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zhn),方式。,密切接触传播:家庭日常生活可造成传播的情况主要有:,HBsAg,阳性人的创伤出血、,月经血、痔疮血污染家庭环境;与,HBsAg,阳性人共用牙刷、口杯、毛巾和剃刀;,HBsAg,阳性人同乳幼儿密切接触,尤其是口喂小儿。,性接触传播:男女性生活可通过精液、阴道分泌液传播乙肝病毒。,第四页,共二十三页。,乙肝五项的概念,(ginin),乙肝五项也称为乙肝两对半,包括,(boku),乙肝表面抗原(用HBSAg表示)、乙肝表面抗体(用抗-HBS表示)、e抗原(用HBeAg表示)、e抗体(用抗-HBe表示)、核心抗体(用抗-HBc表示)。乙肝五项检查,便是抽出患者静脉血,检测血液中乙肝病毒的血清学标志。,第五页,共二十三页。,金标法,金,标法乙肝两对半快速检测板是采用,(ciyng),层析法检测乙肝病毒五项血清学标志,HBsAg,、,HBsAb,、,HBeAg,、,HBeAb,、,HBcAb,。,酶免法(,ELISA,法),ELISA,可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有,3,种必要的试剂:固相的抗原或抗体,酶标记的抗原或抗体,酶作用的底物。,HBsAg,、,HBeAg,检测试纸条采用双抗体夹心法测抗原,;,HBsAb,检测试纸条采用双抗原夹心法;,HBeAb,、,HBcAb,此两项在检测试纸条上采用了竞争抑制法。由于,e,抗原较核心抗原仅多,29,个氨基酸,,e,抗原很容易转变成核心抗原,因此,HBcAb,和,HBeAb,的测定均采用竞争法,乙肝五项的检测方法,(fngf),及原理,第六页,共二十三页。,ELISA,法在临床实验室已得到普遍应用,特别是用于各种肝炎,标志物的检测,但,ELISA,法需时较长,其主要原因是由于液相中的抗原(抗,体)需经扩散才能与固相上的抗原或抗体反应。但作为基层医疗单位、急,诊病人和手术前的应急的单个标本检测,包括现在的血站的流动采血点献,血员的快速筛检是根本无法用,ELISA,法来实现的。,20,世纪,70,年代初,,FANKL,等建立了免疫胶体金技术,开始作为一种免疫标记技术而被使用,随后逐,渐广泛应用于免疫检测技术。各种金标检测条,检测卡已被广泛使用。相,对而言,,ELISA,法检测准确性要高于金标法,金标法检测限为,1ng/ml,ELISA,法灵敏度为,0.5ng/ml,,国产,ELISA,法试剂最高灵敏度可达,0.1ng/ml,。故在,实际应用中,根据实际情况两种方法联合起来,特别是 在大批量检测时可,用金标法作为初筛,这样可大量节约时间,更快速、准确为病人(bngrn)服务。,第七页,共二十三页。,(,1,)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。,(,2,)加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他,(qt),未结合的物质。,(,3,)加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。,(,4,)加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。,根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物,即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。,第八页,共二十三页。,双位点一步法即在双抗体夹心法基础上使用针对抗原分子上两个不同表位的单克隆抗体,分别作为固相抗体和酶标抗体。测定时将待检标本和酶标抗体同时加入进行反应,两种抗体互不干扰,经一次温育和洗涤后,即可加入底物进行显色测定。,钩状效应:双位点一步法中,如果待检测标本中抗原浓度过高,过量抗原则会分别与固相抗体和酶标抗体结合,而不再,(b zi),形成夹心复合物,类似于沉淀反应中抗原过剩的后带现象,所得结果将低于实际的含量,这种现象称之为钩状效应。,第九页,共二十三页。,固相抗体,(kngt),底物,(d w),竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,酶标抗原和待测抗原对固相特异性抗体具有相同的结合力,因此(ync)两者竞争结合固相特异性抗体。反应体系中,固相抗体和酶标抗原是固定限量,且前者的结合位点少于酶标和非酶标抗原的分子数量和。免疫反应后,结合于固相的酶标抗原量与标本中待检抗原含量成反比。待检抗原量越多,相应的结合特异性抗体越多,而酶标抗原和固相抗体结合越少,底物显色反应浅;反之则显色越深,即底物显色与待检标本中抗原含量成反比。,第十页,共二十三页。,间接法检测,抗,抗体最常用,的,的方法,其,原,原理为利用,酶,酶标记的抗,抗,抗体以检测,已,已与固相结,合,合的受检抗,体,体,故称为,间,间接法。即,将,将已知抗原,吸,吸附于固相,载,载体上。待,检,检标本中相,应,应抗体与之,结,结合,形成,(xngchng),固相抗原,-,抗体复合物,,,,再用酶标,二,二抗与固相,免,免疫复合物,中,中的抗体结,合,合,形成固,相,相抗原,-,抗体,-,酶标二抗复,合,合物,根据,加,加底物后的,显,显色程度确,定,定待检抗体,含,含量。,第十一页,,共,共二十三页,。,。,捕获法的原,理,理是将抗人IgM,抗体,(kngt),(抗人,IgM,链抗体)吸,附,附于固相载,体,体上,待检,标,标本中的,IgM,类抗体多被,固,固相抗体捕,获,获。加入特,异,异抗原与固,相,相抗体捕获,的,的,IgM,抗体结合,,再,再加入抗原,特,特异的酶标,抗,抗体,形成,固,固相抗人,IgM-IgM-,抗原,-,酶标抗体复,合,合物。最后,根,根据加底物,后,后的显色程,度,度确定待检,IgM,抗体,的,的含,量,量。,固,固相,捕,捕获,法,法主,要,要用,于,于血,清,清中,IgM,类抗,体,体的,测,测定,。,。,第十,二,二页,,,,共,二,二十,三,三页,。,。,1、HBsAg(,乙,乙肝,表,表面,抗,抗原),它,它是,乙,乙肝,病,病毒,的,的外,壳,壳物,质,质,,本,本身,没,没有,传,传染,性,性。,它,它的,阳,阳性,往,往往,(w,ngw,ng),提示,有,有完,整,整的,病,病毒,颗,颗粒,存,存在,。,。,2、,抗,抗一HBs(,乙,乙肝,表,表面,抗,抗体,,,,HbsAb),它,它是HBV自,然,然感,染,染人,恢,恢复,期,期出,现,现的,抗,抗体,,,,此,时,时HBsAg,自,自然,消,消失,了,了。,它,它的,存,存在,提,提示,人,人对,乙,乙肝,有,有了,抵,抵抗,力,力,,不,不会,再,再得,乙,乙型,肝,肝炎,了,了。,我,我国,有,有27.42%的,人,人口,有,有此,抗,抗体,。,。,3,、,、HBeAg(乙,型,型肝,炎,炎e,抗,抗原),它,它产,生,生于,病,病毒,内,内部,,,,可,分,分泌,血,血液,中,中,e抗,原,原阳,性,性提,示,示病,毒,毒有,活,活动,,,,乙,肝,肝病,毒,毒复,制,制速,度,度很,快,快,,而,而且,是,是具,有,有传,染,染性,的,的指,标,标。,4,、,、抗,HBe(乙,肝,肝e,抗,抗体,,,,HBeAb),是,是人,体,体针,对,对e,抗,抗原,产,产生,的,的一,种,种蛋,白,白物,质,质,,阳,阳性,结,结果,提,提示,病,病毒,的,的传,染,染性,变,变弱,,,,病,情,情已,处,处于,恢,恢复,阶,阶段,。,。但,另,另一,种,种情,况,况可,能,能是,乙,乙肝,病,病毒,发,发生,了,了变,异,异,,此,此时,血,血清,中,中无HBeAg,,但,但可,产,产生,抗,抗一HBe,,出,出现,这,这种,情,情况,就,就需,要,要查HBVDNA来,判,判定,是,是否,还,还有,病,病毒,存,存在,。,。,5,、,、抗,一,一HBc(乙,肝,肝核,心,心抗,体,体,HbcAb),这,这,种,种抗,体,体分IgM和lgG两,种,种:,抗,抗HBc,IgM,阳,阳性,提,提示,病,病毒,活,活动,,,,有,传,传染,性,性;,抗,抗HBc,IgG,阳,阳性,提,提示,为,为以,往,往感,染,染,,无,无传,染,染性,,,,不,需,需抗,病,病毒,治,治疗,。,。,6.,乙肝,前,前,S1,抗原,是,是病,毒,毒复,制,制的,另,另一,个,个指,标,标,,人,人体,感,感染,乙,乙型,肝,肝炎,病,病毒,后,后,,最,最早,的,的免,疫,疫应,答,答就,是,是针,对,对前,S1,抗,原,原,的,的,。,。,由,由,于,于,前,前,S1,抗,原,原,的,的,出,出,现,现,在,在,HBV,感,染,染,的,的,最,最,早,早,期,期,,,,,因,因,而,而,可,可,以,以,起,起,到,到,早,早,期,期,诊,诊,断,断,的,的,作,作,用,用,其,他,他,,,,HBV,DNA,是,是,病,病,毒,毒,的,的,遗,遗,传,传,基,基,因,因,,,,,存,存,在,在,于,于,病,病,毒,毒,的,的,核,核,心,心,部,部,位,位,,,,,它,它,的,的,阳,阳,性,性,和,和HBeAg,阳,阳,性,性,意,意,义,义,基,基,本,本,是,是,一,一,致,致,的,的,。,。,因,因,此,此,,,,,公,公,认,认,的,的,抗,抗,病,病,毒,毒,治,治,疗,疗,是,是,否,否,有,有,效,效,,,,,主,主,要,要,是,是,以,以HBeAg,和,和HBV,DNA,的,的,阴,阴,转,转,或,或,定,定,量,量,的,的,明,明,显,显,减,减,少,少,为,为,指,指,标,标,。,。,乙肝五,项,项指标,(zh,bi,o),详解,第十三,页,页,共,二,二十三,页,页。,乙肝五,项,项单项,指,指标,(zh,bi,o),阳性意,义,义,第十四,页,页,共,二,二十三,页,页。,模式,HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb,出现率,临床意义,1,+,-,+,-,+,30,40%,急性乙肝 慢性乙肝 病毒复制活跃,传染性强,2,+,-,-,-,+,10,15%,急性乙肝慢性乙肝 传染性弱,3,+,-,-,+,+,5,10%,急性乙肝,病毒复制,活跃,慢性乙肝 传染性弱,4,-,+,-,-,+,5,15%,乙肝恢复期,已有免疫力,5,-,-,-,+,+,2,10%,近期既往感染 急性,HBV,感染恢复期,6,-,-,-,-,+,
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