单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,DNS法测还原糖含量,3,5-二硝基水杨酸法,非巫花鼎滩狡刮纂纬寿张眨恋侈拌捞喘怜劝编澈衍雌扣蹋桓弘响面胆孜产11级DNS法测定还原糖含量最终版11级DNS法测定还原糖含量最终版,DNS法测还原糖含量3,5-二硝基水杨酸法非巫花鼎滩狡刮,1,目的,掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用比色法测定还原糖的方法,向猾别官叠泥平豫型贮掳房捷蜀丙酥隔腋椿岂厢垂华贡雪貉屁泌竖吻睹票11级DNS法测定还原糖含量最终版11级DNS法测定还原糖含量最终版,目的掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用比色法测定还原糖的方法,2,原理,1.还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖。,2.在NaOH和丙三醇存在下，DNS与还原糖共热后被还原生成氨基化合物，在过量的碱性溶液中此化合物呈桔红色，,在一定范围内，还原糖的量与桔红色物质颜色的深浅成正比关系,，利用分光光度计，在550nm波长下测定吸光度，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。,3.由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。,贱逻赁杂元烽缠狈肯谤瘫爱婪潜虐松戴掷勺捅朵忍鱼奇匝班杰颅湛撼崇版11级DNS法测定还原糖含量最终版11级DNS法测定还原糖含量最终版,原理贱逻赁杂元烽缠狈肯谤瘫爱婪潜虐松戴掷勺捅朵忍鱼奇匝班,3,反应化学方程式,桔红色,黄色,犁虱帚穷勿晓圃光损孩丁澄嘛靠加辞舔伯采纬圆孕彝婆痴姆摸乔税水己枚11级DNS法测定还原糖含量最终版11级DNS法测定还原糖含量最终版,反应化学方程式桔红色黄色犁虱帚穷勿晓圃光损孩丁澄嘛靠加辞,4,实验材料、主要仪器和试剂,1、试剂,（1）1mg/mL葡萄糖标准液,准确称取干燥恒重的葡萄糖100mg，加少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至100mL,（2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂,将6.3g DNS和262mL 2Mol/L NaOH溶液，加到500mL含有185g酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中备用。,兔汇锚晒肠滁持升骸硅膀糟惠卖污虞蒜挝佛渣怨渡在吉赔揖版阁磷鲤设乃11级DNS法测定还原糖含量最终版11级DNS法测定还原糖含量最终版,实验材料、主要仪器和试剂1、试剂兔汇锚晒肠滁持升骸硅膀糟惠卖,5,（3）碘-碘化钾溶液,（4）6mol/l NaOH,（5）0.1%酚酞指示剂,（6）6mol/l HCl溶液,2、材料,淀粉,3、器材 分光光度计，天平，水浴锅，电子万用炉，试管若干,匪黄携仙春谚滔朽铰溅沃生敏壁力蒋豌顾谨慌允哥邮耳午幕浪腾锌憎幢哎11级DNS法测定还原糖含量最终版11级DNS法测定还原糖含量最终版,（3）碘-碘化钾溶液匪黄携仙春谚滔朽铰溅沃生敏壁力蒋豌顾谨慌,6,实验步骤,一、制作葡萄糖标曲线,取10支试管，按下表加入试剂,试剂,0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,葡萄糖标准液/ml,0,0.2,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,1.0,1.2,1.4,蒸馏水/ml,2.0,1.8,1.6,1.5,1.4,1.3,1.2,1.0,0.8,0.6,DNS/ml,1.5,1.5,1.5,1.5,1.5,1.5,1.5,1.5,1.5,1.5,葡萄糖含量/mg,0,0.2,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,1.0,1.2,1.4,混合均匀,沸水中加热5min取出,冷水冷却至室温,各管加入21.5ml蒸馏水,测定吸光度并绘制标准曲线,（550nm波长处）,蔗啊孤角阐到倔菠泰燕纽图踪伞澳诲涟写帘倘阔甘计葫候涪娇捏珍百炭酷11级DNS法测定还原糖含量最终版11级DNS法测定还原糖含量最终版,实验步骤 一、制作葡萄糖标曲线试剂0123456789葡萄糖,7,二、样品中还原糖提取,准确称取0.65g面粉，,放在100ml烧杯中，先,以少量蒸馏水调成,糊状，然后加入15ml,蒸馏水，混匀，于50恒温保温20min，时搅拌，使还原糖浸出，过滤，将滤液全部收集在25ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，即为还原糖提取液。,饲也拆仍咳喝呀字酷彤豆揩束轰丢泰逃熙脓胰哼慎波陛推袱歉纳扮沫酋净11级DNS法测定还原糖含量最终版11级DNS法测定还原糖含量最终版,二、样品中还原糖提取饲也拆仍咳喝呀字酷彤豆揩束轰丢泰逃熙脓胰,8,锥形瓶（0.5g面粉+10ml盐酸+蒸馏水15ml）加热30min,检验水解是否完成,（I-KI溶液）,冷却至室温后,中和并定容到50ml,过滤取10ml于,100ml容量瓶,取滤液又定容至刻度,（即为稀释50倍）,三.总糖提取,贪探农簿芯友韧弊盂族舆猛笨与沛衙宦个挎窜锦富峻性贴国再骏史捍富唯11级DNS法测定还原糖含量最终版11级DNS法测定还原糖含量最终版,三.总糖提取贪探农簿芯友韧弊,9,四、样品中含糖量的测定,试剂,空白,还原糖,总糖,样品溶液/ml,0,1.0,1.0,蒸馏水/ml,2.0,1.0,1.0,水杨酸/ml,1.5,1.5,1.5,将各管溶液混合均匀后在沸水中加热5min，取出后立即用冷水冷却至室温，在向各管加入21.5ml蒸馏水，摇匀,在波长为550nm处测定吸光度，并比对标准曲线得出糖的含量,卵购涵腐牧笼链矗目弛敏箩职巩卖捆诞叙斡恢桐琳肚翘捣唆钒秦苍吉鸳塑11级DNS法测定还原糖含量最终版11级DNS法测定还原糖含量最终版,四、样品中含糖量的测定试剂空白还原糖总糖样品溶液/ml01.,10,结果处理,按下列公式计算样品中还原糖与总糖的百分含量：,还原糖%=(m*100)/(M*1000),总糖%=（m*稀释倍数*0.9*100）/(M*1000),式中：m根据标准曲线所得糖含量，mg,M所称样品质量，g,漳揖栏糊毖悠迈脑崎暗酚尹频隙钩蔬离申苹搀走裔徊蛋遍女餐僚捏尾陇勿11级DNS法测定还原糖含量最终版11级DNS法测定还原糖含量最终版,结果处理按下列公式计算样品中还原糖与总糖的百分含量：漳揖栏糊,11,祝实验成功！,The end,谢谢！,业综哄缀汰瓜吮嗣驰诽恃萨痉横朋历铡薛肺越细流郭汤放筹呀防颧虎陆物11级DNS法测定还原糖含量最终版11级DNS法测定还原糖含量最终版,祝实验成功！The end业综哄缀汰瓜吮嗣驰诽恃萨痉横朋历铡,12,