单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,克隆是英文,clone,或,cloning,的音译，而英文,clone,则起源于希腊文,Klone,，原意是指以幼苗或嫩枝插条，以无性繁殖或营养繁殖的方式培育植物，如扦插和嫁接。,一、多利羊风暴,1997,2,27,Nature,（,385,：,810,813,）英国爱丁堡罗斯林研究所 伊恩,威尔穆特小组：,1996.7,多利羊,出生,1996.11,收到文章,1997.2,文章发表,一条科学成就的宣布，,在全世界范围内,，在短短,几十天,左右时间，从,学术界到经济界、政界,引起巨大而深刻的反响，,是空前的,。“,克隆,”一词也顿时变得妇孺皆知。,多利羊之父,威尔穆特,多 利 羊 成 为 明 星,多利和它的孩子,克隆的过程 1,1.,从一只,6,岁,芬兰,多塞特白面母绵羊,（姑且称为,A,）的乳腺中取出,乳腺细胞，将其放入低,浓度的营养培养液中，,细胞逐渐停止分裂，,此细胞称之为“供体细,胞”；,克隆的过程 2,从一头苏格兰黑面母绵羊（,B,）,的卵巢中取出未受精的卵细胞，,并立即将细胞核除去，,留下一个无核的卵细胞，,此细胞称之为“受体细胞”；,克隆羊的过程 3,3.,利用电脉冲方法，使供体细胞和受体细胞融合，最后形成“融合细胞”。,电脉冲可以产生类似于自然,受精过程中的一系列反应，,使融合细胞也能像受精卵,一样进行细胞分裂、分化，,从而形成“胚胎细胞”；,克隆的过程 4,4.,将胚胎细胞转移到另一只,苏格兰黑面母绵羊（,C,）的,子宫内，胚胎细,胞进一步分化和,发育，最后形成,小绵羊,-,多莉。,专业版实验过程,实 验 过 程,细胞核受体,Scottish Blackface ewe,细胞核供体,注射促性腺激素释放激素,经 28-33 h,排卵,Doll dorset,BlackWlesh,Finn Dorset ewe,ewe,Mountain,9天胚 26天胎羊 6岁母羊孕期,最后三个月,胚细胞 胎羊细胞 乳腺细胞,培养于0.5%胎牛血清培养基中，,使从生长周期中出来停顿于G,0,。,3436 h,取出核,分别进行,培养在羊输卵管上 6 天，分裂成长至桑椹期或囊胚期,细胞融合,移入假母（苏格兰黑脸母羊）子宫,13 胚/头假母,5060天，超声检查，21头胎羊，以后每 14天查一次。,最后产出八头小羊分属三个核供体来源。,胎羊丢失率：62%（13头）,以形态特征，DNA microsatellite analysis,产出小羊均显示供体羊特征,2,、实验成功的关键，血清饥饿,使细胞核和去核卵细胞处于细胞周 期中相匹配的阶段。,使结合在基因（,DNA,）上的调控 蛋白脱落下来。,重新编程（,repreogram,remodel,）,四、多利羊实验的理论意义和实 践意义,1、理论意义,证实,分化成熟的动物,细胞核,仍具全能性。,证实,细胞质,对胚胎发育分化的决定性。,2,、实践意义,蛋白质多肽类药物,(,胰岛素、凝血因子、干扰素、生长因子,),1998,年产,76,亿美元,2000,年产,185,亿美元,