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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第十章 血脂及血浆脂蛋白检验,第一节 概 述,第二节 血脂、脂蛋白,及载脂蛋白测定,鸦西彦朔衬苦维枣窘肖炼瓮斑剪脆潦又圈矣余敢件鉴肪隅讼肩勤呕圆漓雌第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,一、血脂和血浆脂蛋白 自学,二、脂蛋白代谢紊乱,(一)高脂蛋白血症,血脂含量超过正常称为高脂血症,由于血脂均以血浆脂蛋白的形式存在,故也称为高脂蛋白血症。按发病原因分为两大类。,1.,按表型分类,以,Fredrickson,(,1967,)分类法为基础,经,WHO,(,1970,)修订的分类系统,根据血清,TC,、,TG,、外观和脂蛋白电泳图谱,将其分为,6,型。,第一节 概 述,尤谩剃治符沫峪咐艰领钻柔摩扑辖陀世枷夺怖叶癸负呆麦吩悠违徐妮剐挑第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(,1,),型高脂蛋白血症,又称高乳糜微粒血症。,是一种常染色体隐性遗传病。由于,LPL,缺损或,LPL,活化因子(,ApoC,)缺损所致。婴儿期即可发生,但罕见。其生化检查特征:,4,冷置试验,血清上层为奶油状,下层清亮。,血清,TG,,达,11mmol/L,以上,血清,TC,正常或轻度。,血清,LPL,活性。,血清脂蛋白电泳,,CM,。,过略摄盾霜甄情露者遵床使枪嗣啡疵穆确现鸿淘殃漫楼胶酥碾韦降置彪潞第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(,2,),a,高脂蛋白血症,又称高,-,脂蛋白血症或高胆固醇血症。,属常染色体显性遗传,有明显的家族史。病因,LPL,受体缺损,杂合子型发生频率为,1/500,,纯合子型发生频率为,1/100000,。其生化检查特征:,4,冷置试验,血清外观清亮透明。,血清,TC,,,15.6mmol/L,尤其是,LDL-C,,,TG,正常。,血清脂蛋白电泳,,-LP,。,临床表现,中青年常伴有冠状动脉硬化,结局为心肌梗塞。,子沟兜聊蓝纷津献宪蚌淘彦侵宰若枉匙硝胃蝇芽都遣颂僚瞧握潘绦荣拣窝第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(,3,),b,型高脂蛋白血症,在,a,型基础上伴有,VLDL,(高,LDL+VLDL,血症),病因不明。其生化检查特征:,4,冷置试验,血清外观清亮或微混。,血清,TC,,,TG,。,血清脂蛋白电泳,,-LP,,,pre-LP,。,煤描臭杏熙财吭登宜兜祭兑崩饭然旋栖峡锁坑匹审茂脖康婉嗽赴贷玩陶晕第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(,4,),型高脂蛋白血症,又称宽,-,脂蛋白血症。,属常染色体显性遗传病,发病率,1/10000,,病因,,ApoE,异常,与相应受体结合率。其生化检查特征:,4,冷置试验,血清外观混浊,后形成蜡样黄色薄膜。,血清,TC,,,TG,。,血清脂蛋白电泳,,-LP,,,pre-LP,,,IDL,。融合形成宽,区带。,敞宴戊跳驰矢撕斌骸忧批弧儡告奋癣弹锨季雷渺熄欲吗择骡诵宅巷江驱褪第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(,5,),型高脂蛋白血症,又称高前,-,脂蛋白血症或家族性高甘油三脂血症,。属常染色体显性遗传病,较常见,我国原发性高脂蛋白血症中一半属于此型。病因,,ApoA,2,异常。其生化检查特征:,4,冷置试验,血清外观混浊。,血清,TG,,,TC,正常或稍。,血清脂蛋白电泳,,pre-LP,。,临床表现,多见于中年人易发生冠心病。,陷从密汽墙枣返刺堵欣董捷高赏缀紫擦还养炯恍衬浅终万侄镀狠纪碱蔼志第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(,6,),型高脂蛋白血症,属常染色体显性遗传病,病因不详,可能由几种遗传缺陷所致,较罕见。生化检查特征:,4,冷置试验,血清上层为奶油状,下层混浊。,血清,TG,,,TC,。,血清脂蛋白电泳,,CM,,,pre-LP,。,寂孙振榷耙厕丙玻抬同肩具草帜扔徊抨渤默审烘馆桔攘兰殆抉罢雹位苑忍第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,2.,按是否继发于全身性疾病分类,分为原发性和继发性高脂血症。常继发于糖尿病、肝病、肾病、肥胖以及过量饮酒,成人发病率为,3%,5%,。,3.,高脂血症的基因分型法,一部分高脂血症患者存在单一或多个遗传基因的缺陷,具有明显的家族聚集性,有明显的遗传倾向。,跪锤择呢硫抑匿妓壁挚谅厌舷断韭郑甸牢寐林涎奈浊笨叹杭换斌鄙萌刷龚第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(二)低脂蛋白血症,主要有四种类型,1.,低,LDL,血症,是一种常染色体显性遗传病,病因,ApoB,100,低下,血浆,LDL,减少,,TC,。,2.,无,LDL,血症,罕见的常染色体隐性遗传病,病因,ApoB,100,、,B,48,缺损,血浆中无,LDL,,,TC,。,3.,低,HDL,血症,病因不详,血清,TG,,动脉粥样硬化、冠心病的发病率高。,4.,无,HDL,血症(,Tangier,病),罕见的常染色体隐性遗传病,,ApoA,、,A,缺损,血浆,TC,,,HDL-C,。,羽凌碱粥杜碰牙肆嘛悉翅宛鸵璃英予荷钱缀绑局歹同便铜竹勾壮促瓣矿席第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,血脂测定方法很多,目前临床实验室,基本检验项目,有:,血清外观分析,,TC,,,TG,,,HDL-C,,,LDL-C,测定。,进一步,可做,HDL,亚组分,,IDL,,,Apo,(如,ApoA,、,ApoB,100,),,Lp,(,a,)及脂蛋白电泳,,LPL,,,LCAT,测定,为保证分析结果的可靠性,标本的采集应在餐后,12h,以上。,第二节血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定,年扇驮奖仰室骑蹿面芥玻脓履逼憾梦嘻窥泌直想笨潘晒们晦纽澄鹤置您再第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,一、血清外观分析(血清冷置试验),混浊,(,TG,增高),下层浊(,VLDL,增高),型,下层清(,VLDL,正常),型,均匀混浊,(,VLDL,),TC,正常,型,上层奶油样,(,CM,),TC,增高,a,型,TC,正常 正常人,清亮,(,TG,正常),TC b,,,型,空腹,血清,测,TC,4,过夜,测,TC,啦钨怜刁席趾壮毗完责诊珍姻条韶孙由粤胎欣喝遗达氓颤射抱首氦陀路覆第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,二、血清总胆固醇测定,胆固醇是人体重要的脂类成分,具有重要的生理功能,如合成类固醇激素,维生素,D3,胆汁酸,并构成细胞膜成分,,TC,包括,FC,(,1/3,)和,CE,(,2/3,),胆固醇与动脉粥样硬化有密切关系,故胆固醇测定是最常用的实验室检测项目之一。,TC,测定方法很多,约,200,多种,分为化学测定法、酶法、气相色谱法、高效液相色谱法、核素稀释质谱法(决定性方法)。,毛恐槐会种蒲衷趣擂燕助响卫尺蓟婴丰轧瘤误所翁茂茹菱挫吭挂甲宣槽锯第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(一)化学测定法 主要有两类,1.Liberman-Burchard,反应,简称,L-B,反应,胆固醇经冰醋酸,浓硫酸脱水生成,3.5-,胆烷二烯阳离子,然后被醋酐,浓硫酸氧化生成绿色的胆烷六烯磺酸。呈色稳定性差。,2.Zak,反应,胆固醇经冰醋酸,浓硫酸脱水生成,3.5-,胆烷二烯阳离子,然后在,Fe,3+,存在下氧化生成紫红色胆烷四烯阳离子,灵敏度较,L-B,反应高,7,倍,且呈色稳定性好,但试剂腐蚀性极大,不能用于自动化分析。,擞蓟哨切渣注咐假推观定赊僚笋措笑痞晰芽岔迟尤诺箭捍灌跨炮舆迅真阔第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(二)酶法,胆固醇酯 胆固醇 脂肪酸,胆固醇,O,2,胆烷,-4-,烯,-3,酮,H,2,O,2,H,2,O,2,4AAP,酚 红色亚胺醌,H,2,O,CEH,ChOD,POD,试剂中除上述三种酶外,还有胆酸钠和表面活性剂及稳定剂,胆酸钠用于激活,CEH,,表面活性剂促进胆固醇从脂蛋白中释放。,酶法操作简便,快速,试剂无腐蚀性,适合于自动化分析,但也存在有一些不足,,CEH,对胆固醇水解不完全,表面活性剂影响,CEH,活性,黄疸血清中过高的胆红素可还原,H,2,O,2,使结果偏低。,儿廉泼吻饺恼范炊测酋片暑虐膊庙勇逢官媳刘另钧果吝瀑范缎钮慧绕甲昭第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,【,参考范围,】,3.10,5.70mmol/L,【,临床意义,】,血清,TC,含量受年龄、性别、饮食和运动等因素的影响。,20,岁以上随年龄而,,70,岁以后则有下降趋势。,20,40,岁阶段男性高于女性,但女性绝经后则高于男性。城市人群高于农村人群,与饮食和运动有关。脑力劳动者高于体力劳动者。,病理性高胆固醇血症,原发性高胆固醇血症,糖尿病、胆道阻塞、肾病综合症、甲状腺功能减退。,病理性低胆固醇血症,严重贫血、甲亢、营养不良。,虐酒淄卖横络毋钦团审蛇羔钩集皮球羽困牵衰督痔察恢宝述芝芋粥堕芳椒第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,三、血清甘油三脂测定,TG,是有一分子甘油与三分子脂肪酸组成的化合物,主要存在于,VLDL,和,CM,中,临床化学中往往以测定甘油代表,TG,的含量。,TG,的测定方法很多,如气相色谱法、高效液相色谱法、红外分光光度法。但上述方法需特殊的仪器设备和技术,故一般只用于研究工作中。临床实验室主要用化学法和酶法。,池银谎帚套涂体墒澡迪踞责衷戴姻荫咒客樟貉代改颊抖卞胰娥移省昼坤殃第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(一)化学法,基本步骤可归纳为四步,1.,提取:,甘油三脂的提取 采用合适的溶剂,使脂蛋白变性提取,TG,,同时去除干扰物质,(,磷脂、游离甘油、葡萄糖等,),常用方法有:,(,1,)异丙醇抽提,沸石合剂(沸石、高岭土)吸附。,(,2,)异丙醇抽提,氧化铝吸附磷脂。,(,3,)正壬烷、异丙醇、稀硫酸分溶抽提,免去吸附磷脂的操作,后用价廉的正庚烷代替正壬烷。应用较广。,舔峻景弥泌咳掠钠掘噎彩双妖哮恳肠瓷仕凡郁够照率窄米吭朵坦饭得菊符第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,2.,皂化:,甘油三脂的水解 一般都采用,KOH,乙醇或,KOH,异丙醇溶液,,60,,,5,15min,可使,TG,完全水解。,3.,氧化:,甘油的氧化 最常用的氧化剂是,HIO,4,,甘油在酸性条件下被氧化成甲醛、甲酸。反应受,-,磷酸甘油、葡萄糖、丝氨酸的干扰,故抽提时应尽量除去此类物质的干扰。,目激咬覆坐雨沫善边领对幽糖葫毙泥滁杯掉喝静撇样违孺笺磁旋六教虾段第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,4,.,显色:,显色测定甲醛。常用方法有:,(,1,)甲醛与,变色酸,(,4.5-,二羟,-2.7-,萘二磺酸)在硫酸溶液中加热生成紫红色化合物。(,570nm,),(,2,)甲醛与,乙酰丙酮,在氨的存在下缩合成黄色的,3.5-,二乙酰,-1.4-,二氢,-2.6-,二甲基吡啶。(,420nm,),麓擞逞喊浚聋邹畦实郊讽柒鼎瞬旗泉抱哇沟蜘掳绩逐足恐凶振惠绳茎雪蓉第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定第一部分概述第二部分血脂脂蛋白及载脂蛋白测定,(二)酶法,常用的有,:,1.,磷
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