,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,第七章 细菌感染的检查方法与防治原则,一、细菌感染的诊断,标本的采集和处理原则,细菌的形态学检查,细菌的分离培养和生化鉴定,细菌的非培养检测方法,检测方法,病原菌的检验程序,药物敏感试验,标本,直接涂片检查,分离培养,生化试验,血清学试验,动物试验,初步诊断,分子生物学技术,其他检测技术,明确诊断,1,、标本的采集和处理原则,标本采集的一般原则,标本的处理,When?What?How?,何时取，取什么，怎么取？,如何保持细菌的活性,When?,尽早采集：,在发病的,早期或急性期,采集标本,最好在抗生素使用前（如使用过抗生素应在申请单上注明）。,选择不同采集时机和标本种类：,不同,病程,致病菌在体内分布和排出部位不同。,What?,根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位，尽量采集,病变明显部位标本,。,食物中毒,:,可疑食物,呕吐物,粪便,痢疾：脓血便,败血症,:,血,化脓感染的病灶,How?,无菌采集。,无菌标本：脑脊液、血液、穿刺液等。,有菌标本：,无菌容器,根据目的菌的特性，采用,不同的方法采集,，以保证目的菌的活性。,（需氧菌、厌氧菌、兼性厌氧菌、,L,型细菌）,安全采集,污染：环境，正常菌群,上呼吸道标本采集,标本：鼻拭子、咽拭子,上呼吸道存在正常菌群，在采集标本与结果分析时应予考虑,。,直接涂片检查；分离培养。,标本：痰液、支气管灌洗液等。,采集时间：晨痰，且在取痰前用清水反复漱口。,方法：,（,1,）自然咳痰法：,（,2,）气管镜下采集法；,（,3,）气管穿刺法。,下呼吸道标本采集,直接涂片检查；分离培养。,1.,对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应,保温并立即送检,。,2.,其他所有的标本采集后最好,在,2h,之内送检,。,3.,用于细菌培养的,标本保存时间不应超过,24h,。,4.,若不能及时送检，标本应置于,4,保存。,5.,送检过程中要采取适当的保存方式，注意防护。,标本的处理,时间？保存？,保持细菌的活性,1,早期采集，,不同病程不同标本。,2,无菌采集,3,采集病变明显部位的新鲜标本。,4,根据目的菌的特性用不同的方法采集,5.,采集适量标本。,6.,安全采集。,7.,及时送检，注意保温。,标本采集和处理的一般原则,安全、有效地采集到可能存在的病原菌，并保持其活性。,2,、细菌形态学检查,观察,细菌形态,、,排列、结构,和,染色性,。,有助于对病原菌的,初步识别,，,对临床,早期诊断,和治疗有一定的参考意义。,了解有无细菌及大致的,菌量,。,形态学检查方法,不染色法：悬滴法,压片法,染色法：革兰染色法，,抗酸染色法。,细菌不经染色直接镜检，主要用于检查生活状态下细菌的动力及运动状况。,初步鉴定细菌。,常用的方法：,压滴法和悬滴法。,不染色标本,单染色法：,只能观察微生物的大小、形状和细胞排列状况，但不能鉴别微生物以及其特殊构造等。,复染色法：,用两种或两种以上染色液进行染色，有协助鉴别微生物的作用，故也称鉴别染色法。,常用的有：,革兰氏染色法,、抗酸染色法、荧光染色等。,常用的染色方法,1.,革兰染色,（,gram stain,）,G,+,球菌,G,-,杆菌,丹麦,C.Gram,于,1884,年创建，用于细菌分类学研究,革兰染色的意义,初步识别和鉴定细菌。,为抗菌药物的选择提供参考。,了解病原菌的致病性。,3,、细菌的分离培养和鉴定,培养基的种类和选择,细菌分离及培养的方法,细菌生化反应和鉴定,4,、细菌的非培养检测方法,免疫学检测,分子生物学检测,细菌毒素的检测,动物实验,免疫学检测,基本原理,依据抗原抗体特异性结合的原理，,用已知的抗原,检测未知的抗体,或用已知的抗体，,检测未知的抗原,。,细菌抗原的检测,体内抗体的检测,快速，简单、敏感，特异性强。,二、细菌感染的特异性预防,获得性免疫产生的方式,主动免疫 自然免疫,患病、隐性感染,人工免疫,疫苗、类毒素,被动免疫 自然免疫,胎盘、初乳,人工免疫,抗毒素、丙球,人工免疫,采用人工方法将疫苗、类毒素等或含有某种特异性抗体、细胞免疫制剂等接种于人体，以增强宿主的抗病能力。,生物制品：人工免疫的免疫原、免疫血清、细胞制剂及诊断 制剂的生物性制剂。,将疫苗或类毒素接种于人体，使机体产生获得性免疫力的一种防治微生物感染的措施。,作用,：特异性预防，,人工主动免疫,artificial active immunity,用于人工主动免疫,的生物制品,死疫苗,活疫苗,类毒素,亚单位疫苗,核酸疫苗,区别点,死疫苗,活疫苗,制剂特点,死，强毒株,活减毒株,接种剂量与特点,量较大，,23,次,量较小，,1,次,保存及有效期,易保存，约,1,年,不易保存,免疫效果,较低，,维持数月,2,年,较高，,维持,35,年甚至更长,死疫苗与活疫苗的比较,人工被动免疫,artificial passive immunity,注射含有特异性抗体的免疫血清或纯化免疫球蛋白抗体，或细胞因子等免疫制剂，使机体即刻获得特异性免疫。,作用：,治疗，紧急预防,抗毒素,用于人工被动免疫,的生物制品,丙种球蛋白,(,麻疹、甲肝、脊髓灰质炎）,区别要点,人工主动免疫,人工被动免疫,免疫物质,抗原,抗体或细胞因子等,免疫出现时间,慢，,24,周,快，立即,免疫维持时间,长，数年,数月,短，,23,周,主要用途,预防,治疗或紧急预防,人工主动免疫与人工被动免疫的比较,小 结,细菌的致病机制,细菌的致病的物质基础,宿主的免疫防御机制（详见免疫学）,感染的类型,医院感染,细菌感染的诊断,标本的采集和处理原则,人工免疫的方法和特点,思 考 题,细菌致病的相关因素和物质基础,试比较内毒素与外毒素的区别？,机体抗菌免疫的特点,何谓带菌者,致病菌引起全身感染的类型,标本的采集和处理原则,人工免疫的方法和特点,谢 谢！,谢 谢！,