单击以编辑母版标题样式,单击以编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2001-02,*,细 菌 学,第二篇,1,细 菌 学第二篇1,第十一章 肠道感染细菌,是一类通过粪,-,口途径传播的细菌，主要包括,肠杆菌科,弧菌属,幽门螺杆菌,弯曲菌属,2,第十一章 肠道感染细菌是一类通过粪-口途径传播的细菌,肠杆菌科概述,一、概念,是一大群寄居于人类和动物肠道中的生物学性状相近的革兰阴性杆菌。其中大部分为正常菌群（,如埃希菌属,）；有些为肠道致病菌（,如志贺菌属、沙门菌属、致病性大肠杆菌等,）。,肠道杆菌种类繁多，分,27,属、,110,个种,3,肠杆菌科概述一、概念3,二、肠道杆菌的共同特征,：,大肠杆菌,1000,大多菌属有菌毛。多数有鞭毛（,志贺菌属除外,）。少数菌属有多糖构成的包膜（,如大肠杆菌、伤寒杆菌,）,1.,形态与结构,均为,G,-,中等大小杆菌。各属细菌在形态、排列上无区别。,4,二、肠道杆菌的共同特征：大肠杆菌1000大多菌属有菌毛。多,2.,培养特性,营养要求不高，普通培养基中均能生长。所有肠道杆菌菌落特点相似，无鉴别意义。,3.,生化反应,生化反应十分活泼，是鉴定肠道菌的重要依据。,5,2.培养特性 3.生化反应 5,鉴定中最重要的生化反应,乳糖发酵试验,肠道非致病菌,（埃希菌属）,发酵乳糖、产酸产气,肠道致病菌,（志贺菌属、,沙门菌属等）,不发酵乳糖,6,鉴定中最重要的生化反应乳糖发酵试验肠道非致病菌（埃希菌属）肠,4.,抗原构造复杂,肠道杆菌抗原构造十分复杂,菌体抗原,“0”,抗原,细菌细胞壁中脂多糖，为群特异性抗原。“,0”,抗原 特异性由脂多糖未端重复结构的多糖残基侧链决定,.,具有“,0”,抗原 细菌菌落呈光滑型,(S);,丢失多糖侧链的细菌菌落呈粗糙型,(R).R,型菌的致病性明显降低,.,7,4.抗原构造复杂7,核心多糖,8,8,鞭毛抗原,“H”,抗原,多数肠道杆菌具有鞭毛,化学本质为蛋白质,.,特异性强,.,包膜抗原,位于,0,抗原 外侧,常可阻遏,0,抗原与相应抗体的结合,.,如大肠杆菌中,K,抗原,伤寒杆菌中的,Vi,抗原。,菌毛抗原,化学成分是菌毛蛋白质，也可干扰,0,凝集，加热后即可破坏。,肠道菌共同抗原,(enterobacteria common antigen,ECA),存在于肠道菌表面，为氨基糖聚合物，所有肠道菌均有,ECA,，,在肠杆菌鉴定中有一定意义,9,鞭毛抗原“H”抗原 多数肠道杆菌具有鞭毛,化学本质为,5.,抵抗力,抵抗力较弱。,6.,变异性,肠道杆菌易发生变异，尤其可经基因转移和重组造成耐药性变异。,10,5.抵抗力 抵抗力较弱。10,第一节 埃希菌,埃希菌属,(Escherichia),包括5个种，众多型别。,其中模式菌种为大肠埃希菌,(E.coli),大肠埃希菌（大肠杆菌）,一般为肠道内正常菌群（非致病性大肠杆菌），少数血清型有致病性（,致病性大肠杆菌,）,11,第一节 埃希菌埃希菌属(Escherichia)包括5,一、生物学性状,形态与染色,大肠埃希菌,1000,革兰阴性,短杆状,不规则排列,12,一、生物学性状形态与染色 大肠埃希菌 1000革兰阴,生化反应,发酵多种糖类，产酸产气,最重要的生化反应：乳糖发酵试验,肠道菌鉴定中常利用乳糖发酵试验作为区别大肠埃希菌与肠道致病菌的主要指标,13,生化反应肠道菌鉴定中常利用乳糖发酵试验作为区别大肠埃希菌与肠,其它生化反应,IMViC,试验（与产气杆菌区别）,IMViC,试验结果,吲哚试验（,I,）,+,大肠杆菌 产气杆菌,甲基红试验（,M,）,+,VP,试验（,Vi,）,+,枸橼酸利用（,C,）,+,IMViC,+,+,14,其它生化反应,抗原性,抗原结构：,O,抗原,170,多种,H,抗原,56,种,K,抗原,100,种,（分,L,、,A,、,B,）三型,鉴定后大肠杆菌血清型命名法：,O,：,K,：,H,如,O157,：,K58,（,B1,）：,H7,15,抗原性15,二、致病性,致病因素,1.,黏附素：特异性高，包括,定植因子抗原,I,、,II,、,III,集聚黏附菌毛,I,、,III,束形成菌毛、,P,菌毛、,Dr,菌毛,侵袭质粒抗原,2.,外毒素：包 括,志贺毒素,I,、,II,耐热肠毒素,a,和,b,不耐热肠毒素,I,、,II,溶血素,A,16,二、致病性致病因素1.黏附素：特异性高，包括定植因子抗,所致疾病,1.,肠道处感染：,败血症,新生儿脑膜炎,泌尿道感染,2.,胃肠炎：,肠产毒性大肠埃希菌,ETEC,肠侵袭性大肠埃希菌,EIEC,肠致病性大肠埃希菌,EPEC,肠出血性大肠埃希菌,EHEC,肠集聚性大肠埃希菌,EAEC,17,所致疾病1.肠道处感染：败血症2.胃肠炎：肠产毒性大肠埃希菌,致病性大肠杆菌的致腹泻机理,肠产毒性大肠埃希菌,enterotoxigenic,E.coli,;ETEC,临床表现,-,旅游者腹泻、婴幼儿腹泻,常见,O,血清型,-,6,8,148,159.,致病机理,-,定居因子、肠毒素,18,致病性大肠杆菌的致腹泻机理 肠产毒性大肠埃希菌18,1,、定居因子（,colonization factor),现认为为菌体表面结构（菌毛）,人类致病性大肠杆菌定居因子分为,CFA,、,CFA,二种。抗原性强，其抗体可阻抑细菌的粘附，因此可作为免疫预防的手段。,2,、肠毒素,二种,不耐热肠毒素,LT,加热,6530,分钟失活,耐热肠毒素,ST,加热,100,分钟不失活,19,1、定居因子（colonization factor)不耐热,LT,化学结构与致病机理,大肠杆菌,LT,与霍乱弧菌肠毒素有,80%,同源性,A1,B,亚单位,A2,受体,GM1,细胞膜,腺苷环化酶,ATP,cAMP,H,2,O CI,-,Na,+,大量分泌,腹泻,腹泻,腹泻,20,LT化学结构与致病机理 A1B亚单位A2受体GM1细胞膜腺,ST,组成及作用机理,ST,与霍乱弧菌肠毒素间无同源性,STa,STb,毒性中心,鸟苷酸环化酶,cGMP,腹泻,腹泻,腹泻,水电解质平衡率乱,21,ST 组成及作用机理STaSTb毒性中心鸟苷酸环化酶cGMP,肠侵袭性大肠埃希菌,enteroinvasive,E.coli,EIEC,临床疾病,-,痢疾样腹泻,主要侵犯较大儿童与成人,脓血便、里急后重,主要致病因素,-,破坏结肠粘膜上皮细胞,侵犯部位,-,结肠,常见,O,血清型,-,28ac,，,152,，,144.,本菌无动力，易与志贺菌混淆，应注意鉴别！,22,肠侵袭性大肠埃希菌本菌无动力，易与志贺菌混淆，应注意鉴,肠致病性大肠埃希菌,enteropathogenic,E.cole,;EPEC,所致疾病,-,婴儿腹泻（严重者可致死）,致病因素,-,菌毛粘附（小肠）,刷状缘破坏、,绒毛萎缩,上皮细胞功能受损,腹泻,常见,O,血清型,-,2,，,55,，,111,，,158.,23,肠致病性大肠埃希菌23,肠出血性大肠埃希菌,enterohemorrhagic,E.coli,;EHEC,主要疾病,-,出血性结肠炎 剧烈腹痛及血便,常可造成流行,致病因子,-,菌毛,志贺样毒素,(shiga-like toxin,SLT),SLT1,又,称,Vero,毒素，是主要致,病因子,主要,O,血清型,-,O157,：,H7,24,肠出血性大肠埃希菌24,肠,集聚型,大肠埃希菌,enteroaggregative,E.coli,;EAEC,主要疾病,-,引起婴儿持续性腹泻,致病因子,-,集聚粘附上皮细胞，阻止液,体吸收,25,肠集聚型大肠埃希菌25,三、微生物学检查,肠道菌分离鉴定步骤,标本,肠道鉴别选择培养基,（,SS,、中国兰）,注,肠道鉴别选择培养基成分,基础培养基,乳糖,+,指示剂,抑制杂菌生长、,有利于肠道致病菌生长的药物,细菌分离,26,三、微生物学检查 肠道菌分离鉴定步骤标本肠道鉴别选择培养基,挑选可疑菌落进行下一步生化反应鉴定,SS,培养基,中国兰培养基,发酵乳糖菌落,大肠杆菌,不发酵乳糖菌落,肠道致病菌,27,挑选可疑菌落进行下一步生化反应鉴定SS培养基中国兰培养基发酵,生化反应,常用培养基,-,双糖铁试管,观察指标：葡萄糖、乳糖发酵、,H,2,S,、动力,上层固体斜面：乳糖,+,指示剂,下层半固体：葡萄糖,+,指示剂,+FeSO,4,28,生化反应常用培养基-双糖铁试管上层固体斜面：乳糖+指,大肠杆菌在双糖铁培养基中表现：,未接种管,大肠杆菌,生长管,记录：,葡萄糖,+,乳糖,+,动力,+,H,2,S ,29,大肠杆菌在双糖铁培养基中表现：未接种管大肠杆菌记录：29,血清学鉴定,如疑为致病性大肠杆菌需作血清学鉴定。,已知分型,Ab,分离菌,直接法玻片凝集试验,+,30,血清学鉴定已知分型Ab分离菌直接法玻片凝集试验+30,水、食品中大肠杆菌检查,卫生学检查：,意义,-,饮用水、饮料、食品中是否有肠道致病菌污染的指标,指标,-,大肠菌群数,饮用水,3,个,/1000ml,瓶装汽水、果汁,5,个,/100ml,31,水、食品中大肠杆菌检查31,第二节 志贺菌属,志贺菌属（,Shigella,),通称痢疾杆菌（,dysentery bacteria),引起疾病 细菌性痢疾,32,第二节 志贺菌属志贺菌属（Shigella)32,一、生物学性状,形态染色,-,同大肠杆菌,无鞭毛,生化反应,-,葡萄糖,+,（产酸不产气）,乳 糖,（宋内氏迟缓发酵）,动力,动力,动力,+,33,一、生物学性状形态染色-同大肠杆菌动力 动力,一、生物学性状,分类,A,群：痢疾志贺菌,B,群：福氏志贺菌,C,群：鲍氏志贺菌,D,群：宋内志贺菌,各类中又分为不同型、亚型,我国以福氏、宋内氏流行多见,34,一、生物学性状分类A群：痢疾志贺菌各类中又分为不同型、亚,二、致病性,致病物质,主要致病物质为,菌毛侵袭力,、,内毒素,，少数菌株产生,外毒素,。,1,、侵袭力,-,菌毛,粘附并穿入回肠未端、,结肠粘膜上皮细胞,粘膜固有层上皮细胞增殖、炎症,菌毛粘附及穿入,是致病的首要,因素！,35,二、致病性致病物质菌毛粘膜固有层上皮细胞增殖、炎症菌毛粘附及,2,、内毒素,志贺菌仅在肠道内增殖，一般不侵入血流,各菌株均可产生强烈内毒素，引起典型痢疾症状,内毒素,肠粘膜通透性 大量内毒素吸收,全身表现：,内毒素血症、,发烧、神志障碍、,严重者中毒性休克,破坏局部粘膜，加重坏死及溃疡形成,刺激肠壁植物神经,-,肠功能紊乱,典型痢疾症状,脓血粘液便、腹痛、,里急后重等,内毒素是志贺菌致病的主要因素,内毒素是志贺菌致病的主要因素,内毒素是志贺菌致病的主要因素,内毒素是志贺菌致病的主要因素！,36,2、内毒素内毒素肠粘膜通透性 大量内毒素吸收全身表现：内毒,3,、外毒素,A,群志贺菌,I,型和,II,型产生，称志贺毒素 机制：,破坏核糖体,阻止蛋白质合成,上皮细胞损伤,少数,溶血性尿毒综合征,37,3、外毒素破坏核糖体阻止蛋白质合成上皮细胞损伤少数溶血性尿毒,所致疾病,细菌性痢疾,-,夏秋季节肠道传染病,传染病流行三环节,传染源,-,病人、带菌者（尤为重要！）,传播途径,-,粪,口途径,易感者,-,人类普遍易感,且敏感性较高，少,量菌体即可致病,潜伏期,1-3,天,38,所致疾病 38,病程表现：,急性菌痢,症状典型，预后较好。,慢性菌痢,治疗不彻底者易转成慢性（病程,2,个月以上），症状不典型，慢性带菌者是重要传染源。,中毒性菌痢,小儿多见，可无消化道症状，表现为中毒性休克，死亡率高。,39,病程表现：39,三、微生物学检查,标本采取注意事项,脓血粘液部分，及时送检,细菌分离培养与鉴定,SS,、中国兰平板（挑取可疑菌落）,快速诊断,-,免疫标记技术,（荧光、协同凝集试验）,双糖铁培养基（初步鉴定）,已知抗血清,+,菌种 直接凝集反应 （最终鉴定）,40,三、微生物学检查标本采取注意事项 细菌分离培养与鉴,挑选可疑菌落进行下一步生化反应鉴定,SS,培养基,中国兰