,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单基因性继发性高血压,的,基因诊断,瑞金医院高血压科,上海市高血压研究所,朱鼎良,单基因性继发性高血压,1,单基因性继发性高血压,糖皮质激素抑制性醛固酮增多症（,GRH）,表征性盐皮质激素增多症（,AME）,11,羟化酶缺乏症,17,羟化酶缺乏综合征,Liddle,综合征,Gordon,综合征,孤立型嗜铬细胞瘤,II A,型多发性内分泌瘤,II B,型多发性内分泌瘤,Von Hippel-Lindau,综合征,I,型神经纤维瘤,高血压伴短指畸形,单基因性继发性高血压糖皮质激素抑制性醛固酮增多症（GRH）,2,糖皮质激素抑制性醛固酮增多症,表征性盐皮质激素增多症,17,羟化酶缺乏综合征,11,羟化酶缺乏症,Liddle,综合征,II A,型多发性内分泌瘤,II B,型多发性内分泌瘤,I,型神经纤维瘤,Von Hippel-Lindau,综合征,Gordon,综合征,CYP11B1/CYP11B2,HSD11B2,CYP17,CYP11B1,SCNN1B,SCNN1G,RET proto-oncogene,RET proto-oncogene,NF1gene,VHL tumour suppressor gene,WNK1、WNK4,致病基因,（单基因性继发性高血压）,糖皮质激素抑制性醛固酮增多症CYP11B1/CYP11B,3,单基因性继发性高血压基因诊断（国内）,病名,Liddle,综合征,IIa,型多发性内分泌瘤,糖皮质激素抑制性醛固酮增多症,*,Gordon,综合征,单位,高研所、北医,高研所,内研所,高研所,单基因性继发性高血压基因诊断（国内）,4,历史,(,Liddle,综合征),1963 Liddle,首例报道,1994 Shimkets,肾上皮钠通道,亚单位,基因突变,1995 Hansson,肾上皮钠通道,亚单位,基因突变,历史(Liddle 综合征)1963 Lid,5,特征,(,Liddle,综合征,),遗传,临床表现,常染色体显性遗传病（16p),肾上皮钠通道（ENaC)基因突变,高血压,低醛固酮,低血钾,低血浆肾素活性（,PRA）,特征(Liddle综合征),6,Liddle,综合征家系-1,Liddle 综合征家系-1,7,Liddle,综合征家系先证者的临床特征,男,25 岁,18 岁发生高血压,血压：230/140,mmHg,血钾:2.7,mmol/L,高血压家族史:母、兄弟、侄女,Liddle综合征家系先证者的临床特征 男,25 岁,8,Liddle,综合征家系先证者的临床特征,低,PRA:0 ng/ml/h(0.1-5.5),低尿醛固酮,：0.7 ug/24h(3.4-12.7),联合用降压药无效,安替舒通治疗无效,氨苯喋啶,（triamterene）,治疗和低钠饮食后高血压和低血钾明显改善,1985年住院资料,Liddle综合征家系先证者的临床特征低PRA:0 ng,9,氨苯喋啶和低钠治疗前后血压和生化指标改变,血压 血钾,尿,ald,(mmHg)(mmol/L)(ug/24h),治疗前,230/140 2.7 0.7,治疗后,110/84 4.2 6.4,氨苯喋啶和低钠治疗前后血压和生化指标改变,10,Liddle,家系一级亲属的临床及生化检查,病人 血压 年龄 发病年龄(岁),(mmHg),(岁)高血压 卒中,-1 130/8076,-1*120/80 46 33 43,-3*126/9241 18 32,-5*138/106 37 18,-7*144/108 31 14 23,-2*160/120 24 15,-3 105/7521,-4 110/8015,-5 98/78 9,Liddle家系一级亲属的临床及生化检查,11,病人,PRA,血浆,alt.,尿,ald,血钾,尿钾,(ng/ml/h)(ng/ml/h)(ng/dl)(mmol/l)(mmol/l),-1 4.03,-1*1.02 7.4 3.5 3.52 46.6,-3*1.24 10.1 1.3 3.54 40.4,-5*1.08 9.6 0.4 4.07 22.1,-7*0.77 7.7 2.7,3.37,42.0,-2*,0,2.1 0.4 3.64 55.7,-3 3.80,-4 4.25,-5 4.06,Liddle,家系一级亲属的临床及生化检查,病人 PRA,12,基因诊断方法,(,Liddle,综合征,),制备基因组,DNA,从外周血,（5-10ml）,白细胞中抽提,DNA,DNA,直接测序,PCR,扩增,ENaC 513-638,密码子 和,ENaC 524-631,密码子,PCR,纯化产物用,ABI 377,测序仪进行序列分析,基因诊断方法(Liddle综合征)制备基因组DNA,13,基因诊断结果,(,Liddle,综合征家系-1,),5名家系成员(II-1,3,5,7,III-2)，,ENaC,基因616密码子存在,C,C,C-C,T,C(pro-Leu),的错义突变,先证者父亲,(I-1),和其他年青子女,(III-3,4,5),未检出这一突变,基因诊断结果(Liddle综合征家系-1)5名家系,14,Liddle,家系成员,ENaC,基因序列分析,II-1 II-3 II-5 II-7,CCC-CTC,P616L,Liddle家系成员 ENaC基因序列分析 II-1,15,已报道的Liddle综合征,ENaC基因的致病,突变,亚单位 密码子 碱基改变,蛋白改变,564 CGA-TGA Arg-stop codon,582,deletion stop codon,589 CAG-TGA Gln-stop codon,592 ACG-ACCG Thr-frame shift,594 CCC-CCCC Pro-frame shift,615 CCC-TCC Pro-Ser,616 CCC-CTC Pro-Leu,616 CCC-TCC Pro-Ser,618 CTA-TTA Tyr-His,574 TGG-TGA Trp-stop codon,已报道的Liddle综合征ENaC基因的致病突变 亚单,16,Liddle,综合征家系-2,Liddle 综合征家系-2,17,基因诊断结果,(,Liddle,综合征家系-2,),3名家系成员(II-5,III-1,4)，,ENaC,基因616密码子存在,C,CC-,T,CC（pro-Ser),的错义突变,其他家系成员,(II-2,3,4,6,7,8,III-2,3),未检出这一突变,基因诊断结果(Liddle综合征家系-2)3名家系,18,基因诊断结果,(,Liddle,综合征家系-2,),3名CCC-TCC,突变者同时存在632密码子的,G,AC-,C,AC（Asp-His),变异,150名无关个体测序未发GAC-CAC,变,异，证明这是一种突变。该突变与,Liddle,综合征发病间关系有待研究,基因诊断结果(Liddle综合征家系-2)3名CC,19,Liddle,家系-2的,P616S,突变,(CCC-TCC,Pro-Ser),Liddle 家系-2的 P616S突变,20,Liddle,家系-2,D632H,突变,(GAC-CAC,Asp-His),Liddle 家系-2 D632H 突变,21,ENaC,亚单位,ENaC,NH2,COOH,subunit,突变位点,Nedd 4,结合部位,ENaC 亚单位 ENaCNH2COOH sub,22,II,型多内分泌腺瘤（MEN-II),MEN-,IIa,型：,甲状腺髓样癌（,MTC）、,甲状旁腺腺瘤或增生、嗜铬细胞瘤,MEN-,IIb,型：,MTC、,嗜铬细胞瘤、粘膜神经节瘤、马凡氏体型,II型多内分泌腺瘤（MEN-II)MEN-IIa型：,23,II,型多内分泌腺瘤（MEN-II),Sipple 1961年报道第一例,MEN-II a,型（瑞金1998，2002）,MEN-II b,型（瑞金2002）,II型多内分泌腺瘤（MEN-II)Sipple 1961年,24,多内分泌腺瘤病,IIa,型家系图,多内分泌腺瘤病IIa型家系图,25,MEN-II a,家系先证者（,III-2）,女、51岁、“血压升高7年、阵发性心悸、多汗2年”、,97年入院、160/100,mm Hg,B,超：双側,甲状腺实质性肿块、,双側肾上腺多发性占位,性病变,CT,：,双側,甲状腺,占位性病变、双側肾上腺占位性病变,甲状腺及颈前淋巴结穿刺：甲状腺髓样癌、颈前淋巴转移,手术病理诊断：右侧甲状腺髓样癌、左侧混合性髓样-滤,泡型癌、左颈前淋巴结转移、,双側多发性,嗜铬细胞瘤,MEN-II a 家系先证者（III-2）女、51岁、“血,26,MEN-II a,家系成员（,IV-3）,女、51岁、40岁发现有高血压,左侧甲状腺全切术、,病理诊断：左侧甲状腺髓样癌,MEN-II a 家系成员（IV-3）女、51岁、40岁发,27,单基因遗传病基因诊断的优点,可靠、准确,方便,临床前诊断,单基因遗传病基因诊断的优点 可靠、准确,28,Thank you,Thank you,29,