单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,结题报告,阿胶与海参、鲍鱼及鱼翅的化学成分及功效的对比研究,委 托 方,山东东阿阿胶股份有限公司,受 托 方,中国海洋大学,1,结题报告阿胶与海参、鲍鱼及鱼翅的化学成分及功效的对比研究委,课题总体目标,主要研究内容,总体执行情况,取得的主要研究进展,课题汇报提纲,课题总体目标课题汇报提纲,2,一、课题总体目标,为更好的提升阿胶价值，实现高校与企业间的优势嫁接与互补，山东东阿阿胶股份有限公司委托中国海洋大学对东阿阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的化学成份及其生物活性进行了深入的比较研究，为宣传推广阿胶提供技术保障和数据支持。,一、课题总体目标 为更好的提升阿胶价值，实现高校与企业间,3,(一）东阿阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的化学成分比较分析,蛋白含量分析：采用半微量凯氏定氮法,胶原蛋白分析：,胶原蛋白含量测定；,阿胶产品中胶原蛋白分子量范围的测定。,3.极性脂分析：,样品中总脂肪含量测定；,极性脂的组成测定；,脂肪酸的组成测定。,4.氨基酸分析：,5.硫酸多糖分析：,多糖含量测定；,分子量测定；,单糖组成采测定；,硫酸根含量测定。,二.主要研究内容,(一）东阿阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的化学成分比较分析二.主要研,4,（二）生物活性比较研究,1.阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅对免疫低下模型小鼠免疫调节作用比较,检测指标：,脾、胸腺/体重；,细胞免疫反应；,迟发性变态反应（足跖增厚法）；,淋巴细胞增殖反应。,体液免疫反应（抗体生成水平）；,非特异性免疫反应；,细胞因子：,IFN-含量,IL-4含量,IL-3含量,（二）生物活性比较研究,5,检测指标：,A负重游泳能力,B血红蛋白（Hb）水平,C 全血乳酸测定,D运动后血清尿素氮;,E肝糖元含量,2.阿胶、海参抗疲劳活性比较研究,检测指标：2.阿胶、海参抗疲劳活性比较研究,6,检测指标：,外周血像：,白血细胞（WBC）,红血细胞（RBC）,血小板（PLT）,血红蛋白（Hb）,红细胞压积（HCT）,骨髓有核细胞数：,3.阿胶、海参、鲍鱼补血活性研究,检测指标：3.阿胶、海参、鲍鱼补血活性研究,7,三.总体执行情况,按照合同要求，中国海洋大学完成了:,东阿阿胶、海参、鲍鱼和鱼翅等化学成分的研究；,东阿阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅对免疫低下模型小鼠免疫调 节作用的等生物活性研究；,东阿阿胶和海参的抗疲劳活性研究；,东阿阿胶、海参和鲍鱼的补血活性研究；,三.总体执行情况按照合同要求，中国海洋大学完成了:,8,阿胶的主要活性成分为胶原蛋白、胶原蛋白肽和糖脂。阿胶中含有人体所需的全部氨基酸，以Gly，Pro,Glu，Ala，Arg和Asp为主要氨基酸；,海参的主要活性成分为海参胶原蛋白、海参多糖和糖脂。氨基酸组成中以Gly，Glu，Asp，Arg，Ala和Val含量较高；,鲍鱼的主要为胶原蛋白和糖原。氨基酸组成中以Glu，Arg，Asp，Gly含量较高；,鱼翅主要为胶原蛋白和鱼翅多糖。氨基酸组成中以Gly，Glu，Arg，Asp，Ala含量较高。,Gly，Glu，Asp，Arg 是与补血、调节免疫能力和抗疲劳密切相关的活性氨基酸成分。海参多糖是机体重要的免疫促进剂。,化学成分的主要研究结果,阿胶的主要活性成分为胶原蛋白、胶原蛋白肽和糖脂。阿胶中含有人,9,1.,东阿阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的,免疫调节作用：,均显著增强免疫机能低下小鼠的抗体生成水平，,显著促进Th1细胞介导的迟发型变态反应，促进T淋巴细胞转化，,提高小鼠血清IFN-含量，降低血清IL-4含量，提高IFN-/IL-4比值，逆转Th1/Th2 漂移，,显著提高腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力。,生物活性的主要研究结果,东阿阿胶、鲍鱼、鱼翅,对特异性和非特异性免疫具有全方位的调节作用,1.东阿阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的免疫调节作用：生物活性的主要,10,2.东阿阿胶、海参抗疲劳活性,显著提高小鼠负重游泳能力；,提高小鼠肝糖元含量；,提高安静状态下小鼠血红蛋白含量和保持运动小鼠血红蛋白水平稳定；,显著降低运动小鼠血乳酸的生成和促进运动后血乳酸的消除；,加速运动后血清尿素氮的清除。,东阿阿胶和海参具有显著的抗疲劳和提高运动耐力的作用,2.东阿阿胶、海参抗疲劳活性 东阿阿胶和海参具有显著的抗疲劳,11,3.东阿阿胶、海参、鲍鱼补血活性,显著提高正常小鼠外周红血细胞数量和血红蛋白含量;,提高小鼠骨髓有核细胞数量。,促进正常小鼠红细胞生成和合成血红蛋白的能力，,提高正常小鼠的骨髓造血功能。,3.东阿阿胶、海参、鲍鱼补血活性 促进正常小鼠红细胞生成和合,12,四.取得的主要研究进展,（一）阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的化学成分比较分析,蛋白含量分析：,阿胶,海参,鲍鱼,鱼翅,蛋白含量(%),75.1,72.7,64.3,74.6,四.取得的主要研究进展（一）阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的化学成,13,1）总糖、酸性粘多糖和硫酸酯基含量,2.多糖分析,物质,总糖%,酸性粘多糖%,硫酸基含量%,阿胶,17.69,1.03,0.08,0.01,11.07,海参,13.62,0.98,14.88,0.35,21.78,鱼翅,6.75,0.35,1.80,0.09,24.75,鲍鱼,32.29,1.36,0.09,0.01,18.02,1）总糖、酸性粘多糖和硫酸酯基含量2.多糖分析物质 总糖,14,2）,单糖组成分析,阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅的酸性粘多糖中单糖组成和含量差异很大，说明各多糖的化学表征不同。,阿胶酸性粘多糖中单糖组成,甘露糖,半乳糖醛酸,氨基半乳糖,摩尔比,0.07,1.00,0.19,质量百分数,4.38%,67.42%,11.88%,2）单糖组成分析阿胶酸性粘多糖中单糖组成 甘露糖 半乳糖醛酸,15,甘露糖,氨基葡萄糖,葡萄糖醛酸,氨基半乳糖,葡萄糖,半乳糖,岩藻糖,摩尔比,0.07,0.12,0.24,0.11,0.51,0.17,1,质量百分数,2.48,4.24,9.15,3.89,18.04,6.48,32.22,海参酸性粘多糖中单糖组成,甘露糖 氨基葡萄糖 葡萄糖醛酸 氨基半乳糖 葡萄糖 半乳糖,16,甘露糖,葡萄糖醛酸,氨基,葡萄糖,半乳糖醛酸,葡萄糖,岩藻糖,摩尔比,0.02,0.04,0.06,0.08,1,0.07,质量百分数,1.21,2.61,3.64,4.02,60.19,3.06,鲍鱼酸性粘多糖中单糖组成,甘露糖 葡萄糖醛酸 氨基葡萄糖 半乳糖醛酸 葡萄糖岩藻糖 摩,17,甘露糖,葡萄糖醛酸,氨基,葡萄糖,半乳糖醛酸,半乳糖,阿拉伯糖,岩藻糖,摩尔比,0.05,0.18,1,0.78,0.47,0.08,0.03,质量百分数,1.37,4.95,29.61,23.10,12.91,1.83,0.75,鱼翅酸性粘多糖中单糖组成,甘露糖 葡萄糖醛酸 氨基葡萄糖 半乳糖醛酸 半乳糖阿拉伯糖,18,3.氨基酸分析,氨基酸,阿胶,海参,鲍鱼,鱼翅,天冬氨酸（Asp）,4.71,6.56,5.54,5.62,谷氨酸(Glu),6.48,8.9 1,9.05,8.04,丝氨酸(Ser),2.58,3.21,2.86,3.51,组氨酸(His),0.56,0.72,0.59,1.61,甘氨酸(Gly),13.36,9.99,4.68,10.22,苏氨酸(Thr),1.31,3.22,2.24,1.87,精氨酸(Arg),5.42,6.19,6.32,6.52,丙氨酸(Ala),6.23,5.36,3.63,5.37,酪氨酸(Tyr),2.27,2.40,1.32,3.16,缬氨酸(Val),2.19,4.82,2.29,4.65,蛋氨酸(Met),1.56,1.36,0.27,1.14,苯丙氨酸(Phe),1.61,2.19,1.62,1.68,亮氨酸(Leu),2.05,3.42,3.86,2.02,异亮氨酸(Ile),0.90,2.58,2.05,2.16,赖氨酸(Lys),3.57,2.08,2.77,2.26,脯氨酸(Pro),6.52,4.04,1.35,3.94,总量,61.32,67.07,50.44,63.77,3.氨基酸分析氨基酸阿胶 海参 鲍鱼 鱼翅 天冬氨酸（Asp,19,4.脂肪分析,物质,总脂含量%,中性脂含量%,糖脂含量%,磷脂含量%,阿胶,3.02,84.90,6.12,8.98,海参,4.24,36.07,32.10,31.83,鱼翅,2.27,41.57,3.29,55.14,鲍鱼,0.35,76.58,5.88,17.54,1）总脂肪含量和脂肪组成,4.脂肪分析 物质 总脂含量%中性脂含量%糖脂含量%磷脂,20,1.阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅对免疫低下模型小鼠免疫调节作用的比较,1）剂量确定,（二）生物活性比较研究,(蛋白含量分别为45、90、180mg/Kg.bw),1.阿胶、海参、鲍鱼、鱼翅对免疫低下模型小鼠免疫调节作用的比,21,2）动物分组,正常对照组,（N）,模型对照组,（M）,阳性对照组,(P),低,中,高,剂量组,阿胶,海参,鲍鱼,鱼翅,于实验结束前1周，小鼠皮下注射氢化可的松，建立免疫低下小鼠模型。,灌胃，1次/d,连续30d。,2）动物分组 正常对照组（N）模型对照组（M）阳性对照组(,22,3）结果,促进,体液免疫机能,M,P,0,20,40,60,80,100,120,140,*,*,*,*,0,20,40,60,80,100,120,140,*,*,*,0,20,40,60,80,100,120,140,*,*,*,*,血清溶血素,M,P,M,P,60-240mg/kg,阿胶,70-280mg/kg,鲍鱼,60-240mg/kg,阿胶,60-240mg/kg,鱼翅,60-240mg/kg,阿胶,60-240mg/kg,海参,阿胶、海参、鲍鱼和鱼翅均能促进体液免疫机能,*,*,*,3）结果MP020406080100120140*,23,脾淋巴细胞增殖,M,P,0.0,.2,.4,.6,.8,1.0,*,*,*,*,*,*,0.0,.2,.4,.6,.8,1.0,0.0,.2,.4,.6,.8,1.0,*,*,*,*,*,*,*,*,*,*,*,*,M,P,M,P,60-240mg/kg,阿胶,60-240mg/kg,海参,60-240mg/kg,阿胶,70-280mg/kg,鲍鱼,60-240mg/kg,阿胶,60-240mg/kg,鱼翅,促进T-淋巴细胞转化,阿胶、鲍鱼、鱼翅促进细胞免疫的效果相当,脾淋巴细胞增殖MP0.0.2.4.6.81.0*,24,组别,脾指数,（,mg/g,）,胸腺指数,（,mg/g,）,血清溶血素,足跖增厚值（,mm,）,T-,细胞增殖,(,A),正常对照,4.440.42,1.350.11,130.167.53,0.330.06,1.020.06,模型对照,3.340.31,#,0.330.06,#,101.047.12,#,0.280.04,#,0.680.03,#,阳性对照组,3.270.15,0.380.04,*,106.068.84,0.340.04,*,0.880.04,*,阿胶,60mg/kg,3.300.18,0.360.04,107.817.77,0.310.06,0.690.06,阿胶,120mg/kg,3.510.25,0.390.03,*,111.106.22,*,0.340.02,*,0.770.07,*,阿胶,240mg/kg,3.590.16,.0400.05,*,118.672.25,*,0.370.03,*,0.880.05,*,海参,60mg/kg,3.570.30,0.380.04,*,113.518.87,*,0.330.02,*,0.780.05,*,海参,120mg/kg,3.820.44,*,0.420.05,*,124.047.13,*,0.380.03,*,0.850.04,*,海参,240mg/kg,3.750.27,*,0.410.03,*