Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,第四节 干化学技术简介,第四节 干化学技术简介,1,干片技术,干片技术,2,VITROS MicroSlide(,干片)技术,介绍三种干片,定义干片 分层,功能,和测量技术,叙述,VITROS,干片 在操作中与,常规方法,相比的优势,VITROS MicroSlide(干片)技术介绍三种干片,3,1970 年：化学干片技术起源于,1970,年的伊斯特 曼,-,柯达公司,1971年,：,借鉴普通临床生化反应序列,生产出葡萄糖分析干片,1976年：干片获得专利,1978年：推出专利的干片生化技术,1980年：,FDA,批准五个分析产品可以进入市场,2019年：推出一些免疫产品,干片的历史,1970 年：化学干片技术起源于1970年的伊斯特,4,干片分类,CM/RT,PM,IR,比色/速率法干片 电极法干片 免疫-速率法干片,干片分类CM/RTPMIR比色/速率法干片,5,通过测定干片颜色变化来确定化合物浓度,终点法、双波长 测定法，固定时间法、速率法,通过测定干片颜色变化来确定化合物浓度,6,终点法,应用终点法进行测试的项目,白蛋白干片（,ALB）,血氨干片（,AMON),钙离子干片（,Ca),胆固醇干片（,CHOL),葡萄糖干片（,GLU),高密度脂蛋白胆固醇干（,HDLC),镁离子干片（,Mg),磷离子干片（,PHOS),总蛋白干片（,TP),甘油三酯干片（,TRIG),尿素氮干片（,BUN/UREA),尿酸干片（,URIC),终点法应用终点法进行测试的项目,7,双波长 测定法,应用双波长 测定法进行测试的项目,总胆红素（,TBIL),消除可形成的光谱干扰,非结合胆红素和结合胆红素（,BUBC),摩尔吸收值相近 两不同波长处的读数可以用来确定,BU,和,BC,的浓度,双波长 测定法应用双波长 测定法进行测试的项目,8,固定时间法（两点法）,应用固定时间法进行测试的项目,淀粉酶干片（,AMYL),脂肪酶干片（,LIPA),肌酐干片（,CREA),铁离子干片（,FE),茶碱干片（,THEO),固定时间法（两点法）应用固定时间法进行测试的项目,9,速率法（多点法）,应用速率法进行测试的项目,谷丙转氨酶干片（,ALT),碱性磷酸酶干片（,ALKP),谷草转氨酶干片（,AST),肌酸激酶干片（,CK),肌酸激酶同工酶干片（,CK-MB),谷氨酰转肽酶干片（,GGT),乳酸脱氢酶干片（,LDH),胆碱酯酶干片（,CHE),速率法（多点法）应用速率法进行测试的项目,10,干化学技术简介课件,11,指示剂层,支持层,扩散层,试剂层,比色/速率法干片,指示剂层扩散层比色/速率法干片,12,指示剂层,支持层,均匀分布标本,过滤大分子,标本预处理,提供反射测定的背景,扩散层,试剂层,扩散层,指示剂层 均匀分布标本扩散层扩散层,13,扩散层,试剂层,指示剂层,支持层,包含干性试剂,多层试剂，控制反应顺序,扩散层指示剂层 包含干性试剂,14,扩散层,试剂层,指示剂层,支持层,包含染料以产生显色复合物,驱使反应完成,扩散层 指示剂层包含,15,支持层,扩散层,试剂层,指示剂层,支持层,提供反应支持基垫,允许光路自由通过,支持层 扩散层 指示剂层 提,16,干化学技术简介课件,17,均匀分布标本,标本进入扩散层,均匀分布标本标本进入扩散层,18,标本迅速向四周扩散,标本迅速向四周扩散,19,标本均匀向下层渗透,标本均匀向下层渗透,20,标本与试剂反应,标本与试剂反应,21,反应物在指示剂层被固定,反应物在指示剂层被固定,22,干扰物质,反光背景,指示剂层,生成纯净的反射光,光源,滤光片,接收器,干扰物质反光背景指示剂层生成纯净的反射光光源滤光片接收器,23,透射与反射,低浓度,高浓度,透射与反射低浓度高浓度,24,湿化学：,采用透射光度法,遵循朗勃比尔定律,干化学：,采用反射光度法,遵循,Williams Clapper,定律,吸光度,浓度,反射光,浓度,透射与反射,湿化学：吸光度浓度反射光浓度透射与反射,25,干化学技术简介课件,26,湿化学：,仪器相对开放，试剂选购方便,但是质量控制是隐患,由使用者监控仪器状态和结果的可信度,频繁的日常仪器校验，繁琐且工作量大,干化学：,仪器相对封闭，采用固定的试剂及耗材来保证结果,长期稳定的定标曲线，大大减少了日常工作量,干化学与湿化学比较,湿化学：干化学与湿化学比较,27,电极法干片,离子选择电极技术,直接法测定两电极间电势不同,K、Na、Cl,电极法干片离子选择电极技术,28,干化学技术简介课件,29,干片在接触点被穿透,测量电压读数,通过电压读数计算出分析物的浓度,电极法干片,测量技术,干片在接触点被穿透电极法干片测量技术,30,盐桥,S2,S1,S3,S4,a,I,a,r,离子载体膜,M+Cl,AgCl,Ag,离子载体膜,M+Cl,AgCl,Ag,a,I,a,r,V,V,干片,常规,已知浓度液体(参比液),待测液体(标本),离子选择电极(,ISE),盐桥,a,r,盐桥S2S1S3S4aIar离子载体膜M+ClAgCl,31,VITROS,干化学检测电解质与常规方法比较,常规法（间接法）,干片法（直接法）,电极与电极膜重复使用 稳定性差 独立电极/测试,单一采样针、进样通道 交叉污染 一次性,Tip,头,大量蠕动泵、电磁阀 维修保养复杂 无,众多管道、多种液体 易腐蚀、老化 无管道,频繁定标与冲洗保养 耗时、不环保 定标周期长、环保,电解质排斥效应 有 没有,VITROS干化学检测电解质与常规方法比较常规法（间接法）,32,ISE,间接法电解质排斥效应,标本10微升，非水相5，水相9.5微升,稀释100倍，加入稀释液990微升，水相999.5微升,实际稀释倍数999.59.5105.211,如果标本中含,K 3.50 mmol/L;Na 140 mmol/L,间接法实测值为：3.50105.2111003.33,mmol/L,140105.211100133.0 mmol/L,直接法没有电解质排斥效应,ISE间接法电解质排斥效应标本10微升，非水相5，水相9.,33,一次性电极,没有基质效应,没有电解质排斥效应,没有繁琐的日长保养,性能优势,一次性电极性能优势,34,免疫速率,法干片,竞争性与非竞争性免疫速率反应模式,需要液体反应底物,地高辛、苯妥因、苯巴比妥、,CRP、,卡马西平,免疫速率法干片,35,免疫速率,法干片,酶,抗体,酶标抗原,胶乳试剂,扩散层,受体层,胶乳层,聚酯支持层,免疫速率法干片酶抗体酶标抗原胶乳试剂扩散层,36,酶标抗原,抗体,胶乳试剂,病人标本,免疫速率,法干片,酶标抗原抗体胶乳试剂病人标本免疫速率法干片,37,胶乳试剂,免疫速率,法干片,酶标抗原,标本中抗原,抗体,胶乳试剂免疫速率法干片酶标抗原 抗体,38,免疫速率,法干片,竞争法结合,结合抗原+游离抗原,免疫速率法干片结合抗原+游离抗原,39,免疫速率,法干片,加入液体反应底物洗去未结合物质,免疫速率法干片,40,免疫速率,法干片,竞争法结果,高浓度 低浓度,免疫速率法干片 高浓度 低浓度,41,VITROS,干化学技术在,抗干扰方面,具有突出优势,VITROS 干化学技术在,42,去除干扰的干片原理,I,扩散层 表面活性剂,试剂层 钙螯合剂,指示剂层,缓冲液 蜡染料衍生物,支持层,清道夫层,使用氧化酶或特异性结合物去除干扰物,以,镁离子干片,为例,Mg,+2,+Ca,+2,Mg,+2,+Ca,+2,螯合剂 复合物,Mg,+2,+,甲蜡染料衍生物,Mg,+2,染料复合物,去除干扰的干片原理 I扩散层 表面活性剂指示剂,43,去除干扰的干片原理,II,选择性半透膜,增强结果特异性；去除干扰物,以,尿素氮干片,为例,NH,3,+,氨指示剂 呈色,扩散层,半透膜,指示剂层,氨指示剂,支持层,试剂层,尿素酶 缓冲液,pH7.8,H,2,NCONH,2,+H,2,O 2NH,3,+CO,2,去除干扰的干片原理 II选择性半透膜NH3 +氨指示剂,44,多层涂膜干片技术,优异的抗干扰能力,稳定的定标曲线,所有元素尽在其中,VITROS,干化学技术特点,多层涂膜干片技术VITROS 干化学技术特点,45,干化学技术简介课件,46,