Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second Level,Third Level,Fourth Level,Fifth Level,Automated Method,*,自动化方法验证,2004,年,7,月,林振贤博士,Ph.D.,加拿大,CVG,协会,百万个机会,数据自动化,LIMS,数据备份,/,存档,数据采掘,物理自动化,样品制备,/,分析,筛选,合成,实验室自动化总况,实验室自动化的益处,增加产出,改进员工和仪器的使用情况,更少制备工作,更多灵活机动,每时每刻都可以运转,改进结果质量,更好的精度和准确度,降低误差,方法转换容易,安全性,减少在有毒环境的中的暴露,降低所有溶剂的数量,自动化系统,含量测定,片剂处理工作站,-Caliper,前置工作站,-Caliper,溶出,AT70,溶出系统,-Sotax,多剂量工作站,-Caliper,自动化工作站,片剂处理工作站图示,自动化工作站,溶出工作站图示,系统性能是自动化分析成功的关键,从分析员到工作站,建立该系统的可靠性和功效,提供该系统可以准确地、精确地和可靠地执行任务的书面说明,系统合格化,状况,2,个可能的状况：,1.,有手动方法且已经过验证,2.,没有手动方法,典型的分析程序包括,:,样品制备,测量,数据处理,把手动制备步骤转化成自动步骤,保持相同的浓度,(,相同的,LC,浓度,),单个自动步骤代替多重稀释步骤,顺序处理代替批量处理,恒器或者超声处理代替晃动,自动化方法建立,自动化方法建立,方法建立包括：,密度确定,体积转移,系统兼容性,过滤研究,温度研究,残存度研究,溶液稳定性,萃取研究,溶液密度,重量法溶剂配分或稀释,如果要求二次稀释，准备好稀释液和过滤液,体积转移,剂型占有体积,如果转移的体积很大，手动和自动的结果将会不一样,自动化方法建立,使系统单元的影响最小化,可以从系统单元和过滤器中萃取的,把溶剂通过过滤器或液体通道,与没有经过过滤的溶剂比较,系统单元和过滤器活性保留,把被分析物或样品通过过滤器或液体通道,没有经过过滤的样品比较,处理过的没有经过过滤的样品之间的差别不应该超出公称浓度的,1%,。,自动化方法建立,过滤研究,过滤预湿体积,分析与过滤之间的平衡,最佳流速,高流速会造成过滤器堵塞（回流压力）,低流速会造成精细颗粒穿过,过滤器的容积,可以有效过滤的溶液体积,自动化方法建立,温度研究,萃取过程会造成萃取溶剂温度的显著上升,温度上升会造成因溶剂密度的改变导致稀释误差,要妥善选择溶剂和过程以使溶剂热效应最小,能够在计算中纠正上述问题，或需要在方法中附加浸泡,/,澄清时间来允许溶液降温到室温,自动方法建立,转接,同样的液体通道每次都要使用,每分析一个样品后,(,最浓的,),就分析一个空白样品,标准稳定性,蒸发和降解,样品稳定性通常不是一个问题,在重新测试稳定性前，在典型的环境条件下，存放这些溶液一段可以达到希望的稳定性的时间。,自动化方法建立,优化从基质中回收药物,崩解单元 的速度,萃取步骤时段,萃取步骤数目,浸泡时间和澄清时间,自动化方法建立,验证的目标和范围,自动系统描述,验证参数,实验程序,接受标准,论证极限,偏差与修正,验证方案,基本假设,通过,IQ,、,OQ,、,PQ,和规范的性能核实建立起来的系统基本效能,验证参数,等价性,(,如果存在有验证过的手动方法）,回收率,(,选项，如果存在有验证过的手动方法）,残存度,(,积累性残存度,),重复性,程式化,自动化放方法建立,等价性,与验证过的手动方法一致,比较手动与自动结果,分析上还是统计上的差别,?,设置合理的判据,等价性,含量均匀性,/,多重剂型,含量均匀性：在全浓度（,100%,公称浓度）范围内,10,个确测点（理想情况测,3,批总共,30,个样品）,批量含量：在全浓度（,100%,公称浓度）范围内,6,个确测点（理想情况测,3,批总共,18,个样品）,通过手动方法获得相同批号样品的数据,手动和自动方法平均差要满足,3%,等价性,降解与杂质,比较数据；大致情况应该类似,;,所有超出定量极限的杂质或降解产物应该存在，并且满足以下限度：,1.0%,+,0.3%,确定一个具有代表性的剂型，理想情况需要两批不同样品，还要与手动方法对这相同两批样品进行比较,等价性,溶出,每一个溶出需要,6,个全浓度范围的确测量来确定,(,理想情况测,3,批总共,18,个样品,),通过手动方法获得相同批号样品的数据,在样品从同一次实验中获得的情况下,手动方法和自动方法之间的平均差异在,Q,时间点要求,3%,否则,if,则要求满足,5%,等价性,溶出情况比较,回收率,(,准确率,),含量,基质的活性成分回收率,等价实验显示回收率接近公称浓度的,100%,在公称浓度,80%-120%,之间优化操作显示较好回收率,每个水平,+2%,溶出,在公称浓度,0%-120%,之间优化操作显示较好回收率,每个水平,+3%,含量均匀性,样品基质的活性成分回收率是公称浓度的,70 130%,中的最小范围,(3,个浓度,/3,次复测,=9,个样品,),所有回收率应该是目标浓度的,2%,批量测试,样品基质的活性成分回收率是公称浓度的,80 120%,中的最小范围,(3,个浓度,/3,次复测,=9,个样品,),所有回收率应该是目标浓度的,2%,回收率,(,准确率,),降解与杂质,比较数据；大致情况应该类似,;,所有超出定量极限的杂质或降解产物应该存在，并且满足在前面列出的限度,.,在安慰剂中掺入可以得到的杂质,/,降解产物，涵盖公称浓度的定量极限至,130%(3,个浓度,/3,次复测,=9,个样品,),所有回收率应该是目标浓度的,10%,回收率,(,准确率,),溶出,样品基质的活性成分回收率是在,Q,时间点属性的,20%,中的最小范围,(3,个浓度,/3,次复测,=9,个样品,),所有回收率应该是目标浓度的,3%,准确率可以通过满意的专属性、线性和精度来保证,回收率,(,准确率,),残存度,所有样品使用相同的液体通道,显示系统有效的清洗和最小的交叉污染,程序,操作典型的样品，接着做空白样品,分析在空白中残留的活性成分,在空白中活性成分的浓度小于前面分析样品的,1%,或小于公称浓度的,1%,残存度,片剂含量,分析三个典型样品，每一个样品后分析一个空白,计算观察到的残存度水平,残存度,溶出,分离每个容器的取样线,一般来说，一次活性测试紧跟一次空白测试,所以容器都具有共同的取样线,在三个溶出容器中每一个都放入一片药片,进行溶出操作,接着进行一次容器中没有药片的操作,对其它两个容器重复上面的步骤,计算观察到的残存度水平,精度,精度,精度说明产生一致性数据的能力,可以比较两个独立操作的相对标准偏差百分比和平均值,典型的接受标准,含量测试,:,+,2%,（平均值）,+,2%,（相对标准偏差百分比的差值）,溶出操作,:,+,3%fo,（平均值）,+,3%,（相对标准偏差百分比的差值）,含量均匀性,100%,公称浓度范围需要,10,个确测点,自动方法相对标准偏差（,RSD,）在手动方法,RSD,2%,范围，且不得超过,6%,没有手动方法存在，自动方法的,RSD,要满足,6%,批量测试,100%,公称浓度范围需要,6,个确测点,自动方法的,RSD,在手动方法,RSD,的,2%,范围,没有手动方法存在，自动方法的,RSD,要满足,3%,精度,降解物和杂质,对于已知杂质数量的单批样品或掺杂样品的制剂需要,6,个确测点,对于单个杂质：,RSD 15%,对于杂质总量：,RSD 10%,精度,溶出,100%,公称浓度范围需要,6,个确测点,自动方法的,RSD,不超过手动方法,RSD,的,2%,没有手动方法存在，自动方法的,RSD,要满足,3%,精度,重现性,实验室之内：如果有一个以上系统,实验室之间：一般作为方法转让进行,稳定性,:,样品制备步骤的程式化在大量的方法建立中都有描述,分析测量的程式化将类似于一般的程式化评价,重现性和程式化,参考文献,Chapter 5:Development and Validation of Automated Methods,Chantal Incledon and Herman Lam;Analytcial Method Validation and Instrument Performance verification,Chung Chow Chan,Y.C.Lee,Herman Lam and Xue Ming Zhang,Wiley InterScience,2004.,Development and Validation of Automated Methods for Finished Product Testing,A Walsh et al,Pharmaceutical Technology Europe,p44 May,2000.,Development and Validation of Analytical Methods,Christopher Riley and Thomas Rosanke,Pergamon,1996.,Chapter 8.Robotics and Automated Workstations,J.J Tomlinson,The Automation Challenge Using a Tablet Processing Workstation,S.Smith,Pharmaceutical Technology Europe,50,Sept,1996.,