,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验七 果蝇唾腺染色体,遗传育种学实验,实验七 果蝇唾腺染色体遗传育种学实验,一、实验目的,学习剖离果蝇幼虫唾腺和压制唾腺染色体标本的方法,了解和观察唾腺细胞的巨大染色体的形态特征,遗传育种学实验,一、实验目的学习剖离果蝇幼虫唾腺和压制唾腺染色体标本的方法遗,二、实验材料,普通果蝇野生型的三龄幼虫活体,遗传育种学实验,二、实验材料 普通果蝇野生型的三龄幼虫活体遗传育种学实验,实验原理,果蝇,双翅目,,2n=8,果蝇三龄幼虫的唾腺细胞中,存在着,巨型,/,多线染色体,,比一般染色体大,上面带有很多横纹,易于观察。,实验原理果蝇,双翅目,2n=8,多线染色体:由体细胞同源染色体配对,经,2,10,-2,15,次复制,每次复制后不分开而并列聚合在一起形成的。粗约为其它体细胞染色体的,200,倍。,果蝇染色体模式图,2R,2L,3R,3L,X,4,着丝粒,多线染色体:由体细胞同源染色体配对,经210-215次复制,,果蝇染色体模式图,2R,2L,3R,3L,X,4,2R,2L,3R,3L,X,4,染色中心,着丝粒,果蝇染色体模式图2R2L3R3LX42R2L3R3LX4染色,唾腺染色体的特征,:染色体巨大;体细胞联会;形成染色中心;具有深浅不同、疏密相间的横纹。,第,IV,和第,I,(,X,染色体)染色体为端着丝粒染色体,第,II,、第,III,染色体为中部着丝粒染色体,唾腺染色体的特征:染色体巨大;体细胞联会;形成染色中心;具有,四、实验用具药品,1,仪器用具,:显微镜、解剖镜、培养瓶、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、吸水纸、酒精灯、火柴等。,2,药品试剂,:无水酒精、冰醋酸、,1%,醋酸洋红、改良品红、生理盐水(,0.7%N,aCl,)、,1N,盐酸、蒸馏水。,3,培养基,:玉米琼脂培养基,四、实验用具药品 1仪器用具:显微镜、解剖镜、培养瓶、载玻,幼虫培养,置于,16,18,下饲养,当幼虫爬上瓶壁准备化蛹前,即为三龄幼虫,此时虫体肥大,便于解剖,是制备唾腺染色体的最理想时期。,五、实验步骤,幼虫培养置于1618下饲养,当幼虫爬上瓶壁准备化蛹前,即,2.,腺体剖取,载玻片,+,一滴,0.7%,生理盐水,在解剖镜下辨认头部和尾部(,头部稍尖,且有一黑点即口器,,不时摆动),两手各持一个解剖针,在解剖镜下一解剖针压住,头部口器即黑点处,,固定幼虫头部,再用另一针压住虫体后端,1/3,部位,固定幼虫(或用尖头镊子夹住),平稳快速一拉,使口器部分断开,体内各器官从切口挤出,一对唾腺随之而出。,唾腺位于幼虫体前,1/3-1/4,处,2.腺体剖取 载玻片+一滴0.7%生理盐水唾腺位于幼虫体前,唾腺是一对透明而微白的长形小囊,呈香蕉状。,唾腺侧面常有一些沫状脂肪体(不透明)附着,可用解剖针把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。,如果唾腺被拉断或未被拉出,可用解剖针在头部或身体处把其挤压出来。,唾腺是一对透明而微白的长形小囊,呈香蕉状。,3.,解离,把载玻片上的幼虫其它部分除去,用吸水纸小心吸去生理盐水,(,注意吸水纸应离唾腺远些,以免吸附唾腺,),,加,1,滴,1N HCl,,浸,23min,,使组织疏松,以便压片时细胞分散,染色体散开。,3.解离 把载玻片上的幼虫其它部分除去,用吸水,4,.,染色,用吸水纸吸去盐酸,加,1,滴蒸馏水轻轻冲洗后吸干,加,2,滴醋酸洋红或改良品红染液,染色,520min(,此过程应保持腺体一直处于染液的浸泡中,),4.染色 用吸水纸吸去盐酸,加1滴蒸馏水轻轻冲洗后吸干,加2,5,.,压片,换新鲜染液,用吸水纸包被玻片,吸干多余染色液,或用拇指在盖玻片上适当用力压片,5.压片 换新鲜染液,6.,观察,低倍镜下找分散好的标本,移至视野中心,转高倍镜下观察,对染色体分散、个体性清楚的片子,应仔细观察染色体的横纹数量、形状和排列顺序,以便对照模式照片辨认出不同的染色体臂。,6.观察 低倍镜下找分散好的标本,实验七果蝇唾腺染色体标本的制作和观察课件,实验七果蝇唾腺染色体标本的制作和观察课件,实验七果蝇唾腺染色体标本的制作和观察课件,实验七果蝇唾腺染色体标本的制作和观察课件,六、作业及思考题,1.,每人制,1,张染色体分散、横纹清晰的临时片,2.,绘制你在显微镜下所看到的果蝇唾腺巨染色体图,标明实际标本在观察中所能分辨的典型部位,3.,什么是染色中心(,chromocenter,),4.,根据你所学的知识,联会(,synapsis,)应出现在什么类型的细胞中?,5.,利用巨大染色体可以进行哪些遗传学研究?,六、作业及思考题1.每人制1张染色体分散、横纹清晰的临时片,