单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,2010.10,微生物基础知识培训,前 言,什么是微生物,微生物（microorganism,microbe）是一些肉眼看不见的微小生物的总称。包括属于原核类的细菌、放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体和蓝细菌（过去称蓝藻或蓝绿藻），属于真核类的真菌（酵母菌和霉菌）、原生动物和显微藻类，以及属于非细胞类的病毒、类病毒和朊病毒等。,微生物特点,种类多、分布广,微生物在地球上几乎无处不有，无孔不入。哪里尘埃多，哪里的微生物就多。,个体小、面积大 微,生物的个体极其微小，必须借助显微镜放大几倍、几百倍、上千倍，乃至数万倍才能看清。物体的表面积和体积之比称为比表面积。,吸收多、转化快,微生物有惊人的繁殖速度，大多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代，微生物的食谱非常广泛，凡是动植物能利用的营养，微生物都能利用，大量的动植物不能利用的物质，甚至剧毒的物质，微生物照样可以视为美味佳肴。,适应强、易变异,细菌的菌落,单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。这就是我们在做菌落总数检测时的操作计数的原理。,微生物生长的影响因素,营养物：水分、碳、氮、微量元素等；PH值；温度；氧气；渗透压；表面张力,根据微生物生长所需条件，用以控制微生物的生长繁殖，达到灭菌消毒的目的。,消毒与灭菌,消毒与灭菌是微生物实验技术中最基本的操作，从事食品生产和检验的人员都应当了解消毒与灭菌的方法及其意义，严格遵守操作规程，否则会影响产品质量，危害消费者安全。,概念,无菌不存在活的生物,“无菌”从定义上来说是一个绝对的概念，但遗憾的是，在科学和技术高度发展的今天，绝对无菌即做不到，也无法加以证实。,灭菌使达到无菌状态的方法。用物理或化学方法杀灭传播媒介上所有的微生物，使其达到无菌（GB）。通常是指杀灭或除去全部活的微生物（包括繁殖体和芽孢）。,消毒用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使其达到无害化（GB）。通常是指杀死病原微生物的繁殖体，但不能破坏其芽孢。所以消毒是不彻底的，不能代替灭菌。,常用消毒剂,70%75%乙醇水溶液；,0.5%洗必泰溶于70%乙醇，再加入2%甘油，用于皮肤、器具等消毒；,异丙醇 75%水溶液，用于皮肤、器具等消毒；,甲醛 37%40%甲醛液89ml，再加入45g高锰酸钾，每m3熏蒸量，密闭1224h，刺激性强；,戊二醛 2%水溶液，用于空气、器具等消毒。广谱、高效、低毒，可杀芽孢和病毒，毒性较轻,常用消毒剂,新洁尔灭（苯扎溴铵）0.1%水溶液，用于皮肤、粘膜、器具等消毒，有清洁和消毒双重功效，抗菌谱较窄；,杜灭芬（消毒宁）0.05%0.1%水溶液，用于皮肤、器具等消毒；,过氧乙酸 a、0.2%0.5%水溶液；b、新配0.5%水溶液；c、1g/m3；用于器具等消毒，抗菌谱广，可用于皮肤消毒杀灭某些病毒；熏蒸，但性质不稳定。,乳酸 a、0.331mol/L；b、11.5ml/m3熏蒸或与等量苯酚合用熏蒸 喷雾，用于空气消毒，有强杀菌作用；熏蒸，密闭12h以上。,麝香草酚 5%麝香草酚溶于50%乙醇，喷洒墙面、地面，杀霉菌。,干热灭菌,常见的有火焰、烧灼、干烤和红外线灭菌等。,火焰、烧灼：通常用于实验室无菌操作中金属或其它耐火材料制成的器具的灭菌。,干烤和红外线：利用干热空气或热辐射进行灭菌。一般135145需35h，160170需2h以上，170180需1h以上，180200需0.51h。除热原，则需25030min，或20045min，1802h。空气传热慢，穿透力不强，故干热灭菌时间长。干热灭菌时烤箱内装入物品应留有空隙，以利空气流动，否则使箱内温度不均，部分物品灭菌不彻底。,湿热,灭,灭菌,通过,热,热蒸,汽,汽或,沸,沸水,使,使蛋,白,白质,变,变性,而,而杀,灭,灭微,生,生物,的,的方,法,法。,湿,湿热,穿,穿透,力,力强,，,，灭,菌,菌效,果,果较,干,干热,好,好。,煮,沸,沸或,流,流通,蒸,蒸汽,灭,灭菌,：,：常,压,压下,沸,沸水,和,和蒸,汽,汽的,温,温度,是,是100,，,一,一般,处,处理3060min,可,可杀,死,死细,菌,菌繁,殖,殖体,，,，但,不,不能,完,完全,杀,杀灭,芽,芽孢,。,。此,法,法适,用,用于,不,不能,高,高压,蒸,蒸汽,灭,灭菌,的,的物,品,品。,低,温,温间,隙,隙灭,菌,菌（,巴,巴斯,德,德灭,菌,菌法,）,）：,将,将物,品,品先,用,用6080,加,热,热（,或,或煮,沸,沸）1h,，,，然,后,后置2025,保,保存24h（,或,或常,温,温过,夜,夜）,，,，使,其,其中,残,残存,的,的芽,孢,孢萌,发,发成,繁,繁殖,体,体，,再,再用,以,以上,条,条件,灭,灭菌,，,，如,此,此反,复,复三,次,次。,本,本法,适,适用,于,于不,耐,耐高,温,温或,高,高温,下,下易,变,变质,的,的物,品,品，,但,但很,费,费时,。,。,高压蒸,汽,汽灭菌,（,（热压,灭,灭菌）,超过一,个,个大气,压,压时，,水,水的沸,点,点高于100,，反,之,之亦然,。,。高压,蒸,蒸汽灭,菌,菌就是,通,通过加,压,压提高,蒸,蒸汽温,度,度，灭,菌,菌效果,最,最好。,它,它简便,、,、经济,、,、可靠,、,、无毒,，,，是最,可,可靠、,应,应用最,广,广泛的,灭,灭菌法,。,。此法,适,适用于,耐,耐高温,和,和潮湿,的,的物品,。,。,常用条,件,件为：115.5,、,、30min；121.5,、20min；126.5、15min,。,。,注意事,项,项,a.必,须,须完全,排,排出灭,菌,菌器内,的,的空气,。,。否则,会,会影响,灭,灭菌器,内,内温度,达,达到规,定,定的要,求,求。,b.,注,注意被,灭,灭菌物,品,品的温,度,度。灭,菌,菌器内,温,温度与,被,被灭菌,物,物品的,温,温度一,般,般是一,致,致的，,但,但在蒸,汽,汽输入,过,过快时,，,，后者,可,可能低,于,于前者,，,，所以,升,升温时,要,要有一,定,定的预,热,热时间,。,。另外,，,，降温,过,过快易,引,引起玻,璃,璃炸裂,。,。因此,，,，对于,一,一种灭,菌,菌产品,，,，应制,定,定一固,定,定的灭,菌,菌曲线,（,（像冻,干,干曲线,一,一样）,。,。,c.,定,定期检,查,查灭菌,器,器内温,度,度的准,确,确性。,化学灭,菌,菌,利用化,学,学试剂,形,形成的,气,气体来,杀,杀灭微,生,生物的,方,方法。,常,常用的,灭,灭菌剂,为,为环氧,乙,乙烷（,又,又称氧,化,化乙烯,）,）。环,氧,氧乙烷,是,是广谱,杀,杀菌剂,，,，能杀,灭,灭细菌,、,、芽孢,和,和多种,病,病毒，,还,还能杀,死,死昆虫,及,及虫卵,。,。但由,于,于环氧,乙,乙烷易,燃,燃易爆,且,且有毒,（,（有致,变,变异性,）,），用,于,于药品,方,方面极,有,有限，,多,多用于,医,医疗器,械,械、塑,料,料制品,等,等灭菌,。,。（不,能,能用于,橡,橡胶和,乳,乳胶手,套,套，能,将,将其溶,解,解。,）,）,滤,过,过,除,除,菌,菌,利,用,用,细,细,菌,菌,不,不,能,能,通,通,过,过,致,致,密,密,孔,孔,滤,滤,材,材,的,的,原,原,理,理,，,，,除,除,去,去,对,对,热,热,不,不,稳,稳,定,定,的,的,药,药,品,品,溶,溶,液,液,或,或,液,液,体,体,物,物,质,质,中,中,的,的,细,细,菌,菌,的,的,方,方,法,法,。,。,过,过,滤,滤,法,法,一,一,般,般,只,只,能,能,除,除,菌,菌,，,，,不,不,能,能,除,除,去,去,支,支,原,原,体,体,和,和,病,病,毒,毒,。,。,过,过,滤,滤,除,除,菌,菌,的,的,效,效,果,果,与,与,滤,滤,膜,膜,的,的,性,性,能,能,、,、,孔,孔,径,径,的,的,大,大,小,小,、,、,密,密,度,度,、,、,滤,滤,膜,膜,的,的,厚,厚,度,度,等,等,因,因,素,素,有,有,关,关,。,。,滤,滤,过,过,除,除,菌,菌,法,法,要,要,求,求,最,最,终,终,过,过,滤,滤,的,的,滤,滤,膜,膜,孔,孔,径,径,为,为0.22,m,。,。,由,由,于,于,各,各,厂,厂,家,家,生,生,产,产,的,的,相,相,同,同,规,规,格,格,的,的,滤,滤,膜,膜,质,质,量,量,并,并,不,不,一,一,致,致,，,，,为,为,了,了,保,保,证,证,除,除,菌,菌,效,效,果,果,，,，,在,在,使,使,用,用,前,前,后,后,应,应,检,检,查,查,滤,滤,器,器,的,的,完,完,好,好,性,性,（,（,如,如,压,压,力,力,维,维,持,持,试,试,验,验,或,或,起,起,泡,泡,点,点,试,试,验,验,）,）,。,。,一,一,个,个,过,过,滤,滤,器,器,的,的,使,使,用,用,时,时,间,间,应,应,根,根,据,据,品,品,种,种,验,验,证,证,后,后,确,确,定,定,，,，,一,一,般,般,不,不,应,应,超,超,过,过8,小,小,时,时,。,。,辐,射,射,灭,灭,菌,菌,辐,射,射,有,有,两,两,种,种,类,类,型,型,：,：,一,种,种,是,是,电,电,磁,磁,波,波,辐,辐,射,射,，,，,如,如,紫,紫,外,外,线,线,、,、,红,红,外,外,线,线,、,、,微,微,波,波,；,；,一,种,种,是,是,电,电,离,离,辐,辐,射,射,，,，,如,如,可,可,引,引,起,起,被,被,照,照,射,射,物,物,电,电,离,离,的,的X,射,射,线,线,、,、,射,射,线,线,等,等,。,。,菌,落,落,总,总,数,数,菌,落,落,总,总,数,数,通,通,常,常,指,指,的,的,是,是,细,细,菌,菌,总,总,数,数,，,，,细,细,菌,菌,包,包,括,括,球,球,菌,菌,、,、,杆,杆,菌,菌,等,等,。,。,注,意,意,事,事,项,项,：,：,（1,）,）,操,操,作,作,要,要,快,快,而,而,准,准,，,，,包,包,括,括,材,材,料,料,、,、,加,加,样,样,、,、,倒,倒,培,培,养,养,基,基,。,。,（,（2,）,）,吸,吸,液,液,体,体,时,时,液,液,体,体,不,不,能,能,进,进,入,入,吸,吸,头,头,。,。,（,（3,）,）,样,样,品,品,稀,稀,释,释,时,时,一,一,定,定,要,要,混,混,匀,匀,。,。,（,（4,）,）,倒,倒,培,培,养,养,基,基,前,前,，,，,瓶,瓶,口,口,要,要,过,过,火,火,焰,焰,。,。,（,（5,）,）,一,一,定,定,要,要,有,有空白对照。（6）培,养,养基温度,控,控制，培,养,养基薄厚,。,。,菌落总数,快,快速测试,片,片,本品可用,于,于各类食,品,品及饮用,水,水中菌落,总,总数的测,定,定，由细,菌,菌营养培,养,养基、吸,水,水凝胶和,酶,酶显色剂,等,等组成。,与,与传统方,法,法相比，,省,省去了配,制,制培养基,、,、消毒和,培,培养器皿,的,的清洗处,理,理等大量,辅,辅助性工,作,作，随时,可,可以开始,进,进行抽样,检,检测，而,且,且操作简,便,便，通过,酶,酶显色剂,的,的放大作,用,用，使菌,落,落提前清,晰,晰地显现,出,出来，培,养,养十几小,时,时就开始,出,出现红色,菌,菌斑，非,常,常适合于,食,食品卫生,检,检验部门,和,和食品生,产,产企业使,用,用。经试,验,验验证，,本,本产品已,达,达到倒平,板,板法及国,外,外同类产,品,品的效果,，,，具有外,型,型美观，,计,计数方便,，,，灵敏度,高,高，准确,性,性好等特,点,点。,实验结果,图,图例,大肠菌群,：,：,一群在36 条,件,件下培养48h,能,能发酵乳,糖,糖、产酸,产,产气的需,氧,氧和兼