单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,1、统计细菌数目常用的方法?,2、通常选择菌落数为多少的平板进行计数?,统计几个平板?,3、稀释涂布平板法计算土样菌数的公式?,各母代表的含义?,4、实验设置对照的主要目的?,5、鉴定选出的是分解尿素的细菌的方法？,原理是什么？,背诵听写,1、统计细菌数目常用的方法?背诵听写,1,一、基础知识,（阅读P27-28页第三段，讨论回答以下问题）,1、纤维素在生物圈的分布状况？,2、纤维素酶的组成及作用？,3、纤维素分解菌的筛选方法？,4、纤维素分解菌的筛选原理？,一、基础知识（阅读P27-28页第三段，讨论回答以下问题）1,2,1、纤维素在生物圈的,分布,状况？,2、,纤维素酶的组成,及作用？,纤维素是,地球上含量最丰富的多糖类物质,。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中,棉花,是自然界中纤维素含量最高的天然产物。,纤维素酶是一种,复合酶,，一般认为它至少包括三种组分，即,C,1,酶,、,C,X,酶,和,葡萄糖苷酶,，前两种酶使纤维素分解成,纤维二糖,，第三种酶将纤维二糖分解成,葡萄糖,。,纤维素和纤维素酶,1、纤维素在生物圈的分布状况？2、纤维素酶的组成及作用？纤维,3,纤维素分解菌的筛选,1、纤维素分解菌的,筛选方法:,2、纤维素分解菌的筛选,原理:,刚果红染色法,：这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选,刚果红,是一种染料，它可以,与纤维素形成红色复合物,，,但并不和纤维二糖、葡萄糖发生这种反应,。当纤维素被纤维素酶分解后刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的,透明圈,。这样我们可以,通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌,纤维素分解菌的筛选1、纤维素分解菌的筛选方法:2、纤维素分解,4,生物选修一新专题二课题二课件,5,1、说出分离分解纤维素的微生物实验流程？,2、为什么要在纤维素丰富的环境中寻找纤维素分解菌？滤纸埋在土壤中有什么作用？,3、选择培养的目的？为什么？该实验的选择培养基为什么有选择作用？按物理性质属哪种培养基？,4、鉴定该细菌用的染料是？常用的刚果红染色法有几种？分别是？试评价其优缺点,5、如何进一步确定得到的是纤维素分解菌？纤维素酶发酵的方法有？纤维素酶的测定方法？,二、实验设计及操作,（阅读P28-30页，讨论回答）,1、说出分离分解纤维素的微生物实验流程？二、实验设计及操作（,6,实验操作：,土壤取样,选择培养,梯度稀释,将样品涂布到,鉴别纤维素分解菌的培养基上,挑选,产生透明圈的,菌落,实验操作：土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解,7,土壤取样,取样的环境,？作出这种选择的,理由,是什么？,选择纤维素丰富的环境,，如树林中多年落叶形成的,腐殖土,，多年积累的枯枝败叶等等。,生物与环境的相适应关系,，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境,土壤取样取样的环境？作出这种选择的理由是什么？,8,选择培养,1、选择培养的目的：,增加纤维素分解菌的,浓度,，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物,2、,选择培养基：,参照课本29页旁栏中的比例配置，回答下列问题,是液体培养基，原因是配方中无凝固剂,有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所以能分解纤维素的 微生物可以大量繁殖,用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照,a、旁栏中是液体培养基还是固体培养基？为什么？,b、这个培养基对微生物是否具有选择作用？,如果具有，是如何进行选择的？,c、你能否设计一个对照实验，说明,选择培养的作用,？,选择培养1、选择培养的目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确保能,9,为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？,在选择培养的条件下，可以使那些,能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，,而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用,在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的,10,刚果红染色法：,方法一：,先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应,方法二,：,在倒平板时就加入刚果红,思考：,这两种方法各有哪些优点与不足？,方法一,缺点会使,菌落之间发生混杂,；优点是显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用,方法二,优点是,操作简便,，不存在菌落混杂问题,缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质，可以,使能产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应,；缺点二,有些微生物具有降解色素的能力,，它们在长时间培养过程中会降解刚果红，形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分,刚果红染色法：方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应,11,课题延伸,本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选，但是这只是分离纯化的第一步。,为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验,，纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等,纤维素,后所,产生的葡萄糖进行定量的测定。,课题延伸 本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的,12,小结,1、纤维素的基本单位和结构？,2、纤维素酶的组成及作用？,3、纤维素分解菌的筛选方法？,4、纤维素分解菌的筛选原理？,5、选择培养的目的？为什么？该实验的选择培养基 为什么有选择作用？按物理性质属哪种培养基？,6、鉴别培养基中鉴定细菌用的染料是？常用的刚果红染色法有几种？分别是？试评价其优缺点,7、如何进一步确定得到的是纤维素分解菌？纤维素酶发酵的方法有？纤维素酶的测定方法？,小结1、纤维素的基本单位和结构？,13,植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解，回答下列问题：,（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将,分解成,（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR)时，CR可与纤维素形成,色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌对，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的,（3）为从富含纤维素的上壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表)：,注：“+”表示有，“-”表示无。,据表判断，培养基甲,填“能”或“不能”用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是,；培养基乙,填“能”或“不能”用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是,植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解，回答下列问题：注：“+,14,（1）纤维二糖 葡萄糖,（2）红 透明圈,（3）不能 液体培养基不能用于分离单菌落,不能 培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌,（1）纤维二糖 葡萄糖,15,