单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,版结核白喉杆菌,版结核白喉杆菌,第1页,概述,为细长杆菌，繁殖时有分枝生长趋势。常规,染色困难，但一经着色则有抗酸性。该菌生长慢，营,养要求高，不产毒素，其致病性与菌体成份相关，所,致疾病多为慢性且伴有肉芽肿。,该属菌种类多，,常分为三组：,结核分枝杆菌,（人、,牛型）,，非结核分枝杆菌,(,包含,4,组，鸟,-,胞内,),，麻风,分枝杆菌。,版结核白喉杆菌,第2页,结核,分枝杆菌,生长慢,人型、牛型,非结核,分枝杆菌,I,组,生长慢,堪萨斯,非结核,分枝杆菌,II,组,生长慢，癗疠,非结核,分枝杆菌,III,组,生长慢,鸟胞内分枝杆菌,非结核,分枝杆菌,IV,组,生长快速，龟分枝,麻风,分枝杆菌,不生长,版结核白喉杆菌,第3页,第一节 结核分枝杆菌,（,Mycobacterium tuberculosis,）,版结核白喉杆菌,第4页,结核杆菌和结核病病发展史上几个里程碑,1882,年，德国,Koch,发觉结核杆菌,1890,年，德国,Koch,发觉结核菌素,1921,年，法国,Calmettle,和,Guerin,制成,BCG,1940,年，进入结核病化疗时代,版结核白喉杆菌,第5页,20,世纪,80,年代以来结核病发病率呈显著上升趋势,结核杆菌耐药菌株出现,AIDS,流行,对结核病防治松懈,1993,年,4,月,23,日,WHO,宣告,“,全球结核病紧急状态,”,1995,年宣告每年,3,月,24,日为“世界防治结核病日”,版结核白喉杆菌,第6页,流行病学简况,:,世界：,1/3,人口感染，,70%,在亚洲,结核病人,万，每年新增结核病患者,900,万，,每年死于结核病达,300,万。,中国：,有,5.5,亿人感染，结核病人约,600,万，每年死,于结核病为,25,万。,居法定汇报传染病首位,!,版结核白喉杆菌,第7页,一、生物学性状,1,、形态染色：,细长微弯杆菌，经抗酸染色，菌体,呈红色，其它呈蓝色。血培养中可形成荚膜。,临床标本中常有,L,型变异出现,(Much,、,莫赫颗粒,),。,2,、,培养特征：,专性需氧，营养要求高，最适,pH,值低，,生长迟缓，,2-4w,见菌落。,*,罗氏,(Lowenstein),培养基：,菌落呈乳白或米黄颗,粒状，干燥不透明，久则融合呈菜花状。,*,液体培养基：易形成有皱褶菌膜（,1-2w,）。,版结核白喉杆菌,第8页,结核分枝杆菌,M.tuberculosis,版结核白喉杆菌,第9页,Result of acid-fast staining:red bacilli in blue background,版结核白喉杆菌,第10页,结核杆菌菜花状菌落,版结核白喉杆菌,第11页,分子生物学：,1998,年，英、法、美、丹麦联合破译,其群基因序列，,4411kb,，约,4000,个基因,3,、生化反应：,热触酶试验,有利于区分结核,(-),和非,结核分支杆菌,(+),。,4,、抵抗力：,含大量脂质，抵抗力强，,耐酸碱,;,但对湿热及紫外线敏感。,5,、变异性：,结核杆菌易发生菌落、形态（,L,型）、,毒力（,BCG,）、免疫原性和,耐药性变异,。,版结核白喉杆菌,第12页,二、致病性,（一）致病物质：,结核杆菌致病性与细菌大,量繁殖引发炎症、菌体成份及代谢产物毒,性和机体对细菌免疫损伤相关。,1,、脂质（,lipid,）：,索状因子,(cord factor),：,能破坏线粒体膜，影响细胞呼吸，,抑制白细胞游走，引发慢性肉芽肿；,版结核白喉杆菌,第13页,Cord formation in liquid media,(cord factor),版结核白喉杆菌,第14页,磷脂,(phosphatide),：,能促使单核细胞增生，引,起,结核结节,和 干酪样坏死；,蜡质,D(wax-D),：,能激发机体,IV,型超敏反应；,硫酸脑苷脂,(sulfatide),：,能抑制吞噬体与溶酶体,结合。,2,、蛋白质：,其主要成份结核菌素本身无毒，,但与蜡质,D,结合注入机体能诱发超敏反应，,结核结节形成和抗体。,3,、多糖,(polysaccharide),：,中粒细胞浸润,版结核白喉杆菌,第15页,结核结节,(tubercle),版结核白喉杆菌,第16页,4,、核酸：,rRNA,激活细胞免疫,5,、荚膜：,保护菌体（有利于侵入巨噬细胞、,抵抗有害物质等）,版结核白喉杆菌,第17页,（二）所致疾病：,主要介绍肺部感染,1,、原发感染（,primary infection,）：,首次感染结核杆菌，多见于儿童。,常有肺门淋巴结大、干酪样坏死和结核结节,形成，也可经血抵达多个脏器引发对应结,核病，,90%,原发感染可纤维化或钙化，但,病灶中潜伏菌可成为日后感染源,2,、原发后感染（,secondary infection,）：,多见于成人或较大儿童,版结核白喉杆菌,第18页,原发综合征,原发病灶,淋巴管炎,肺门淋巴结结核,版结核白喉杆菌,第19页,原发综合征,版结核白喉杆菌,第20页,三,、免疫性,1,、,免疫机理：,传染性免疫，以细胞免疫为主。,2,、,免疫与超敏反应：,机体对结核杆菌产生免疫保护时也产生了超敏反应，二者均为,T,细胞介导。,试验依据：,结核菌素蛋白与蜡质,D,同时注入机体，可活化,T,细胞引发超敏反应；,结核杆菌核蛋白体,RNA,注入机体，则取得免疫力。,版结核白喉杆菌,第21页,*,结核菌素试验（,OT,）：,（,1,）,原理：,IV,型超敏反应,（,2,）,方法：,是用,OT(,old tuerculin,),或,PPD(,purified,Protein derivative,),所做皮内试验，,48-72,小,时后观察。,（,3,）,结果：,阳性 红肿硬结直径,5mm,强阳性 红肿硬结直径,15 mm,阴性 红肿硬结直径,5mm,版结核白喉杆菌,第22页,结核菌素试验,PPD,皮下注射,版结核白喉杆菌,第23页,(4),意义：,阳性,表示已感染过结核杆菌，但不一定有结,核病；,强阳性,表示可能有活动性结核病；,阴性,表示未感染过结核杆菌，但应排除感染,早期或免疫力低下。,版结核白喉杆菌,第24页,四、微生物学检验,1,、标本：痰液、尿液、粪便、脑脊液等,2,、直接涂片镜检：,3,、浓缩集菌：,4,、分离培养：,5,、动物试验：,6,、快速诊疗：包含核酸和抗体,版结核白喉杆菌,第25页,五、防治标准,接种,BCG,：新生儿,-7y-12y,治疗：联适用药，分一线和二线药品,版结核白喉杆菌,第26页,棒状杆菌属,Corynebactreium,p.147,该属菌多为条件致病菌，引发人类疾病主要是白喉棒状杆菌，可引发白喉。,版结核白喉杆菌,第27页,白喉棒状杆菌属（,C.diphtheriae,）,一、生物学性状,1,、形态染色：,菌体细长微弯，一端或两端膨大,呈棒状；排列不规则，多呈,X,型、,Y,型或栅栏状；,G,+,，但染色不均匀，用,Albert,法染色后，有,异染,颗粒,出现，含有判别意义；,无荚膜和鞭毛，也不产生芽胞。,版结核白喉杆菌,第28页,Model figure of Albert staining,版结核白喉杆菌,第29页,Result of Albert staining:,body,in blue,metachromatic granules,in black,版结核白喉杆菌,第30页,2,、培养特征：,需氧或兼性厌氧，,（,1,）,吕氏血清培养基,（,Loffler,）,:,形态经典，异染颗粒显著，菌落细小、湿,润、呈灰白色、圆形突起；,（,2,）,亚碲酸钾,(potassium tellurite),培养基：,重型,大 灰色 能分解淀粉 不溶血,中间型,中心黑边缘灰 不分解淀粉 不溶血,轻型,小 黑色 不分解淀粉 能溶血,我国以,轻型,多见,版结核白喉杆菌,第31页,3,、抵抗力：,较弱，对湿热敏感，对干燥、寒 冷、日光,抵抗力较强。,版结核白喉杆菌,第32页,二、致病性,（一）致病物质：,1,、,白喉毒素,(diphtherotoxin,DT),：,只有携带,-,棒状杆菌噬菌体菌株才能产生。,毒素性质与作用机理：,完整毒素分子是酶原，须经胰酶分解为,A,、,B,两个片段后才发挥毒性作用。,A,链：,193aa,，具酶活性，稳定；,B,链：,342aa,，不稳定。含穿膜区（,173aa,）和,受体结合区（,149aa,）。,版结核白喉杆菌,第33页,Structure of Diphtheria toxin,Fragment B:37 kD,binding,Fragment A:21kD,toxicity,版结核白喉杆菌,第34页,作用机制：,白喉毒素经受损粘膜细胞入血或淋巴循,环，吸附于多个脏器组织细胞表面后裂解，,B,片段与细胞膜表面受体结合，,A,片段进入细胞内，使细胞内延伸因子,2,（,elongation factor 2,EF-2,）灭活，影响蛋白质合成。,白喉毒素有剧毒，但人和鼠正常细胞对,该毒素有一定耐受性，而肿瘤细胞则高度敏,感，据此有些人提出,生物导弹,法治疗肿瘤。,版结核白喉杆菌,第35页,2.,索状因子,(cord factor),和,K,抗原等,（二）,所致疾病,病人,健康带菌者 飞沫 侵入易感机体 吸附,恢复期带菌者,鼻咽部粘膜，生长繁殖 产生,侵袭物质,局部 上皮细胞坏死,形成灰白色“假膜”,毒素,全身 心肌炎、肾上腺出血、,外周神经麻痹等,版结核白喉杆菌,第36页,三、免疫性,病后获牢靠免疫，以体液免疫为主。,锡克试验（,Schich test,）,:,原理,:,毒素抗毒素中和反应,(in vivo),四、微生物学检验,直接涂片，分离培养，毒力判定（,Elek,平,板，豚鼠试验）,版结核白喉杆菌,第37页,Results of Schick test,Happened time(day),experiment,control,type,interpretation,_,+,Pseudo,+,mixture,immunity,Hypersen-sitivity,版结核白喉杆菌,第38页,Results of Elek plate,版结核白喉杆菌,第39页,