单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,乙肝病毒前,S1,蛋白在乙型肝炎临床诊断中的意义和应用,病 毒 性 肝 炎 的 主 要 特 性 如 下,分 型 项 目 甲型 乙型 丙型 丁型 戊型,病 原 27,nm,42,nm,30-60,nm,36,nm,27-38,nm,RNA,病毒,DNA,病毒,RNA,病毒,RNA,病毒,RNA,病毒,主要传播途径 粪口 血液、母婴 血 液 血 液 粪口,流 行 性 散发或流行 散 发 散 发 散 发 流行或散发,潜 伏 期 30 天 90 天 5 周 420 周 36 天,（1550）（45160）（226）（1575）,起 病 急性较多 多 缓 慢 多 缓 慢 多 缓 慢 急性较多,慢 性 肝炎 或 无 有 有 有 无,慢性病毒携带,血清病毒性肝炎,标 志 物 检 测,EIA,EIA,EIA,EIA EIA、IEM,以及基因检测,RT-PCR,PCR RT-PCR RT-PCR,在我国建立简便、灵敏、重复性好的检测,乙型肝炎病毒试剂盒是及其重要的。,我国为病毒性肝炎的高发区，特别是乙型,肝炎，我国人群乙型肝炎病毒的感染率达 45-,85%，,HBsAg,携带者有1.2亿以上，10%以上转为,慢性肝炎，部分演变为肝硬变，进而引发肝癌。,前,S1,蛋白分子生物学特性,1、乙肝病毒(,HBV),基因结构,HBV,为嗜肝,DNA,病毒，由一个不完,全双链,DNA,组成，约 3200 个氨基酸；,长链,L(-),含4个开放读码框架（,OFR),，为病,毒蛋白的编码区：,S,区、,C,区、,P,区、,X,区；,短链,S(+),相当于长链的50100%。其不固,定端可被内源性,DNA,多聚酶延长，使病毒成为完,整的双链。,外膜,核壳,负链,DNA,正链,DNA,DNA,多聚酶,乙型肝炎病毒（,HBV）,图 解,X gene,X gene,C gene,Pre C,HBxAg,HBcAg,HBeAg,S gene,preS2,preS1,P gene,HBsAg,DNA,polymerase,HBV,基因组：编码,HBV,抗原的基因,s,s,s,preS2,preS2,preS1,226,aa,“,major”or”small”,HBsAg,226,aa,226,aa,55,aa,55,aa,281,aa,”middle”,HBsAg,389,aa,”large”,HBsAg,108,aa,编码不同形式表面抗原（,HBsAg,),的,HBV,基因区域,乙 型 肝 炎 病 毒 血 清 学 检 测 的 临 床 意 义,检测名称,HBV,感染，高滴度的,HBsAg,常表示病毒的高复制,水平，低滴度则表示病毒低复制或不复制。,HBsAg,抗,HBs,乙型肝炎的保护性抗体。当,HBV,感染趋向恢复时，,抗,HBs,开始产生并逐渐增多,。,HBeAg,临床上病毒复制的指标。,HBeAg,与,ALT,结合，,用于病期和病情判断。,抗,HBe,通常表示病毒复制减弱和肝病渐趋恢复。前,c/A83,变异，,HBeAg,不表达，抗,HBe,(+)，,病毒持续复制，肝病转慢,。,抗,HBc,HBV,现症或既往感染标志。流行病学研究的指标。,乙 肝 五 项,（,HBV,M),缩 略 语,临 床 意 义,乙肝,IgM,核心抗体,检测名称,缩 略 语,临 床 意 义,抗,HBcIgM,HBV,的急性感染和重新活动的慢性,感染标志,。,前,S1,蛋白,Pres1,抗原,HBV,感染的最早期出现，提示,HBV,的感染，,复制和传染性。,Pres1,抗原的转阴是病毒清,除最早迹象，如持续阳性提示肝病转慢。,Pres1,抗体,急性,HBV,感染最早出现的抗体。它即反,应了病毒的清除又反应了病变的活动。,动物试验表明抗前,S1,有抗病毒的作用。,乙 型 肝 炎 病 毒 血 清 学 检 测 的 临 床 意 义,S,基 因 变 异 状 况,1,.前,S1,变异株以前,S1,蛋白,C,端,AA 183,缺失突变较多见，这种,突变因影响,HBsAg,正常分泌，并使,L,蛋白发生蓄积而引起肝,细胞病变和肝细胞对炎性因子的损伤更敏感。,2,.前,S1,基因起病密码下游 230 位核苷酸（,nt 230）,可因突变形成,终止密码并影响前,S2,起始密码，可使,HBV,逃避干扰素治疗和,宿主免疫清除。,3,.,S,基因变异是疫苗免疫失败的重要原因：,HBsAg,aa,145,变异株。,HBsAg,aa,126，129,，,132,，,133,，,134,等变异株。,理想的疫苗应能诱导覆盖野毒株和变异株保护性免疫。,4,.,S,基因变异导致形成,HBsAg,/,抗,HBs,双阳性（,aa 126，130，145,）,5,.S,基因变异导致形成,HBsAg,阴性，抗,HBs,阳性，,HBV-DNA,持续,阳性的慢性乙型肝炎的重要原因（,aa 126，131，145,）,乙肝病毒前,S1,的研究表明：前,S1,蛋白及其抗体与,HBV-DNA、,HBeAg,、,肝,脏损害、乙肝的转归、乙肝疫苗有效成分等都,有极其密切的关系。,乙肝病毒前,S1,蛋白及其抗体可,作为乙肝病毒感染、复制和乙肝病人的诊断、,治疗和预后的新标志和新检测系统。,意义,HBsAg,anti-anti-,HBc HBeAg,anti-,HBV/preS1 preS1,HBs IgM,tot,HBe,DNA,抗原 抗体,/,/,/,/,病 毒 活 动（主 要 为 野 生 型,）,病 毒 活 动（主要为 前核负链变异型）,正 在 消 退 的 急 性 肝 炎,健 康 携 带 者,“,核 心 窗 口,”,期,自 然 感 染 后 的 免 疫,疫 苗 接 种 后 的 免 疫,不同形式的血清学,HBV,标记物和它们的解释,前,S1、HBV,免疫检测结果,HBV,标志,前,S1(),例数,例 数,+,阳 性 率 (%),HBsAg,(),HBeAg,(),抗,HBc,(),107,94,87.9,HBsAg,(),抗,H,B,e,(),抗,HBc,(),119,68,57.1,HBsAg,(),HBeAg,(),21,16,76.2,HBsAg,(),抗,HBc,(),37,11,29.7,HBsAg,(),HBeAg,(),抗,HBe,(),4,1,25.0,HBsAg,(),抗,HBe,(),13,1,0.77,HBsAg,(),抗,HBs,(),抗,HBe,(),抗,HBc,(),4,0,0,HBsAg,(),抗,HBs,(),19,0,0,HBsAg,(),抗,HBs,(),抗,HBe,(),2,0,0,HBsAg,(),4,0,0,合计,330,191,57.9,HBsAg,PreS1,抗原,PreS1,抗体(,IgM,),PreS1,抗体,(,IgG,),抗,HBs,年,抗,HBe,抗,HBc,(,IgG,),HBeAg,0 10 20 30,感,染,HBV-DNA,HBV,携带者血清病毒学标志物的转换曲线,前,S1,蛋白与,HBV-M,和,HBV-DNA,测定结果,PreS1,HBV-DNA,（）,阳性率,阳性率,（）,HBV-M,n,HBsAg,HBeAg,抗,HBc,HBsAg,抗,HBe,抗,HBc,HBsAg,抗,HBc,抗,HBs,抗,HBe,，,抗,HBc,抗,HBs,，,抗,HBc,抗,HBc,HBsAg,抗,HBs,387 347 89 351 91,236 76 32 82 35,108 23 21 29 27,21 0 0 0 0,30 0 0 0 0,36 0 0 1 2.7,4 0 0 0 0,急性乙肝不同病期的免疫标志动态,病日,例数,前,S1,抗原(),抗前,S1,抗体(),HBsAg,(),HBeAg,(),抗,HBs,入院日,25,22,23,25,18,0,入院后一月,25,17,22,23,14,0,入院后二月,25,8,22,13,5,8,入院后三月,21,2,12,4,1,15,急性乙型肝炎前,S1,抗体动态变化,不同类型,HBV,感染的前,S,蛋白及其抗体的检出率,HBV,（,杂交）,前,S1,蛋白,前,S2,蛋白,前,S1,抗体,前,S2,抗体,急性乙型肝炎,极期,恢复6月内,恢复0.5-2年,趋向慢性,暴发性乙型肝炎,慢性无症状携带,HBeAg(+),抗,HBe(+),慢性乙型肝炎,HBeAg(+),抗,HBe(+),95 97 92 87 82,0 0 26 98 95,0 0 0 0 30,95 90 65 0 12,22 30 67 5 28,82 99 97 0 0,3 12 40 0 0,71 85 92 81 68,13 53 70 65 80,*据骆抗先文献综合,结 语,乙型肝炎病毒前1抗原研究进展,国内外对前蛋白/抗前蛋白临床意义的基本共识,一前蛋白,前1病毒蛋白出现在急性,HBV,感染的最早期，是病毒,清除的最早迹象。,前 1 病毒蛋白持续存在者将发展至慢性肝炎。,前1 病毒蛋白与,HBV-DNA,HBeAg,高度相关。与肝内,HBV-DNA,HBcAg,检出高度相关。,在抗,HBe,(+),的,HBV,感染者中，检出前1蛋白,可表明病毒的复制。,病毒附着于肝细胞膜上，最重要的介导部位是前1,蛋白的 氨基酸(,AA)21-47,片段。变异的病毒只要这,一区段完好就有传染性。仅仅是对,(,AA)21-47,肽的,前1抗体才能中和病毒。,前,S1,蛋白颗粒表面具有高度的免疫原性，常作为,乙肝疫苗的主要成分。,前,S1,抗原主要存在于血清中完整,HBV,表面。,二抗前蛋白,前抗体同时反映病变的活动和对病毒的清除,。,1.,HBsAg,消失后才转换为抗,HBs,，,而 前抗体常与,其抗原同时存在。,2.前抗体通过对感染细胞的破坏而清除病毒，因而,同时参与病变活动性和免疫清除机制。抗,HBs,则通,过中和作用预防病毒再感染。,3.,早期出现抗前，可能是病毒将清除，感染将结束,的最早标志物。即使在暴发性肝炎，出现抗前也,可能预示垂危中的生机。,4.猩猩试验表明，抗前有对抗,HBV,的保护作用,。,PreS1,抗原试剂盒的临床应用,1.,对拟查“二对半”的患者，同时加查,PreS1，,可起到确诊与补充的作用，如感染与复制、,急性与慢性、预后与疗效等；,2.非肝炎住院病人常规检测，,PreS1,比“二对,半”更有意义；,3.献血员筛查，检测前,S1,可减少乙肝病毒感染,者漏检；,4.,创伤性检查病员应检测,PreS1，,如内窥镜检,查、牙科手术等。,