单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,1.5 基因工程复习课,专题1,基因工程,同份非任丘若超橱垛沁芜辗兼监颊狂季抵暖逛轴忌姚融贞琼蔷炸氟剿厨钉15基因工程复习课15基因工程复习课,1.5 基因工程复习课专题1 基因工程同份非任丘若超橱垛沁芜,1,一、基因工程的概念,。,二、基因工程的基本工具,1.“分子手术刀”,（1）来源：主要是从,中分离纯化出来的。（2）功能：使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的,键断开.（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：,和,.,2.“分子缝合针”,。与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将,加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接,的末端，形成磷酸二酯键。,限制性内切酶,原核生物,磷酸二酯,黏性末端,平末端,DNA连接酶,单个核苷酸,两个DNA片段,自主检测,妈情盅竣买帅叫痉碘陀种骸咖控徐趣幕肢蔑扇孔俱闰歪仟计奋臭米况奠篙15基因工程复习课15基因工程复习课,一、基因工程的概念,2,3.“分子运输车”,。,（1）载体具备的条件：,。,。,。,（2）最常用的载体是,它是一种裸露的、结构简单的、独立于,，并具有,的双链,DNA分子。,（3）其它载体：,。,三、基因工程的基本操作程序,第一步：,。,1.目的基因是指：,。,2.人工合成目的基因常用方法有,和,。,载体,能在受体细胞中复制并稳定保存,具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入,具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择,质粒,细菌染色体DNA之外,自我复制能力,环状,噬菌体的衍生物、动植物病毒,目的基因的获取,编码蛋白质的结构基因,反转录法,化学合成,恨痞鸥渭簿蹬钢啃解扳玫殷辅肾骆回俱蔓监犊舰襟冕索敷粕闲钉朽阉锐丫15基因工程复习课15基因工程复习课,3.“分子运输车”。载体能在受体细胞,3,第二步：,。,1.组成：,。,（1）启动子：是一段有特殊结构的,，位于基因的,，是,识别和结合的部位，能驱动基因转录出,，最终获得所需的,。,（2）终止子：也是一段有特殊结构的,，位于基因的,。,（3）标记基因：是为了鉴定受体细胞中是否含有,，从而将,筛选出来。常用的标记基因是,。,基因表达载体的构建,目的基因,启动子,终止子,标记基因,DNA片段,首端,RNA聚合酶,mRNA,蛋白质,DNA片段,尾端,目的基因,含目的基因的细胞,抗生素基因,第三步：,。,1.转化的概念：,.,。,将目的基因导入受体细胞,是目的基因进入受体细胞内，并且在受体,细胞内维持稳定和表达的过程,2.常用的转化方法：,罢靶瓷忿培就尹垦夸套厄像迫遁雁涛叮吟时需琐荧夺讹豢馋岛弹伟蔗辉酗15基因工程复习课15基因工程复习课,第二步：。,4,将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是,。,农杆菌特点，易感染,植物和裸子植物，而对大多数,植物没有感染力；,将目的基因导入动物细胞：最常用的方法,。此方法的受体细胞多是,。,第四步：,。,1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入,，方法是采用,。,2.其次还要检测目的基因是否转录出了,，方法是采用,。,3.最后检测,，方法是从转基因生物中提取,，用相应的,进行,。,4.有时还需进行,的鉴定。,农杆菌转化法,单子叶,双子叶,显微注射技术,受精卵,目的基因的检测和表达,目的基因,DNA分子杂交技术,mRNA,用标记的目的基因作探针与mRNA杂交,目的基因是否翻译成蛋白质,蛋白质,抗体,抗原抗体杂交,个体生物学水平,最硷赐业扎痈总舔壕拘孰决鱼断宫卯偿祷坷添嘛安旷丢篓龙肪凡钠秩悸诅15基因工程复习课15基因工程复习课,将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是,5,磷酸二酯键,找绅火籍骆肺鳞齐赣糜卓租址暗屋励宏蓄桓氮艘左博厉者非寐醋碰应勋快15基因工程复习课15基因工程复习课,磷酸二酯键找绅火籍骆肺鳞齐赣糜卓租址暗屋励宏蓄桓氮艘左博厉者,6,作用部位：_,磷酸二酯键,B.DNA连接酶,几膏绣您滥阉溅黍雪哗隆瘤实幻鲸鹤挡软益创抖矮倪雇耿规鸭骄薪柏镰强15基因工程复习课15基因工程复习课,作用部位：_磷酸二酯键 B.DNA连接酶几,7,特点：_。,作用：能切断外来的_。,DNA,(两个“特定”）,作用部位：_,（3）主干知识,磷酸二酯键,特异性,A.限制性内切酶,称幽俄候鹅景资铸孕纤啦凶牟务薯角须骇讳层栈逊斋侵撩思悔王冉饮睬噶15基因工程复习课15基因工程复习课,特点：_。作用：能切断外来的_,8,点拨:,黏性末端,黏性末端,EcoR,茵睛赘淖潘吞寂榜帝呕枚火坞舰哇姓比股蓑愁惧挞伤获爹洲剔盂判徊招仰15基因工程复习课15基因工程复习课,点拨:黏性末端黏性末端EcoR茵睛赘淖潘吞寂榜帝呕枚火坞舰,9,2.,运载体,：常用,质粒,质粒特点：,1、细菌染色体外很小的双链环状DNA分子,2、能自我复制并在受体细胞中稳定存在,3、有一个或多个限制酶切点,4、有特殊的遗传标记基因,注意：真正用作运载体的质粒都是人工改造过的。,点拨:,刹栗底痘陪砧暮妇奈异石雅袍颖契羽屿渴迸陶梧储汰春积怂嗓何饯狙塔誊15基因工程复习课15基因工程复习课,2.运载体：常用质粒1、细菌染色体外很小的双链环状DNA分子,10,（,4）易错点提醒,运载体,不是酶。,限制性内切酶和DNA连接酶的作用部位都是,磷酸二酯键,。,DNA分子中氢键的形成,不需要酶,的催化。,数量关系：限制酶切线性DNA一个切口，可得,2个,DNA片段；切环状DNA一个切口，可得,1,个DNA片段.,垂集买专拽斩袄傀组盗乙勿鸭爸托危舍肮鲸澳爱午精纪寓溶案伦锰及疑就15基因工程复习课15基因工程复习课,（4）易错点提醒运载体不是酶。垂集买专拽斩袄傀组盗乙勿鸭爸,11,目的基因与运载体结合需要的工具酶：,_,。,B.目的基因与运载体结合,目的基因与运载体结合的结果可能有：,_,。,同种限制性内切酶和DNA连接酶,目的基因与目的基因结合；质粒与质粒结合；目的基因与质粒结合,瑰障匹庚框酱荤绿珊员什协毯趴痈邻碰按芯征砍主济赢屋憨腰害造匣聂喘15基因工程复习课15基因工程复习课,目的基因与运载体结合需要的工具酶：B.目的基因与运载体结合,12,（4）易错点提醒,分子水平:,检测,基因是否导入了细胞,DNA分子杂交,；,检测,基因是否转录出了mRNA,用基因探针与mRNA杂交,；,检测,基因是否表达出蛋白质,提取蛋白质，用抗体与抗原特异性结合。,个体水平:,如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。,A.检测方法:,B.基因工程步骤中，只有,第一、二、四步,发生,碱基互补配对,。,龄逝头删浸咸辊欣科品卓沃牲饥霓老错秘滔佬苞务鹅小咨荧捡订吱丸折相15基因工程复习课15基因工程复习课,（4）易错点提醒分子水平:A.检测方法:B.基因工程步,13,A.基因诊断的原理：_,DNA分子杂交,（3）主干知识点,B.基因治疗的原理：,把_导入有_的细胞中，达到治疗疾病的目的,。,正常的外源基因,基因缺陷,蔷厩赖若爪梗泅鲤导抱谓斗逝绍无婆定或燎情选倒森磨缩容卿院惮停渠悼15基因工程复习课15基因工程复习课,A.基因诊断的原理：_DNA分子杂,14,（4）易错点提醒,若,受精卵,时进行基因治疗，则个体中,每个细胞都含有正常基因,。若对患者,局部,进行基因治疗，则,只有该部位有正常基因,。,基因治疗不能使,缺陷基因改变为正常基因,。,DNA黏性末端黏合，,不属于DNA分子杂交,。,蔑倚扔厘坦圭拂扔迂竹摈鲜盯途收凤异坞骸廉皿绽冒车拇二被恢比沮些伯15基因工程复习课15基因工程复习课,（4）易错点提醒若受精卵时进行基因治疗，则个体中每个细胞都,15,如下图所示，两个核酸片段在适宜的条件下，经X酶的催化作用，发生下述变化，则X酶是（）,ADNA连接酶,BRNA聚合酶,CDNA聚合酶,D限制酶,A,例题1,荐强浆肾乡间巍缅仔抒原芭干昔务呢匣潦宁惦锯压甄邢肿防限票哟歹捐跌15基因工程复习课15基因工程复习课,如下图所示，两个核酸片段在适宜的条件下，经X酶的催化作用，发,16,采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是(),A.人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍,B.在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中,C.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵,D.人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA,C,肤勘索渴弯奋九浚鞠畅士觉碳稚戚限仔吃痰甭园渝绝成闸仕矢邱盼屡整营15基因工程复习课15基因工程复习课,采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育,17,继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生,物反应器的研究也取得了一定进展。最近科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答下列问题：,（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是,。,（2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入,.,中，原因,.,。,（3）通常采用,技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。,（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的,.,细胞中特异表达。,（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的,转入,细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为,。,显微注射法,受精卵（或早期胚胎）,DNA分子杂交（核酸探针,）,去核的卵,膀胱上皮,细胞核,核移植（或克隆）,受精卵（或早期胚胎细胞）具有全能性，可使外源基因在,相应组织细胞表达,骆而湃明仍鳖习琵钮悲艘株寅锡考毛训誊投匹茄桔宦缆尹雍金带吓沧恃趴15基因工程复习课15基因工程复习课,继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生显微注射法受精,18,（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的,处，DNA连接酶作用于,处。（填“a”或“b”）,（2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和,法。,为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。,a,a,基因枪法（花粉管通道法）,缠子留航谬漂防男魄辞蓝晓措伊洱咖祝坡撅札套狭机问诱备拉灶叠罗宾敌15基因工程复习课15基因工程复习课,（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作,19,（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用的技术是,，该技术的核心是,。,（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的,作探针进行分子杂交检测，又要用,方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。,植物组织培养,脱分化（去分化）和再分化,耐盐基因（目的基因）,一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中,）,为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。,俏矾萎典矛祟辽贪比沦窄曙存改抗侦梁坞呜舒谰位俩夸患熔掠铺辛保砧蕉15基因工程复习课15基因工程复习课,（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用的技术是植物,20,科学家从预期人的生长激素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了双链DNA片段，获得双链DNA。将人的生长激素基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。已知限制酶的识别序列和切点是GGATCC，限制酶的识别序列和切点是GATC,据图回答：,(1)建构基因表达载体时，必须有_、目的基因、终止子以及_。,（2）为精确获取图中的目的基因，所用的限制酶是_。,启动子,标记基因,限制酶和限制酶,例题分析,蛮静铬坛俩默街是炔兰触闯猜曼要捎残锡纹驹市页蹿皮适掘傍溉询雕伶剂15基因工程复习课15基因工程复习课,科学家从预期人的生长激素的功能出发，推测相应的脱氧核苷,21,(3)将基因表达载体导入细菌B之前，要将细菌B放入一定浓度的_溶液中处理，使之成为感受态的细菌。人的基因之所以能与