*,肉毒梭菌,1,肉毒梭菌1,2,2,形态特征,3,形态特征3,肉毒梭菌,一、肉毒梭菌的生物学特性,1,、形态与染色,肉毒梭菌属于厌氧性梭状芽胞杆菌属，革兰氏染色阳性,(,老龄菌是阴性），约为,41m,的大杆菌，多单在，偶见成双或短链，两侧平行，两端钝园，直杆状或稍弯曲，芽胞为卵圆形，大于菌体宽度，位于次极端，使菌体呈匙形或网球拍状，偶有位于中央，常见很多游离芽胞。有,48,根周生鞭毛，,运动迟缓，,无荚膜。,4,肉毒梭菌一、肉毒,病毒因子,5,病毒因子 5,2,、培养特性,最严格的厌氧菌,生长最适温度：,28,37,：,pH,为,6.87.6,，产毒的最适,pH,为,7.8 8.2,。,产毒培养温度：不同菌型产毒的最适培养温度不完全相同。,C,、,D,型温度高些为宜，,35,培养,3d,即可，而,E,型菌低温度长时间培养效果较好。,对营养要求不高：在普通培养基上都能生长。,肉毒梭状芽孢杆菌菌落,在固体培养基表面上，形成类圆形，边缘不整齐，约,3,毫米左右的菌落。菌落半透明，表面一般比较光滑也有的呈颗粒状，界线不明显，向外扩散。呈绒毛网状，常常扩散成菌苔。,6,2、培养特性最严格的厌氧菌肉毒梭状芽孢杆菌菌落,2,、培养特性,在含有肉渣的液体或者半流动培养基中，肉毒梭菌生长旺盛且产生大量气体，,A,、,B,、,F,三型表面浑浊，底部有粉状和颗粒状沉淀，并能消化肉块，变黑有臭味；而,C,、,D,、,E,三型表明清亮，絮片状生长，粘贴于管壁。,肉毒梭状芽孢杆菌菌落,在葡萄糖鲜血琼脂平板上，菌落较小，扁平，颗粒状。中央低落，边缘不规则，有的菌落还有大的溶血环。,在卵黄琼脂平板上生长，菌落及其培养基周围表面覆盖着特有的彩虹样薄层，但,G,型没有。,7,2、培养特性在含有肉渣的液体或者半流动培养基中，肉毒梭菌生长,3,、抵抗力,本菌芽胞抵抗力强，在湿热,100,可生存,5,小时,;,干热,1802,小时、高压蒸汽,12130,分钟才能将本菌芽胞杀死。肉毒毒素不耐热，,10020,分钟即可破坏。,8,3、抵抗力本菌芽胞抵抗力强，在湿热100可生存5小时;干热,二、,肉毒梭菌的致病性,肉毒梭菌能产生外毒素即肉毒毒素（大分子蛋白），根据毒素的抗原特异性将其分为,A,、,B,、,C,（,1,、,2,）、,D,、,E,、,F,、,G,七个型别。与毒素型别相对应，肉毒梭菌也分为同样的七个型别。其中,A,、,B,、,E,、,F,四型毒素对人有不同程度的致病性。,A,型毒素经,60,2,分钟加热，差不多能被完全破坏，而,B,、,E,二型毒素要经,70,2,分钟才能被破坏；,C,、,D,二型毒素对热的抵抗更大些；,C,型毒素要经过,90,2,分钟加热才能完全破坏，不论如何，只要煮沸,1,分钟或,75,加热,5,10,分钟，毒素都能被完全破坏。肉毒毒素对酸性反应比较稳定，对碱性反应比较敏感。某些型的肉毒毒素在适宜条件下，毒性能被胰酶激活和加强。,9,二、肉毒梭菌的致病性 肉毒梭菌能产生外毒素即肉毒,致病物质,主要依靠神经外毒素。其作用机制：肉毒杆菌毒素作用于胆碱能运动神经末梢，以某种方式拮抗钙离子的作用，干扰乙酰胆碱从运动神经末梢的释放，使肌纤维不能收缩。肉毒杆菌毒素不阻断神经兴奋的传播，神经和肌肉都没有兴奋性和传导性的损害。这种作用也称为化学去神经作用。,10,致病物质 主要依靠神经外毒素。其作用机制：肉毒杆菌毒素作用于,致病机理,肉毒毒素是一种神经麻痹毒素，主要抑制神经末梢释放乙酰胆碱，引起肌肉松弛麻痹，特别是呼吸肌麻痹导致死亡。,肉毒毒素的毒性极强，是目前已知在天然毒素和合成毒剂中毒性最强的生物毒素，据称，精制毒素,1,克能杀死,400,万吨小白鼠，一个人的致死量大概,1,微克左右。,肉毒中毒一年四季均可发生。美国以罐头发生中毒较多，日本以水产品较多；我国以发酵食品（如：臭豆腐、豆瓣酱、豆豉等）发生中毒较多。,11,致病机理11,所致疾病,成人肉毒中毒,该病是单纯性毒素中毒，而非细菌感染引起。多见于食入肉毒毒素食品后，数小时或数十小时可出现以神经末梢麻痹为主的症状，患者出现斜视、复视、眼睑下垂，严重的出现吞咽、咀嚼困难、口齿不清，进而因膈肌麻痹而死亡。患者神志清醒，不发热，很少有胃肠道症状。,12,所致疾病成人肉毒中毒12,婴儿肉毒中毒,多见于,2,周,8,个月的婴儿。由于婴儿肠道的特殊环境及缺乏拮抗肉毒梭菌的正常菌群，又食入被梭菌污染的食品，该菌在肠道内生长繁殖并产生毒素，毒素被吸收而致命。最早出现的症状是便秘，吸乳、啼哭无力，其他症状与成人肉毒中毒类似。,13,婴儿肉毒中毒 13,三 微生物学检验,1,、取,.,粪便检查在显微镜检查可见革兰阳性芽胞杆菌。,2.,细菌培养：将可疑食物、呕吐物或排泄物加热煮沸,20,分钟后，接种于血琼脂培养基作厌氧培养，可分离出肉毒梭菌。,3.,毒素试验,（,1,）动物试验 将检查标本浸出液饲喂动物，或作豚鼠、小白鼠腹腔内注射。可引起动物四肢,瘫痪,而迅速死亡。婴儿型者则可用婴儿粪便浸出液作动物试验。,（,2,）中和试验 将各型抗毒素血清,0.5ml,注射小白鼠腹腔内，随后接种标本,0.5ml,同时设对照组，从而判断毒素和定型。,（,3,）禽眼睑接种试验 将含有毒素的浸出液,0.1,0.3ml,，注入家禽眼内角下方眼睑皮下，出现眼睑闭合、或出现麻痹性,瘫痪,和呼吸困难，经数十分钟至数小时死亡，可作为快速诊断。,4.,毒素检测,应用抗肉毒毒素抗体进行中和试验，检查病人血清中肉毒毒素，可对毒素分型。,5,肌电图检查：有肌纤维颤动、单次刺激反应降低，多次刺激电势反而增高，有短持续期小波幅多相运动、电势增加等表现。可作为辅助诊断。,14,三 微生物学检验1、取.粪便检查在显微镜检查可见革兰阳性芽胞,四 防治原则,预防本病的主要方法：,1,、加强食品卫生管理和监督,2,、对可疑食品可煮沸半小时以上，破坏肉毒毒素。,3,、对患者早期注射足量的多价肉毒抗毒素，同时加强护理和对症治疗，尤其是维持呼吸功能，降低死亡率。,15,四 防治原则预防本病的主要方法：15,临床应用,在了解了毒素的结构与功能以及作用机制后，人类开始用毒素来作为有效药物。肉毒毒素被助恶治疗眼睑痉挛、痉挛性斜颈、痉挛性发音困难等疾病,美容,除皱,16,临床应用在了解了毒素的结构与功能以及作用机制后，人类开始用毒,去除动态皱纹的原理,将收缩造成皱纹的肌肉麻痹掉，使肌肉不收缩，连带的也去除了皱纹。一般在注射后三、四天就可以看到效果，一周后效果就很明显。效用期约三至六个月，平均四个月。若皱纹再出现，视个人需要，可重复施打。肉毒杆菌毒素除皱还是有一定的并发症和副作用，如注射局部有头痛；抬头纹处注射不当时会发生睑下垂；鱼尾纹处注射不当时会发生,复视,及闭眼不全；因注射剂量不准确，一侧多、一侧少会发生不对称的结果；进针刺破血管偶而发生出血或血肿；大,剂量,、反复注射可能会引起免疫复合物疾病；肌肉麻痹的结果是不能做各种表情,17,去除动态皱纹的原理将收缩造成皱纹的肌肉麻痹掉，使肌肉不收缩，,18,18,副作用,尽管如此，肉毒杆菌毒素除皱还是有一定的并发症和副作用，如注射局部有头痛；抬头纹处注射不当时会发生睑下垂；鱼尾纹处注射不当时会发生复视及闭眼不全；因注射剂量不准确，一侧多、一侧少会发生不对称的结果；进针刺破血管偶而发生出血或血肿；大剂量、反复注射可能会引起免疫复合物疾病；肌肉麻痹的结果是不能做各种表情，有假面具样感觉；极少数病人可发生,过敏性休克,。,19,副作用尽管如此，肉毒杆菌毒素除皱还是有一定的并发症和副作用，,谢谢观看,20,谢谢观看20,