,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,传染性法氏囊病卵黄抗体效价的测定-PPT讲义课件,1,传染性法氏囊病卵黄抗体效价的测定-PPT讲义课件,2,传染性法氏囊病卵黄抗体效价的测定-PPT讲义课件,3,氯化钠、琼脂粉、培养皿、打孔器、酒精灯、鸡蛋、96孔血凝板、微量移液器、烧杯、带盖瓷盘、注射器、生理盐水、蒸馏水、标准抗原等,仪器设备,氯化钠、琼脂粉、培养皿、打孔器、酒精灯、鸡蛋、96孔血凝板、,4,方法步骤,（一）1%琼脂平板制备,（二）稀释卵黄,（三）加样,（四）反应,方法步骤（一）1%琼脂平板制备,5,（一）1%琼脂平板制备,1.制板：,用810%氯化钠溶液配制1%琼脂溶液，电炉加热使之充分溶化后，倒入直径90,mm,培养皿，制成厚度为2.53,mm,琼脂平板；平置，在室温下冷却凝固后打孔。,（一）1%琼脂平板制备 1.制板：,6,2.打孔：,在琼脂板上按7孔一组的梅花形打孔（中间1孔，周围6孔），孔径5,mm，,孔距25,mm，,将孔内的琼脂用8号针头斜面向上轻轻将琼脂挑出，勿伤边缘或使琼脂层脱离皿底。一般打孔两组。,2.打孔：,7,3.封底：,用酒精灯轻烤平皿底部至微烫，封闭孔底部，以防侧漏。,3.封底：,8,4.编号：,在平皿底用蜡笔编号，第一组编号16，第二组编号712。,4.编号：,9,（二）稀释卵黄,先用微量移液器在96孔血凝板加生理盐水，每孔50微升，共加112孔；再于第一孔加50微升卵黄，倍比稀释至12孔。,（二）稀释卵黄 先用微量移液器在96孔血凝板,10,（三）加样,中央孔加入传染性法氏囊病病毒标准抗原，加样量以“满而不溢”为原则。用微量移液器小心的将96孔血凝板中不同浓度卵黄液小心加至琼扩板的周边孔上，血凝板孔号与琼扩板孔号要一一对应，加样从低浓度开始加样，每加一个浓度，吸嘴尽量喷干净,（三）加样 中央孔加入传染性法氏囊病病毒,11,（四）反应,将琼扩板静置12,min，,加盖、倒置入湿盒中，放入37的温箱中2448,h,。,（四）反应 将琼扩板静置12min，加盖、,12,（五）结果判断,2448,h,后，观察出现白色沉淀线的卵黄稀释度，即是,IBD,抗体效价。,（五）结果判断2448h后，观察出现白色沉淀线的卵黄稀释度,13,课后作业,1.写出实习报告；,2.掌握,IBD,卵黄抗体的检测方法。,课后作业1.写出实习报告；,14,感谢您的关注,感谢您的关注,