单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,完整版课件,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,二级,三级,四级,五级,完整版课件,*,植物花粉母细胞减数分裂制片技术和染色体观察,1,完整版课件,植物花粉母细胞减数分裂制片技术和染色体观察1完整版课件,一、实验目的,1、观察染色体在减数分裂中的行为和变化,识别减数分裂各个时期特点,加深对减数分裂遗传学意义的理解;,2、掌握动、植物减数分裂的制片技术。,2,完整版课件,一、实验目的2完整版课件,二、实验原理,减数分裂是性母细胞在配子形成过程中一种特殊的细胞分裂方式。,在减数分裂过程中染色体只复制一次,而细胞却连续分裂两次,因此一个二倍体的性母细胞便形成为四个单倍体的性细胞。,高等植物花粉母细胞经减数分裂产生四个小孢子,染色体数目已减半为n。小孢子进一步发育为花粉粒。,3,完整版课件,二、实验原理 减数分裂是性母细胞在配子形成过,减数分裂过程,1、,间期(前间期),2、减数第一分裂,3、中间期,4、减数第二分裂,前期I 中期I 后期I 末期I,前期II 中期II 后期II 末期II,4,完整版课件,减数分裂过程1、间期(前间期)前期I 中期I 后期I,在适宜的时期采集植物的花蕾,经固定液杀死固定,使细胞保持活体时形态。然后进行压片染色等处理,在显微镜下进行观察,可以看到小孢子母细胞的减数分裂过程,研究染色体在形态和数量上的动态变化特点。,5,完整版课件,在适宜的时期采集植物的花蕾,经固定液杀死固定,三、实验用品,实验材料:玉米,(,Zea mays,2n=20),雄花序或小麦、,蚕豆(,Vicia faba,2n=12,)花蕾、,蝗虫,(grasshopper,初级精母细胞,2n=22+X,),精巢,仪器物品:显微镜、水浴锅、镊子、解剖针,实验药品:卡诺,氏,固定液、70%乙醇、改良品红或醋酸洋红。,6,完整版课件,三、实验用品实验材料:玉米(Zea mays 2n=20),四、实验操作流程,取材 固定,剥离花药,染色 压片 镜检,7,完整版课件,四、实验操作流程 取材 固定 剥离花药,1.取材:,选取适当大小的花蕾,是观察花粉母细胞减数分裂的关键性步骤。不同植物取材时期不同。,玉米:抽雄前两周(大喇叭口期),,雄穗尖端露出以前7-10d时,先以手指挤摸穗尖的外部,觉得松软时,在雄花序所在部位用刀片纵向划一切口,用镊子取出花序分枝。此时雄花序先端小穗颖长4mm左右,花药长23mm。,每小穗中有两朵小花,各有花药3个。通常从一个分枝上从幼嫩的部位向较为成熟的区域混合制片。,小麦:孕穗期以后,旗叶抽出1 2cm,取出穗子。,时间一般在上午9时10时,不同材料间稍有差异。,8,完整版课件,1.取材:8完整版课件,玉米大喇叭口期,玉米小穗,玉米雄花序,9,完整版课件,玉米大喇叭口期玉米小穗玉米雄花序9完整版课件,小麦孕穗期,小麦的小花,实验中注意观察:每一分枝是中上部还是下部小穗发育最早?,10,完整版课件,小麦孕穗期小麦的小花实验中注意观察:每一分枝是中上部还是下部,2固定:,取下的材料应立即放入固定液中杀死固定。,一般采用卡诺氏固定液,无水酒精:冰醋酸3:1,一般固定424h。可用95 乙醇代替无水乙醇。,如需长期保存,可先用70%酒精冲洗2次然后转入70%酒精中保存。,注意:固定液时应现配现用,固定时不要在阳光下暴晒。,11,完整版课件,2固定:11完整版课件,3、剥离花药,取出保存的花序,吸去小穗过多保存液,置于载玻片中央,挑出花药,12,完整版课件,3、剥离花药12完整版课件,4染色:,在剥离的材料上滴加1滴染液,在室温下,染色1015min。,13,完整版课件,4染色:在剥离的材料上滴加1滴染液,在室温,5.压片,盖上盖玻片,在盖玻片上垫12层吸水纸,用一只手稳住载玻片和盖片,防止滑动,,另一只手用解剖针的针柄敲击盖片,14,完整版课件,5.压片14完整版课件,6.镜检观察,先用低倍镜观察,找到一个好的分裂相,再转用高倍镜观,察。要求能够分辨减数分裂的各个时期,特别是能够独立,辨认第一次减数分裂前期的各个时期,7.观察永久制片,在显微镜下观察,并与自己的制片比较,掌握各个时,期的特点。,注意:怎样区分各个时期?,15,完整版课件,6.镜检观察15完整版课件,五、实验结果与分析,1绘出自己所制作片子的分裂相(3个以上时期),,说明其时期和特点。,2.分析自己制片操作过程中出现的问题及可能原因。,16,完整版课件,五、实验结果与分析1绘出自己所制作片子的分裂相(3个以上时,注意事项,爱护显微镜。,一次取材不要太多。,用过的载玻片必须刷洗干净,用过的盖玻片丢入垃圾桶,不得直接冲入水池。,17,完整版课件,注意事项 爱护显微镜。17完整版课件,减数分裂前期 I,细线期,偶线期,偶线期,18,完整版课件,减数分裂前期 I细线期偶线期偶线期18完整版课件,粗线期,双线期,终变期,中期,后期,后期,19,完整版课件,粗线期双线期终变期中期后期后期19完整版课件,前期,II,中期,II,后期,II,末期,II,四分体,小孢子,20,完整版课件,前期II中期II后期II末期II四分体小孢子20完整版课件,21,完整版课件,21完整版课件,玉米减数分裂中期I,玉米减数分裂中期 II,M1 中期与M2中期的比较,22,完整版课件,玉米减数分裂中期I玉米减数分裂中期 IIM1 中期与M2中期,前期 I,细线期,偶线期,粗线期,23,完整版课件,前期 I细线期偶线期粗线期23完整版课件,双线期,终变期,中期 I,24,完整版课件,双线期终变期中期 I24完整版课件,后期 I,末期 I,25,完整版课件,后期 I末期 I25完整版课件,前期 II,中期 II,26,完整版课件,前期 II中期 II26完整版课件,后期 II,末期 II,27,完整版课件,后期 II末期 II27完整版课件,取材及固定,捕捉雄性蝗虫,直接投入到卡诺固定液中固定24小时,然后转到70的酒精中保存。,雌雄虫辨别,(外观),雄性蝗虫虫个体小,雌虫较大;,雌性蝗虫尾部有产卵瓣,雄虫无,。,28,完整版课件,取材及固定雌雄虫辨别(外观)28完整版课件,解剖取出,精巢,:,先将蝗虫翅膀剪去,在翅基部的后方,相当于腹部背侧的前端,用解剖剪将其体壁剪开,上方两侧的黄色团块就是精巢。精巢由许多排列在一起的精小管组成。,将精巢取出置于一洁净的培养皿内,用蒸馏水洗涤干净。用解剖针将精巢轻轻分离开,即可看到大量的精细小管。,29,完整版课件,解剖取出精巢:先将蝗虫翅膀剪去,在翅基部的后方,相当于腹部背,取12根精小管放在干净的载玻片上,用吸水纸将上面的水吸净,,在精小管位置上滴加一滴改良苯酚品红染液,在室温下染色10-15min。,30,完整版课件,取12根精小管放在干净的载玻片上,用吸水纸将上面的水吸净,,附:显微镜操作和使用,开关显微镜,移动显微镜。,调节,目镜间距和目镜微调,,使两个眼睛视野相同和清晰,防止眼睛疲劳。,先低倍镜,后高倍镜观察,高倍镜下不准用粗调。,高倍镜下不得取、放载玻片。,使用结束:电压或光亮度调至最小,,关闭并拔下电源,降低载物台,,最低倍物镜或无目镜的镜筒居中,,防尘罩,,填写使用记录,,请老师验收方可离开。,31,完整版课件,附:显微镜操作和使用 开关显微镜,移动显微镜。31完整版课件,调节目镜间,距和目镜微调,32,完整版课件,调节目镜间32完整版课件,感谢亲观看此幻灯片,此课件部分内容来源于网络,,如有侵权请及时联系我们删除,谢谢配合!,感谢亲观看此幻灯片,此课件部分内容来源于网络,,