单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,幽门螺杆菌检测,幽门螺杆菌检测,1,讲课内容,第一节,幽门螺杆菌特点,第二节,幽门螺杆菌感染的检测方法,第三节,幽门螺杆菌检测方法的临床应用,1,2,3,讲课内容第一节 幽门螺杆菌特点 1,2,第一节 幽门螺杆菌特点,幽门螺杆菌（,Helicobacter pylori,简称,HP,），呈弧形或,S,形，有,12,个微小弯曲，属,微需氧菌,，,在,pH,值为,68,时繁殖,最为活跃，该菌具有丰富的,尿素酶,，可分解食物中的尿素产生氨，该菌生长于胃粘液深层，胃粘膜表面，多在胃窦部以胃小凹、上皮皱褶的内折及腺腔内为多。,第一节 幽门螺杆菌特点 幽门螺杆菌（Helicobac,3,H.Pylori,感染和十二指肠溃疡,H.Pylori,感染,D/G,细胞功能改变遗传易感性,壁细胞总体增加,B,型慢性胃窦炎 胃泌素 胃酸分泌量,H.Pylori,的迁移十二指肠粘膜胃上皮化生,十二指肠球炎,十二指肠球溃疡,H.Pylori感染和十二指肠溃疡H.Pylori感染,4,H.Pylori,感染和胃癌的关系,浅表性胃炎,正常胃粘膜基因损伤,H.Pylori,感染弥漫性胃癌,萎缩性胃炎,环境因素胃粘膜肠上皮化生 高,CagA+-HP,滴度,宿主因素 的,H.pylori,菌株感染,肠型早期胃癌进展期胃癌,H.Pylori感染和胃癌的关系浅表性胃炎,5,3.HP,的毒力作用,取决于,定植能力,菌株的基因型,细菌的圆球体样型态,对抗菌药物的敏感性,3.HP的毒力作用取决于,6,第二节 幽门螺杆菌感染的检测,侵入性检测方法,非侵入性,检测方法,快速尿素酶试验,病理切片染色,培养,黏膜涂片革兰氏染色,基因方法,:PCR,等,13,C-,或,14,C-,尿素呼气试验,Hp,粪便抗原试验,Hp,血清抗体试验,第二节 幽门螺杆菌感染的检测侵入性检测方法非侵入性检测方法快,7,试验原理,HP,能产生丰富尿素酶，将尿素分解、产生,2,个分子的氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色。,操作过程,活检同时取,2,块组织进行检测（胃窦和胃体各,1,块），标本放置于试剂后观察颜色变化。,注意事项,检测结果受试剂,pH,值、取材部位、组织大小、细菌量、观察时间、环境温度等因素影响,（一）快速尿素酶试验,RUT,一,、创伤性检查,试验原理HP能产生丰富尿素酶，将尿素分解、产生2个分子的氨，,8,胃镜检查胃黏膜取材,直接涂片革兰氏染色，也可包埋切片，常规,HE,染色或银染，直接镜检观察,Hp,。,直接镜检,（二）组织学检查,1.,免疫组化染色特异性高。,2.HE,染色可同时作病理诊断；,3.,荧光原位杂交（,FISH,）具有较高敏感性,胃镜检查胃黏膜取材,直接涂片革兰氏染色，也可包埋切片，,9,1.,在胃镜取胃粘膜放在转运培养基中。,2.,接种于,Hp,牛脑浸液培养基，分区划线。,3.,置,5-12,CO2,培养箱,35-37,，,3-5d,形成小的半透明灰色菌落，有微弱的溶血环。,培养过程,诊断,Hp,最可靠的方法，可作为验证其他诊断性试验的“金标准”。,一般用于药敏试验和科研。,（三）细菌培养,1.在胃镜取胃粘膜放在转运培养基中。培养过程诊断Hp最可靠的,10,幽门螺杆菌的尿素酶,(A,、,B,、,C,、,D),基因、,16S-rDNA,基因、,VacA,及,CagA,基因均已克隆成功，根据幽门螺杆菌不同的耙基因，设计不同的引物，从而建立不同的,PCR,系统，扩增产物可经凝胶电泳分析,.,原理与方法,（四）聚合酶链反应试验,(PCR,检测技术,),1.,与细菌培养和组织学染色镜检比较无明显优越性。,2.,现在可收集胃液,PCR,检测幽门螺杆菌敏感性高，但可能与口腔和胃内其它尿素酶阳性菌丛起交叉反应,幽门螺杆菌的尿素酶(A、B、C、D)基因、16S-rDN,11,教学过程：,销售经理会管理好销售人员的销售进度,一看，二闻，三摸摸，颜色不对，气味不正，出现霉点，食物软化，立刻丢掉不为错。,_,使学生知道课间活动守秩序应该怎样做。,（2）说说你在出行中，看到人们是怎样遵守交通法规的？,1客户意向级别的设定,询问接待员对某应聘者的印象，他们的意见有助于你对应聘者的性格及是否适合该工作做出全面的评价。,出差：是否要求定期长时间出差。,学生汇报研究结果，师总结板书。,1.1.8考虑岗位现状,注：,HP,的基因分型（,HP,菌属亚群）及致病性,分布比例,VacA,基因,CacA,基因,致病性,型,56%,+,+,胃炎、十二指肠溃疡、胃癌,型,16%,-,-,胃炎,中间表达型,28%,+/-,+/-,VacA,基因表达空泡毒素,87KD,CagA,基因表达细胞毒素相关蛋白,128KD,CagA,基因仅出现于,VacA,产生细胞毒效应时,，,是,VacA,产生效果的标志,教学过程：注：HP的基因分型（HP菌属亚群）及致病性分布比,12,原理和过程,HP,能产生丰富尿素酶，能分解胃中的尿素，当,整粒,摄入含同位素碳,-13,的尿素胶囊后，碳,-13,尿素在尿素酶作用下，分解为氨和碳,-13,二氧化碳，碳,-13,二氧化碳被小肠上段吸收后，进入血循环，并随呼气排出，分析呼气中的碳,-13,就可诊断该细菌的存在,特点和注意事项,1.,易于操作；可反映全胃,Hp,感染状况。,2.,检测前一个周内应停用抗生素、铋剂、质子泵抑制剂等药。,3.,孕妇、哺乳期妇女及儿童不宜做。,（一）,13C-,或,14C-,尿素呼气试验,二、非创伤性检查,原理和过程HP能产生丰富尿素酶，能分解胃中的尿素，当整粒摄入,13,多采用,ELISA,双抗体夹心法，或胶体金试条法。留取晨粪便，用稀释液稀释，再加入试条或微孔板检测。,原理与方法,（二）幽门螺杆菌粪便抗原检测,1.,粪便抗原检测灵敏度高、准确性好，,HP,死亡但抗原成分仍保留下来，故在治疗前后都可用。,2.,适用于所有年龄和类型的患者（,儿童,）。,多采用ELISA双抗体夹心法，或胶体金试条法。留取晨粪便,14,多采用,ELISA,双抗原夹心法，或胶体金试条法。可快速检测人血清、血浆或全血中幽门螺杆菌抗体。,原理与方法,（三）幽门螺杆菌血清抗体检测,1.,检测的抗体是,IgG,，反映一段时间内,Hp,感染情况，部分试剂盒可同时检测,CagA,和,VacA,抗体。,2.,主要适用于流行病学调查。,多采用ELISA双抗原夹心法，或胶体金试条法。可快速检测,15,5.学生要听从教师指导，学会正确的运动技术和自我保护。,甘油能与乙醇或水相混溶，不能与氯仿、乙醚及脂肪油相混溶，溶解范围虽然不及水和乙醇，但仍为一种良好溶剂。可溶解碱、大多数的盐类、鞣质等成分，也能溶解树胶、可溶性碳水化合物、淀粉等无效物质。甘油黏度大，很少直接用于浸提药材，将甘油加于最初的少量溶剂中（水或醇）可增加鞣质的浸出稳定性。,（2）学生必须遵守课堂常规，按时上课，听从指挥、不迟到早退。,1.学校网络管理中心必须认真执行中华人民共和国信息系统安全保护条例。,2经营的食品必须索证。,5.谈判、评审程序和成交标准,为了提高中药疗效，拓宽给药途径，使中药得到国际市场的广泛认可，中药生产正兴起剂型创新的热潮，现在出现了颗粒剂、片剂、注射剂、气雾剂、滴剂、膜剂等，这些新剂型的共同要求都需要把中药材中的有效成分分离出来，除去药渣，得到浸出的浓溶液或有效成分的浸出物或有效成分的精制品，才能制成投药途径方便、灵活，疗效好的新剂型。中药提取物制备中成药是中药工业现代化、中药剂型现代化的重要内容之一。,七、消防安全管理人应该报当地公安消防科室备案。,由于溶液中溶质的存在，在蒸发浓缩过程中溶液浓度会升高，黏度增大，导致溶液沸点的升。,2未成交供应商谈判保证金在成交通知书发出后五个工作日内全额无息退还；成交供应商的谈判保证金将在合同签订生效并按规定交纳了履约保证金后五个工作日内全额无息退还。,雾化器结构安装：对旋转式雾化器运转时要防止振动。,抗蛇毒血清治疗：又名蛇毒抗毒素，有单价多价两种。特异性高，效果确切，应用越早，疗效越好。,1、一旦触电，应立即关闭总开关，截断电源。,与应聘者握手可以感受他们的心态。如果应聘者轻松自在，他们的手暖而干；紧张的应聘者手凉而有汗。,2、外出就餐要注意哪些卫生安全？,如果想在这一阶段对应聘者的材料进行核实，需要准备好询问证明人的问题，譬如应聘者安排工作进度及按时完成工作的能力如何？首先需要核实最近的工作经历。询问证明人认识应聘者多久了，了解他们哪些方面的能力？还需要与证明人联系核实书面证明内容光焕发，详细了解应聘者的优缺点。询问证明人应聘者的业余兴趣什么？应聘者说“慈善工作”具体包括哪些内容？应聘者是否真的有时间投入，投入时间多少？,常见的煤气中毒原因:1、在密闭居室中使用煤炉取暖、做饭，由于通风不良，供氧不充分，可产生大量一氧化碳积蓄在室内。包括门窗紧闭，又无通风措施，未安装或不正确安装风斗，疏忽大意，思想麻痹，致使煤气大量溢出；气压低，煤气难以流通排出。2、城市居民使用管道煤气，如果管道漏气，开关不紧，均可使煤气大量溢出，造成中毒。3、使用燃气热水器，通风不良，洗浴时间过长。4、冬季在车内发动汽车或开动车内空调后在车内睡眠，都可能引起煤气中毒。,第一个，员工每天根据什么卖车；,一个公司的老总来到某专营店，他想给主管销售的副总配一辆车。他看了一款车后觉得很不错，价格方面也没问题。这时销售人员说：“既然你都满意了，那我们就可以办手续了。”,一、教学目标：,别人的意见总能为你的决策提供有价值的参考。如你的某位同事面试过某应聘者，尽快与其交换看法，讨论有分歧的意见。如果你是唯一的面试者，可以征求与该应聘者有一面之交的同事的意见。另外前台的接待人员对应聘者的印象也有参考价值。应聘者是否礼貌、镇静，还是手足无措，神情紧张？将前台接待人员对应聘者的印象与你对他们的印象放在一起，就可以得到对应聘者比较全面的评价。,小提示76：告诉应聘者，你还有许多其他的人要面试。,第三节 幽门螺杆菌检测方法的临床应用,5.学生要听从教师指导，学会正确的运动技术和自我保护。抗蛇毒,16,