单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,回顾复习:,(1)酵母菌,酵母菌是单细胞真核生物,酵母菌呼吸方式为兼性厌氧型,酵母菌生殖方式为出芽生殖、孢子生殖,探究培养液中酵母菌数量的动态变化,回顾复习:探究培养液中酵母菌数量的动态变化,(2)种群数量的变化,种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等,“,S,”,型曲线有一个K值,即环境容纳量。,种群数量的增长也受到许多环境因素(如温度、培养液的pH、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等)的影响。,(2)种群数量的变化,探究培养液中酵母菌数量的动态变化,1实验目的:,(1)尝试建构酵母菌种群增长的数学模型。,(2)用数学模型解释种群数量的变化。,(3)学会使用血球计数板进行计数。,2.实验步骤:,1)培养基的配置,2)培养基灭菌,3)接种,4)酵母菌的培养 28,连续培养7天,5)抽样检测计数,6)记录并分析结果,液体培养基,随机取样,多次计数,取平均值,如何计数?,探究培养液中酵母菌数量的动态变化 1实验目的:液体培养基,血球计数板构造:,实物图,正面图,纵切面图,计数室,2个,滴液处,深度,面积,血球计数板构造:实物图正面图纵切面图计数室,2个滴液处深度面,血球计数板,是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。,一个特制的可在显微镜下观察的,玻片,大方,格,中方格,小方格,计数室,平台上有九个,大方格,的方格网,中间大方格为计数室,计数室,放大,血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。,计数室有两种规格:,一是分为16个中方格,,每中方格中有25个小方格;,另一种是分为25个中方格,,每中方格有16个小方格。,两种都共有400个小方格。,计数室,计数时用25中格的计数板,,要按对角线方位,取左上、左下、右上、右下、中央5个中格(即80小格)的酵母菌数。,如果是16中格计数板,则只数四角上的四格酵母菌数(即100小格)。然后求出一个小方格的细胞平均数(N),放大,放大,计数室有两种规格:计数室计数时用25中格的计数板,要按对角线,对于压在小方格界线上的酵母菌应取,相邻两边及顶角,计数。,对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数,c.,从试管中吸出培养液进行计数之前,要将试管轻轻震荡几次,,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴(不宜过多,将计数室充满即可),勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。,5)计数,a,.视待测菌悬液浓度,以每小格的菌数可数为度。,培养后期的样液稀释后再计数,,加无菌水适当稀释,,如菌液不浓,可不必稀释。,b,.取洁净的血球计数板 一块,,在计数区上盖上一块盖玻片。,d.,静置片刻,(待细胞全部沉降到计数室底部),将血球计数板置载物台上夹稳,,先在低,倍镜下找到计数区后,,再转换高,倍镜观察并计数.由于生活细胞的折光率和水的折光率相近,,观察时应减弱光照的强度。,滴液处,c.从试管中吸出培养液进行计数之前,要将试管轻轻震荡几次,用,e,一般选取计数室内四个角及中央五个中方格计数,若细胞位于小方格的线上,应遵循“数上线不数下线,数左线不数右线”的原则,以减少误差。,f,.对于出芽的酵母菌,,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算,。,每个样品计数应重复3次,(每次数值不应相差过大,否则应重新操作),取其平均值,求出每一个小格中细胞平均数(N),按公式计算出每ml菌悬液所含酵母菌细胞数量。,公式附后,g,.测数完毕,取下盖玻片,用水将血球计数板冲洗干净,,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免损坏网格刻度。,洗净后自行晾干或用吹风机吹干,放入盒内保存。,e一般选取计数室内四个角及中央五个中方格计数,6)记录实验结果,每天同一时间,各组取出本组的试管,用血球计数板计数酵母菌个数,并作记录,连续观察7天。,菌数 时间,(天),次数,起始,1,2,3,4,5,6,7,1,2,3,平均,多次测量取平均值。,减少误差,力求准确。,6)记录实验结果菌数 时间起始1234567123,7)分析实验结果,得出结论,a、根据表格平均值作出培养液中酵母菌种群数量7天中的变化曲线。,b、酵母菌种群数量随时间呈_型增长变化。,S,7)分析实验结果,得出结论b、酵母菌种群数量随时间呈_,第,4,天,第,6,天,第,1,天,死亡,第,7,天,此法计得的是活菌体和死菌体的总和,每隔24小时,取样计数。,(注意计数时间每天要固定),第 4 天第 6 天第 1 天死亡第 7 天此法计得的是活菌,1、如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取怎样的措施?,无菌水稀释后,再用血球计数板计数.,1、如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取怎样的措施,2.讨论:血球计数板上的误差应如何减少,力求准确?,多次测量取平均值。一个小组取同样的菌液进行计数,取平均值。,2.讨论:血球计数板上的误差应如何减少,力求准确?多次测量取,计算公式:,A/525B,以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算:假设五个中方格中总菌数为A,菌液,稀释,倍数为B,那么,一个大方格中的总菌数(即0.1mm,3,中的总菌数)为:,提示:1ml1cm,3,=1000mm,3,1ml菌液总的总菌数为:,A/525B101000,50000AB(个),如果计数板大方格中有16个中方格,四个中方格中总菌数为A,稀释倍数为B,那么,又该如何计算呢,计算公式:A/525B以一个大方格有25个中方格的计数板,巩固练习,在计算酵母菌个数的时候经常用到血球计数板,下列说法正确的是(),A.血球计数板只能对活细菌计数,B.血球计数板每个计数室内的容积为1mm,3,C.血球计数板在滴加样品的时候应该先滴加,后盖盖玻片,D.遇酵母出芽,芽体大小达到母细胞的一半时,即作为两个菌体计数,0.1mm,3,?,巩固练习在计算酵母菌个数的时候经常用到血球计数板,下列说法正,在探究酵母菌种群数量变化时,酵母菌计数通常采用显微镜下观察并用血球计数板计数的方法。血球计数板(见右图)有16个中方格,每个中方格有25个小方格,小方格的边长为Xmm,加盖盖玻片后的深度为Ymm。若显微镜下观察一个小方格内的酵母菌数为A,则1mL培养液中酵母菌数为(1mL=1000mm3),A1000A/X,2,Y,B300A,C310,3,A/X,2,Y,DAX,2,Y/1000,在探究酵母菌种群数量变化时,酵母菌计数通常采用显微镜下观,取小量酵母菌液直接放入血球计数板直接计数,测得的数目是A.活细胞数B.死细胞数C.菌落数,D.细胞总数,直接,用,血球计数板,法,无法区分死细胞和活细胞的,计得的是活菌体和死菌体的总和,死亡,取小量酵母菌液直接放入血球计数板直接计数,测得的数目是A.,在“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验中,某同学用显微镜观察计数,统计发现血球计数板的小方格(2 mm2 mm)内酵母菌数量的平均值为13个。假设盖玻片下的培养液厚度为0.1 mm,那么10mL培养液中酵母菌的个数约为,A5.210,4,B3.2510,5,C5.210,3,D.3.2510,4,(1mL=1000mm3),在“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验中,某同学用显微镜,知识回顾,Knowledge Review,祝您成功!,知识回顾Knowledge Review祝您成功!,