Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,11/7/2009,#,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,生物制药十五章第一节,第1页，共44页。,生物制药十五章第一节第1页，共44页。,1,生物制品与生物技术药物制造工艺,第一节：概述,第二节：疫苗和菌苗,第三节：主要菌苗和疫苗的制造方法,第四节：重组治疗蛋白类药物,第五节：基因治疗与基因药物,第2页，共44页。,生物制品与生物技术药物制造工艺第一节：概述第2页，共44页。,2,第一节：生物制品概述,1,、概念和发展历史,2,、,分类,3,、,生物制品质量,要求,第3页，共44页。,第一节：生物制品概述1、概念和发展历史第3页，共44页。,3,1,概念和发展历史,Def:,以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为原料，利用,传统技术,或用,现代生物技术,制成，用于人类疾病的预防、治疗和诊断。,包括,:,各种,疫苗、,抗血清,、抗毒素、类毒素、免疫调节剂、诊断试剂,等。,第4页，共44页。,1 概念和发展历史Def:以微生物、细胞、动物或人源组织,4,第5页，共44页。,第5页，共44页。,5,1.2,从疫苗生产看生物制品的发展,第6页，共44页。,1.2 从疫苗生产看生物制品的发展第6页，共44页。,6,12,世纪,，开始使用,人痘接种法,预防天花,。,1796,年，,琴纳,从患牛痘挤奶女工的痘疱中，分离疱浆，接种于,8,岁男孩的手臂上，获得对天花免疫力。,第7页，共44页。,12世纪，开始使用人痘接种法预防天花。1796年，琴纳从患,7,1.2,从疫苗生产看生物制品的发展,1798,年,，医学界正式承认“,接种疫苗,确实是一种行之有效的免疫方法”。,1870,年,，法国科学家,巴斯德,发明了第一个,细菌减毒活疫苗,鸡霍乱疫苗,。巴斯德将此归纳为对,动物接种什么细菌就可以使其不受该病菌感染的,免疫接种原理，从而奠定了疫苗的理论基础。因此人们把巴斯德称为疫苗之父。,1980,年,世界卫生组织宣布全球,消灭了天花,。,第8页，共44页。,1.2 从疫苗生产看生物制品的发展1798年，医学界正式承认,8,问题,1,、生物制品的,种类,有哪些？每一个种类包含哪些生物制品？,2,、生物制品的,质量要求,是什么？,3,、生物制品标准品的要求有哪些？,4,、标准品的,分类,？,第9页，共44页。,问题1、生物制品的种类有哪些？每一个种类包含哪些生物制品？第,9,2,生物制品的分类,1.,预防类,：,细菌类疫苗,(,菌苗）、,病毒类疫苗、,类毒素和联合疫苗。,2.,治疗类,：,抗毒素及免疫血清,细胞因子,重组,DNA,产品,血液制品,：,第10页，共44页。,2 生物制品的分类1.预防类：第10页，共44页。,10,3.,诊断类,：,体外诊断,制品：由特定,抗原,、,抗体或有关生物物质,制成的免疫诊断试剂或试剂盒，用于体外免疫诊断。,体内诊断,制品：由,变态反应原,或,有关抗原,制成的免疫诊断试剂，用于皮内接种，诊断个体对病原的易感性或免疫状态。,4,、其他制品,第11页，共44页。,3.诊断类：第11页，共44页。,11,3,、生物制品质量要求,生物制品检定内容：,安全性：,毒性,试验，,防腐性,试验，,热原质,试验，,安全性,试验；有,关安全性的,特殊试验；,效力：,浓度测定、,活菌率或病毒滴定,测定、,动物保护率,试验、,免疫抗体滴度,测定，,稳定性试验,（,2,）,生物制品的质量控制：,安全性、有效性和可控性（,P469),第12页，共44页。,3、生物制品质量要求 生物制品检定内容：第12页，共44页,12,4,、生物制品的检定标准,(1),生物制品的标准品或参考品,Def:,用于生物制品,效价,、,活性,或,含量测定,的或其,特性鉴别,、,检查,的生物标准品或参考品。有世界卫生组织或国家检定机构批准分发；有世界卫生组织审定分发的，为国际标准；有国家检定机构批准分发的，则称为国家标准。,第13页，共44页。,4、生物制品的检定标准(1)生物制品的标准品或参考品第13页,13,（,2,）生物制品标准品的要求,准确：,单位数,准确,冻干：,效价,稳定,溶封：,瓶签、说明书和实验数据,第14页，共44页。,（2）生物制品标准品的要求准确：单位数准确第14页，共44,14,标准品的分级,国际生物标准：有,世界卫生组织根据国际协作研究的结果标明,其国际单位。用于标定国家的或实验室的标准品或参考制品,国际参考标准,国际生物参考试剂：生物学,诊断试剂,、,生物材料,或用于,鉴定微生物或诊断疾病,的高度特异血清。,（,3,）国际标准的检定程序（,P470,）,第15页，共44页。,标准品的分级国际生物标准：有世界卫生组织根据国际协作研究,15,第二节：疫苗和菌苗,（一）传统疫苗,（二）新一代疫苗,第16页，共44页。,第二节：疫苗和菌苗（一）传统疫苗第16页，共44页。,16,一、疫苗分类,（一）传统病毒疫苗,1,、死疫苗（,dead Vaccine,）,2,、活疫苗（,attenuated vaccine,）,3,、亚单位疫苗（,subunit vaccine,）,第17页，共44页。,一、疫苗分类（一）传统病毒疫苗第17页，共44页。,17,1,、死疫苗（,dead Vaccine,）,利用,物理或化学方法,杀死或灭活培养增殖的标准微生物制成的预防制剂。,2,、,活疫苗（,attenuated vaccine,）,用,人工定向,变异或,从自然界筛选出,毒力高度减弱或基本无毒的微生物制成的预防制剂。,第18页，共44页。,1、死疫苗（dead Vaccine）第18页，共44页。,18,类别,死疫苗,活疫苗,制剂性状,杀死的,病原微生物,弱毒或无毒,的病原微生物,接种量、次数,量,大,、次数多（,2-3,）,量,小,、,1,次,保存、有效期,易保存，较稳定,不易保存，,4,数周,失效,免疫效果,较差、不持久,较好，维持,1-5,年或更长,安全性,会出现发热、全身或局部反应,有时会感染致病,两种类型疫苗特征比较,第19页，共44页。,类别死疫苗活疫苗制剂性状杀死的病原微生物弱毒或无毒的病原微生,19,3,、亚单位疫苗（,subunit vaccine,）,利用病原体中,有效的免疫原成分,制成的疫苗，称为亚单位疫苗,。,第20页，共44页。,3、亚单位疫苗（subunit vaccine）第20页，共,20,（二）新一代疫苗,1,、基因工程疫苗,2,、遗传重组疫苗,3,、合成肽疫苗,4,、独特型抗体疫苗,第21页，共44页。,（二）新一代疫苗第21页，共44页。,21,1、基因工程疫苗（gene engineered vaccine),6、在培养过程中，能产生大量典型毒素（类毒素）,3、病毒性动物组织疫苗制造,能否引起免疫病理作用，如自身抗核酸抗体的产生，免疫耐受等。,灭活菌苗，种类、苗型甚多，但制造的基本程序差别不大。,产品副作用小、安全性好和效力高；,利用微生物做载体，在微生物中表达保护性抗原基因，把微生物制成疫苗。,安全性、有效性和可控性（P469),抗原基因加以改造，使之发生点突变、缺失、甚至进行不同基因或结构域的人工组合，达到增强其免疫原性，去除有害作用或副反应的一类疫苗,灭活菌苗通常根据细菌的特性加入最有效的灭活剂，采取最适当的灭活条件进行。,安全性、有效性和可控性（P469),是否会整合到染色体上引起癌变；,向细胞毒液内按规定加入灭活剂，在一定的温度下作用一定的时间，有的灭活剂还需加入阻断剂中止灭活。,不易保存，4 数周失效,细胞毒液内按比例加入保护剂或稳定剂，充分混合、分装，进行冷冻真空干燥制成冻于疫苗。,巴斯德将此归纳为对动物接种什么细菌就可以使其不受该病菌感染的免疫接种原理，从而奠定了疫苗的理论基础。,问题,1,、基因工程疫苗的种类有哪些？,2,、每一种疫苗优、缺点是什么？,第22页，共44页。,1、基因工程疫苗（gene engineered vacc,22,1,、,基因工程,疫苗（,gene engineered vaccine),利用,DNA,重组技术,克隆并表达保护性抗原基因，用,表达的抗原产物,或,重组体本身,制成的疫苗。,包括,基因工程,亚单位,疫苗,、,基因工程,载体,疫苗、,核酸,疫苗、,基因缺失,活疫苗,蛋白工程,疫苗等。,第23页，共44页。,1、基因工程疫苗（gene engineered vacc,23,Def:,基因工程表达的,蛋白抗原,纯化后制成的疫苗。,优点：,产量,高,、纯度,高,、安全性,高,；,用于,病原体难培养,或有潜在致癌性，或有免疫病理作用的疫苗研究。,缺点：,与传统亚单位疫苗相比，,免疫效果较差,。,增强免疫原性,：筛选完整的颗粒性结构；加入有,免疫佐剂,基因工程,亚单位,疫苗,第24页，共44页。,Def:基因工程表达的蛋白抗原纯化后制成的疫苗。基因工程,24,基因工程载体疫苗,(gene engineering vector vaccine),利用微生物做载体，在,微生物中表达,保护性抗原基因,，把,微生物,制成疫苗。,优点,：,1,、,活疫苗,，抗原,不需纯化,;2,、,不需多次免疫，载体本身可发挥,免疫佐剂,效果。,缺点,：载体为,特定的微生物,载体，曾感染过,腺病毒或者接种卡介苗,的人，对载体微生物已具有免疫力，,再次,接种后,不易繁殖,，会影响,免疫效果,。,第25页，共44页。,基因工程载体疫苗(gene engineering vect,25,核酸疫苗（,nucleic acid vaccine,）,：,或称,基因疫苗,用,能够表达抗原的基因,制成疫苗。,优点,：,易于制备、便于保存、可,多次免疫,并且容易制成多联多价疫苗。,缺点,：,是否会,整合到染色体,上引起癌变；,能否引起免疫病理作用，如自身抗核酸抗体的产生，免疫耐受等。,第26页，共44页。,核酸疫苗（nucleic acid vaccine）：或称基,26,基因缺失活疫苗（,gene deleted live vaccine,）：去除与毒力有关的基因获得的,缺失突变毒株,制成的疫苗。（缺失,毒素,A,单位,的或,其他毒力相关基因,的霍乱活菌苗已上市）,优点：,突变性状明确、稳定；,不易返祖、毒力恢复；,是研究安全有效的,新型疫苗,的重要途径。,第27页，共44页。,基因缺失活疫苗（gene deleted live vacc,27,蛋白工程疫苗（,protein engineering vaccine,）：,抗原基因,加以改造,，使之发生,点突变,、,缺失,、甚至进行,不同基因或结构域,的人工组合，达到增强其,免疫原性,，,去除有害作用或副反应,的一类疫苗,第28页，共44页。,蛋白工程疫苗（protein engineering vac,28,2,、遗传重组疫苗（,genetic recombinant vaccine,）：用,遗传重组方法,获得重组微生物制成的疫苗。,第29页，共44页。,2、遗传重组疫苗（genetic recombinant,29,安全性、有效性和可控性（P469),浓度测定、活菌率或病毒滴定测定、动物保护率试验、免疫抗体滴度测定，稳定性试验,1、基因工程疫苗（gene engineered vaccine),巴斯德将此归纳为对动物接种什么细菌就可以使其不受该病菌感染的免疫接种原理，从而奠定了疫苗的理论基础。,流程图1菌苗制造工艺流程,病毒接种培养有同步与异步。,巴斯德将此归纳为对动物接种什么细菌就可以使其不受该病菌感染的免疫接种原理，从而奠定了疫苗的理论基础。,向细胞毒液内按规定加入灭活剂，在一定的温度下作用一定的时间，有的灭活剂还需加入阻断剂中止灭活。,抗原基因加以改造，使之发生点