单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,茶叶中主要成分含量的测定,报告人：袁培培,03081132,引言,茶叶的神奇功效：利尿排毒；除脂解腻，促进消化；消除疲劳；增强记忆力；消炎抑菌；预防龋齿；抗癌、抗辐射、抗衰老；防止高血压等,分类,含量（在干重中）,具体成分,生理作用,蛋白质,20,30,各种蛋白质,氨基酸,1,4,茶氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸和异亮氨酸等,25,种以上,是人体必须的营养成分；降低血氨，治疗肝昏迷；调整脂肪代谢,生物碱,2,5,以咖啡碱的含量最多,提神；利尿；促进血液循环；降胆固醇；防止动脉粥样硬化等,茶多酚,20,35,儿茶素、黄酮类、花青素和酚酸等四大类物质,降血脂；消炎抑菌；防辐射；抗癌、抗突变等,糖类,20,25,淀粉、纤维素、半纤维素、木质素,类脂类,8,脂肪、磷脂、甘油脂、糖酯和硫酯,调节人细胞的渗透压,维生素,0,6,1,维生素,A,、维生素,D,、维生素,C,、维生素,B,族,保护视力；增加抵抗力；抗坏血病，抗氧化、抗衰老等,矿质元素,3,5,7,0,Ca,、,K,、,P,、,Mg,、,Mn,、,F,、,Cu,、,Zn,、,I,、,Se,等,防止味觉异样；防止皮肤过敏；抗氧化；增强免疫力；预防蛀牙等,茶叶中主要成分含量的测定,蛋白质的测定,茶多酚的测定,咖啡碱的测定,金属元素的测定,结束语,本文所述的对 茶叶中主要成分含量的测定 各有优缺点。但只要我们能 够根据具体 情况选取合适 的方法，都会为研究茶叶作为药用及保健品的进一步开发利用提供参考依据,。,参考文献,贾林艳，宋伟新，庄志萍，周靖，宿艳华,高效液相色谱法测定茶叶中水溶性维生素的含量,中国农林 副产品,2003,年,5,月,2.,张国文刘永华杨振华朱志怀,赣南信丰茶叶中蛋白质、茶多酚、咖啡碱的测定,南昌大学学报,(,工科版,)1996,年,12,月,杨明索南,微波加热快速测定茶叶中的茶多酚,青海大学学报,(,自然科学版,)1998,年 第,4,期,3.,1.,6.,谢立群,火焰原子吸收法测定茶叶中的金属元素,4.,林郑和严兰芳,紫外分光光度法测定茶叶中的,咖啡碱,茶叶科学技术,2001,年 第,4,期,5.,曾建民 伍炳华 杨亚军,茶叶可溶性蛋白质的,SDS-PAGE,电泳分析法,中国茶叶,1998,年,6,月,北华大学学报,(,自然科学版,)2000,年,12,月,谢谢大家,!,蛋白质的测定,1,）,凯氏定氮法,2,）,SDS,PAGE,电泳分析法,3,）色谱法,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法,试剂及主要仪器,1),浓硫酸,(A.R),2),硫酸钾,(A.R),3),硫酸铜,(A.R),4)3.0%,NaOH,溶液,5)2%,硼酸溶液,6)0.05mol/L,的标准,HCl,溶液,7)0.1%,混合指示剂,:0.1%,甲基红酒精溶,液和,0.1%,甲基蓝酒精溶液按,1,：,1,混合,8),微量凯氏定氮仪,处理样品,准确称取样品,2g,小心移入烧瓶中,再,CuSO,4,1g,K,2,SO,4,10 g,和浓,H,2,SO,4,50mL,。用电炉加热消化至液体变成蓝绿透明后,冷却,定容至,100,mL,。,测定,先用蒸汽洗涤微量凯氏定氮装置后,精确移取消化液,10.00,mL,量取,NaOH,25mL,加至反应室中,蒸气蒸馏直至硼酸溶液由葡萄紫色变成绿色,最后再用,0.05 mol,L,HCl,溶液滴定至淡葡萄紫色。,处理,样品,测定,粗蛋白百分含量,=,式中,:V,1,样品消耗盐酸标准液的毫升数,;,V,2,试剂空白消耗盐酸标准液的毫升数,;,C ,盐酸标准液的浓度,;,0.014 1mol,L,HCl,标准液,1mL,相当于氮,的克数,;,6.25,氮换算成蛋白质的因数。,返回,茶多酚的测定,1),高锰酸钾容量法,2),微波加热法,3),分光光度法,4),原子吸收法,试剂及主要仪器,1),微波炉,2)724,型分光光度计,3),酒石酸亚铁溶液,:,称取,1000g,硫酸亚,铁和,5000g,酒石酸钾钠,用水溶解并,定容至,1L,pH=7.5,4),磷酸盐缓冲液,:,取,mol,L,的,mol,L,磷酸二氢钾溶液,850ml,和,磷酸二氢钾溶液,150ml,混合均匀,称取磨碎茶叶试样,0.3g(,准确至,0.0001g),于,100mL,容量瓶中,加蒸馏水,40mL,用密封带密封瓶口,橡皮筋系紧,置于微波炉内,于中档功率微波加热,5min,端出转盘,取下密封带,过滤至,50mL,容量瓶中,定容。准确吸取上述试液,1.00mL,注入,25mL,的容量瓶中,加水,4mL,和酒石酸亚铁溶液,5mL,充分混合再加,pH=7.5,的缓冲液至刻度,用,10mm,比色杯,在波长,540nm,处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度,(A),茶多酚,(%)=,式中,:L,1,试样的总量,(ml);,L,2,测定时的用液量,(ml);,M ,试样的质量,(g);,m ,试样干物质含量的百分率,(%);,1.957 ,用,10mm,比色杯,当吸光度等于,0.50,时,每毫升茶汤中含茶多酚相当于,1.957mg,。,返回,咖啡碱的测定,碘量法,重量法,紫外分光,光度法,薄层扫描法,为什么？,利用咖啡碱结构上的嘌呤环具有共轭双键体系，因而具有独特的吸收光谱，在 波长,272,274nm,处具有最大吸收值，其消光度与咖啡碱含量呈线性关系。故可通过消光度求其含量,试剂及主要仪器,8)0.01N,HCl,溶液,:,取比重,1.19,的浓,HCl,0.83,1),电子分析天平,2)752,分光光度计,3),恒温水浴锅,4),吸滤装置,5),移液管,6),锥形瓶,7),碱性乙酸铅溶液,:,称取,50g,碱性乙酸铅,加水,100mL,静置过夜；,L,稀释至升。,9),咖啡碱标液,:,准确称取,100mg,咖啡碱（纯度不低于,99,）溶于,100mL,水中，作为母液。准确吸取,5.00,mL,加水至,100mL,作为工作液。（每毫升含,0.05mg,）,准确称取,3.0000g,均匀地磨碎茶样于,500mL,锥形瓶中,加沸蒸镏水,450mL,立即移入沸水浴中，浸提完毕立即趁热减压过滤。滤液移入,500mL,容量瓶中，残渣用少量热蒸镏水洗涤,2,3,次，并将滤液拼入上述容量瓶中，用水稀释至刻度。,用移液管准确吸取试液,10.00mL,，移入,100mL,容量瓶,加入,5mL0.01N,盐酸和,1mL,碱性乙酸铅溶液，用水稀释至刻度，,充分混匀，静置过滤。准确吸取,25.00mL,滤液注入,50mL,容量瓶中，加入,3,滴,6N,硫酸溶液，加水稀释至刻度、混匀、,静置过滤。用,10mm,比色杯，在波长,274nm,处，以试剂空白,为溶液参比，测定其吸光度（）。,准确称取均匀磨碎的茶样,3.0000g,于,500mL,锥形瓶中,加沸蒸镏水,450mL,立即移入沸水浴中，浸提完毕立即趁热减压过滤。滤液移入,500mL,容量瓶中，残渣用少量热蒸镏水洗涤,2,3,次，并将滤液倒入上述容量瓶中，用水稀释至刻度。,返回,金属元素的测定,1),火焰原子吸收法,2),离子色谱法,3),电感耦合等离子体质谱法,试剂与主要仪器,1)WFX,1 F,2,B,2,原子吸收分光光度计,;,2)Ca,Mg,Mn,Fe,Zn,Cu,Ni,Co,3),二氯化锶：,5%,分析纯,;,的标准贮备液：,1,g/,(,北京国家标准物质研究中心,);,4),硝酸、盐酸、高氯酸：分析纯。,样品来源及样品的制备,准确称取茶叶,5.0,于烧瓶中,加,20,mL,HNO,3,静置消化,12min,次日加入,5mL,高氯酸,于小火加热至无色透明近干为止,冷却后转移到,25mL,容量瓶中,用,3%HNO,3,定容,摇匀备用。,标准工作曲线绘制,配制各元素标准工作使用液,按,仪器工作参数表,测定溶液的吸光度,绘制工作曲线,并计算回归方程和相关系数。,样品测定,按,仪器工作参数表,上所列仪器的工作条件,分别测定样品液中,Ca,Mg,Mn,Fe,Zn,Cu,Ni,和,Co,的质量分数,测定,5,次,将测得值乘以稀释倍数即为样品中上述七种离子的质量分数。,讨论,酸度,磷酸根的干扰,HNO,3,返回,其中为光谱通带宽度,为燃烧器高度。,返回,仪器工作参数表,