将聚光器的固定螺丝旋紧。,2、使用前的准备,(校正光轴),校正光轴的意义在于使物镜、目镜、聚光镜的主光轴和可变光栏的中心点重合在一条直线上。所以又叫做合轴调节或中心调节。如果光轴歪斜，会使象差增大，分辨率和清晰度都要下降。,一般由专业工程师来完成。,显微镜的光轴校正好后，如果没有拆下聚光器或其它特殊原因，不必经常校正。,3,、,反射镜、聚光器的用法和对光方法,1）反射镜的用法,一般都使用平面反射镜，反射太阳的散射光。只有在光线不足或窗外有干扰时，才使用凹面反射镜。,3,、,反射镜、聚光器的用法和对光方法,2）聚光器高度的调节,一般的聚光镜，在平行光照射的情况下，其焦点落在它上端透镜平面中心上方约1.25,mm,处。当使用高倍或油镜时，由于放大率大，镜像亮度小，需要较强的照明。因此，应把聚光器升至最高，以便使聚光镜的焦点正好落在标本平面上。但在使用低倍镜时，可将聚光器适当下降。,3,、,反射镜、聚光器的用法和对光方法,3）可变光栏的用法,可变光栏起两个作用。一是控制射向标本的光通量；二是改变聚 光器的数值孔径。在这两个作用中，后者是主要的。为了使物镜的分辨率得到充分的利用，从原则上说，聚光器的数值孔径应与物镜的相同。否则，分辨率或清晰度就要下降。,4、物镜的正确调焦,无论作何种检查，均应从低倍镜开始。,调焦时，先用粗动手轮将镜筒下降，使低倍镜的前透镜与盖玻片之间的距离略缩小于该物镜的工作距离（,5,mm,以下）。为了避免物镜压在标本玻片上，可从侧面窥视。然后，一边从目镜中观察视野，一边利用粗动手轮将镜筒徐徐上升，待初见物像后，改用微动手轮作精细调焦，直至物像最清晰为止。,4、物镜的正确调焦,低倍物镜的视场大，有利于观察标本的全貌。也可利用移动器寻觅观察的目标，如有必要，可将寻得的目标移至视场的中心，为高倍镜观察作好准备。,从低倍镜转换为高倍镜时，如果物镜是显微镜的原配物镜，所用的载玻片、盖玻片有符合标准，一般都可以进行,等高转换,。即转换后，只要稍微调节一下微调旋钮，即可看到清晰的图象。,4、物镜的正确调焦,使用油镜的方法：先将镜筒升高，取下标本玻片，稍稍降低聚光器，并在聚光器的镜头上滴两滴香柏油（油中不应有气泡），再将标本盖玻片放回原处，把聚光器升高，使载玻片的底面与香柏油接触。这样，就完成了,聚光镜的油浸,。接着，在盖玻片上滴上一滴香柏油。然后从侧面窥视，利用粗调使镜筒尽量下降，直至油镜的前透镜浸没在香柏油中（但尚未接触玻片），这样，又完成了,物镜的油浸,。然后，一边从目镜中观察，一边利用微动手轮将镜筒缓缓上升（注意不要拧错了方向，压碎盖玻片），直至视野中出现最清晰的物像为止。,4、物镜的正确调焦,注意：,在使用油镜时，允许在聚光镜与标本之间不加香柏油，即聚光镜上仍以空气为介质，但这会牺牲物镜的分辨率。,注意：,如果油镜观察后，有需要转回高倍物镜观察，应将盖玻片上的油擦去，以免沾污高倍物镜。但聚光器上的油可以不擦，只要把光栏适当缩小一点即可。,4、物镜的正确调焦,注意：,油镜使用完毕后，要及时将香柏油擦拭干净。镜头上可先用干净的擦镜纸擦干净即行。聚光镜的擦拭方法与此相同。如标本需要保存，玻片上的香柏油可用拉纸法擦拭干净。即将擦镜纸覆盖在玻片上，在纸上滴上一滴二甲苯，趁湿将纸条平拖着往外拉，连续几次即可擦干净。,注意：,最后指出：在整个调焦过程中（尤其是高倍物镜和油镜的调焦），每个动作都要缓慢进行。否则，物像会一闪而过，找不到观察目标。,三、,显微镜的维护,经常性的维护,使用中的维护,光学系统的擦拭,机械部分的擦拭,1、经常性的维护,防潮：如果室内潮湿，光学镜片容易生霉，生雾。一旦生霉，很难除去。内部的镜片由于不便擦拭，潮湿对其危害性更大。机械零件受潮，容易生锈。为了防潮，除了选择干燥的房间外，存放地点也应离墙、离地、远离潮湿。,防尘：光学元件表面落入灰尘，不仅影响光线通过，而且经光学系统放大后，会生成很大的污斑，影响观察。灰尘、砂粒落入机械部分，还会增加磨损，引起运动受阻，危害同样很大。因此，必须经常保持显微镜的清洁,。,1、经常性的维护,防腐蚀：显微镜不能和具有腐蚀性的化学试剂放在一起，如硫酸、盐酸、强碱等。,防热,：,防热的目的主要是为了避免热胀冷缩引起的开胶与脱落。,2、使用中的维护,微调是显微镜机械装置中较精细而又容易损坏的元件，拧到了限位以后，就拧不动了。此时决不能强拧。否则，必然损坏。调焦时，遇到这样情况，应将微调退回,35,圈，重用粗调调焦，待初见物像后，在改用微调。,使用高倍镜观察液体标本时，一定要加盖玻片。否则，不仅清晰度下降，而且试液容易浸入高倍镜的镜头内，使镜片遭受污染和腐蚀。,2、使用中的维护,油镜使用后，一定要擦拭干净。香柏油在空气中暴露时间过长，就会变稠和干涸，到这时再去擦拭就比较困难了。镜片上留有油渍，清晰度必然下降。,仪器出了故障，不要勉强使用。否则，可能引起更大的故障和不良后果。例如，在粗动手轮不灵活时，如果强行旋动，会使齿轮、赤条变形或损坏。,3、光学系统的擦拭,平时对显微镜的各光学部分的表面，用干净的毛笔清扫或用擦镜纸擦拭干净即行。在镜片上有摸不掉的污物、油渍或手印；镜片生霉、生雾；长期挺用后复用时，需要进行比较认真的擦拭。,擦拭范围：目镜和聚光镜允许拆开。物镜因结构复杂，装配时又要专门的仪器来校正才能恢复原有的精度，故严禁拆开。,3、光学系统的擦拭,拆卸目镜和聚光镜时，要注意以下几点：,（1）小心谨慎,（2）拆卸时要标记各元件的相对位置（可在外壳上划线作标记）、相对顺序和镜片的正反面，以防重装时弄错。,（,3,）,操作环境保持清洁、干燥。拆卸目镜时，只要从两端旋出上下两块透镜即可。目镜内的视场光栏不能移动，否则会使视场界线模糊。,3、光学系统的擦拭,擦拭方法,：,先用干净的毛笔或吹风球除去镜片表面的灰尘。然后用干净的绒布在,镜片中心开始向边缘作螺旋形单向运动。擦完一次把绒布换个地方，直至擦干净为止。如果镜片上有油渍、污物或指印等擦不掉时，可用柳枝条裹上脱脂棉，蘸少量酒精和乙醚,合液（酒精,80%,，乙醚,20%,）擦拭。如果有较重的霉点或霉斑无法除去，可用棉签,湿后粘上碳酸钙粉（含量为,99%,以上）进行擦拭。擦拭后，应将粉末清除干净。,3、光学系统的擦拭,镜片是否干净可用可用镜片上的反射光线进行检查