,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2019/11/6,#,单击此处编辑母版标题样式,EGFR,基因,靶向治疗,EGFR基因靶向治疗,1,主要内容,一、,EGFR,蛋白的正常结构与功能,二、,EGFR,在肿瘤中的变异,三、针对,EGFR,进行肿瘤靶向治疗的的药物,四、,EGFR,靶向治疗当中产生的耐药问题,五、检测,EGFR,基因变异的临床诊断,主要内容一、EGFR蛋白的正常结构与功能二、EGFR在肿瘤中,2,一,、,EGFR,蛋白,的正常结构与,功能,表皮生长因子受体（,Epidermal growth factor receptor,），简称为,EGFR,、,ErbB-1,或,HER1,。是,ErbB,受体家族家族的成员之一。,erbB,家族为受体酪氨酸激酶，是一类具有跨膜结构的酶蛋白，包括,HER1/EGFR/erbB-1,、,HER2/erbB-2,、,HER3/erbB-3,、,HER4/erbB-4,四个成员。,由于,EGFR,的酪氨酸激酶活性，可以调节细胞的生长、增殖，分化，迁移，并且与肿瘤的发生有关。,一、EGFR蛋白的正常结构与功能表皮生长因子受体（Epide,3,EGFR,是一种跨膜蛋白，由三个部分组成：,细胞外结构域：是配体的结合位点；,单次跨膜的疏水,螺旋区；,细胞质部分：有自磷酸化位点、和酪氨酸蛋白激酶,(RTK),活性结构域。,EGFR是一种跨膜蛋白，由三个部分组成：,4,受体激活：,当,EGF,同受体细胞外结构域结合位点结合后，受体被激活，导致两个,EGF,受体单体形成二聚体，使酪氨酸自我磷酸化，激活细胞质部分的酪氨酸激酶。,基因靶向治疗课件,5,配体：,表皮生长因子,(EGF),、,转化生长因子,(TGF),、,双向调节蛋白,(AR),、,-,细胞素,(BTC),、,肝素结合,EGF,样生长因 子,(HB-EGF),、,表皮调节素,(EPR),等。,配体：,6,信号通路激活：,二聚体自磷酸化之后酪氨酸激酶活性增强，下游信号通路的蛋白质可与,EGFR,上磷酸化的酪氨酸位点结合，分别引起细胞内不同的信号应答，从而引起一系列生物效应，调节细胞的生长、增殖，分化，迁移，与肿瘤的发生。,主要激活的信号通路有：,JAK/STAT,、,PI3K/AKT,、,RAS,信号通路。,信号通路激活：,7,基因靶向治疗课件,8,EGFR,失活：,膜表面没有与配体结合的,EGFR,单体，可被内吞至细胞内部，被内吞的,EGFR,一部分被细胞降解，一部分重新回到细胞膜上。细胞膜上,EGFR,的半衰期为,30,分钟。,EGFR失活：,9,二,、,EGFR,在,肿瘤中的,变异,二、EGFR在肿瘤中的变异,10,EGFR,在肿瘤细胞中的变异：,数量变异,结构变异,EGFR在肿瘤细胞中的变异：,11,数量变异：,正常情况下，一个细胞上会有,4,*,10 41,*,10 5,个,EGFR,分子,。,肿瘤细胞中，可观察到每个细胞有,2,*,10,6,个,EGFR,分子。,在许多肿瘤细胞中，都有,EGFR,异常高表达现象。,当细胞膜上有高浓度,的,EGFR,单体,时，,EFGR,分子可在没有配体的情况下自行聚合形成二聚体，并且二聚体可自我激活，激活下游的信号通路。,数量变异：,12,基因变异：,EFGR,基因位于第七号染色体的短臂上。,EGFR,的酪氨酸激酶活性位点，主要是位于第,18,号外显子到第,24,号外显子之间。,此区域的突变会影响,EGFR,的酪氨酸激酶活性。,基因变异：,13,基因变异：,45%,是第,19,号外显子缺失变异；,40%,是发生在第,21,号外显子上的,L858R,变异（第,858,号氨基酸残基由亮氨酸变成了精氨酸）；,变异的,EGFR,不需要与配体结合就拥有了持续的酪氨酸酶活性。,基因变异：,14,三、,针对,EGFR,进行,肿瘤靶向治疗的的,药物,特异性针对肿瘤细胞进行靶向治疗，可以从分子水平逆转肿瘤细胞的恶性生物学行为。靶向治疗具有靶向性强、特异性高和毒副作用低等特点，并能增强放、化疗疗效，代表着肿瘤治疗领域的最新发展方向。,单克隆抗体,(Mab),：,西妥昔单抗、帕尼单抗、尼妥珠单抗。,酪氨酸激酶抑制剂（,TKI,）：,吉非替尼、厄洛替尼、埃克替尼；阿法替尼；塔格瑞斯。,副作用：,皮疹、瘙痒、腹泻、肠道溃疡。,三、针对EGFR进行肿瘤靶向治疗的的药物特异性针对肿瘤细胞进,15,单克隆抗体：,抗体可特异性地识别,EFGR,，阻断了配体与,EGFR,的结合，从而阻断了配体对,EGFR,的激活作用，抑制了,EGFR,的酪氨酸激酶活性。,同时还可促进,EGFR,的内吞机制，减少膜表面的,EGFR,数量。,对野生型、变异型,EGFR,均有效。,单克隆抗体：,16,西妥昔单抗（,Cetuximab,，商品名爱必妥、尔必得舒、艾比特思）。,是第一个,FDA,批准抗,EGFR,的单抗药。,由德国默克里昂公司出品。,是一种人,/,鼠嵌合单克隆抗体。,可用于治疗转移型结肠直肠癌和头颈部肿瘤。,西妥昔单抗（Cetuximab，商品名爱必妥、尔必得舒、艾比,17,帕尼单抗,（,Panitumumab,，商品名,Vectibix,）,是第一个完全人源化单克隆抗体,与,EGFR,具有高亲和性，用于治疗化疗失败后转移性结直肠癌。,尼妥珠单抗,（,Nimotuzomab,，商品名泰欣生）,是我国第一个用于治疗恶性肿瘤的功能性单抗药物，用于与放疗联合治疗,EGFR),表达阳性的,III/IV,期鼻咽癌。,帕尼单抗（Panitumumab，商品名Vectibix）,18,酪氨酸激酶抑制剂,TKI,：,TKI,与,ATP,竞争,EGFR,的酪氨酸酶活性中心，阻止酪氨酸激酶活性的激活，从而抑制,EGFR,对下游信号通路的激活作用。,酪氨酸激酶抑制剂TKI：,19,易瑞沙（,Iressa,，通用名,Gefitinib,）,EGFR,的可逆抑制剂，用于治疗晚期非小细胞肺癌，尤其化疗失败后的非小细胞肺腺癌。,阿斯利康公司易瑞沙,/,印度易瑞沙,第一代,TKI,类药物对,19,号外显子缺失变异和,L858R,变异（第,858,号氨基酸残基由亮氨酸变成了精氨酸）的,EGFR,疗效更为显著。,基因靶向治疗课件,20,基因靶向治疗课件,21,塔格瑞斯,（,Tagrisso,）,由,FDA2015,年,11,月批准上市的第三代,TKI,类靶向药物。,由阿斯利康研发。,对于有,T790M,耐药突变的,EGFR,有很强的抑制作用。,塔格瑞斯（Tagrisso）,22,四、,EGFR,靶,向治疗当中产生的耐药问题,第一代,TKI,类药物用药,4-6,个月后会出现耐药突变。耐药并非单一因素且机制之间也存在交叉，错综复杂：,1,、,EGFR,基因突变或靶点缺失,：,T790M,2,、绕开,EGFR,通路的其他,TK,受体的活化,3,、胞内,EGFR,下游信号蛋白非依赖性或组成性活,化：,Kras,、,PI3K,、,Src,4,、肿瘤诱导的非依赖于,EGFR,的血管生成：,VEGF,的过度表达,5,、膜表面的,EGFR,内吞降解过程异常,四、EGFR靶向治疗当中产生的耐药问题第一代TKI类药物用药,23,T790M,变异：,T790M,突变是导致,TKI,耐药主要因素。,EGFR,基因第,790,号氨基酸残基由苏氨酸变成体积庞大的甲硫氨酸，造成了位阻效应，导致,TKI,类药物无法靠近酪氨酸激酶活性中心；,T790M,突变还增加了,EGFR-L858R,突变体与,ATP,的亲和力，而产生对,TKI,的获得性耐药,与,T790M,相似的耐药突变还有,D761Y,、,L747S,和,T854A,。,争议：,T790M,是“获得性”还是“选择性”？,T790M变异：,24,其他,TK,受体的活化：,细胞内存在许多转导增殖刺激的,TK,受体,，,它们都参与调节细胞的许多生理功能，并且许多调节作用存在相互交叉,。细胞从环境中得到的不是单一的信号，许多信号通路是公用的。因此，,EGFR,被阻断后，其他受体能够通过替代,EGFR,的主要功能来维持细胞的存活,。,肝细胞生长因子受体,MET,扩增，酪氨酸激酶活性增强，也可激活,PI3K/AKT,、,RAS,等信号通路。肝细胞生长因子,HGF,也能,刺激,EGFR,的转录活化,。,MET,抑制剂联合使用。,其他TK受体的活化：,25,Kras,突变：,在,ras,基因中，,K-Ras,对人类癌症影响最大，在生理情况下，,EGFR,信号通路活化后，,KRAS,蛋白短暂激活，其后迅速失活，,KRAS,激活,/,失活效应是受控的。而,KRAS,基因突变时，可以导致,EGRF,信号通路持续激活，加速肿瘤细胞增殖。,20%,非小细胞肺癌、,30-35%,大肠癌患者中存在,KRAS,基因突变。,K-ras,突变型编码异常的蛋白，刺激促进恶性肿瘤细胞的生长和扩散；并且不受上游,EGFR,的信号影响，所以对抗,EGFR,治疗效果差。,Kras突变：,26,VEGF,的过度表达：,EGFR,自分泌通路能够部分调控多种血管生成生长因子，其中包括,VEGF,与。,EGFR,抑制剂的获得性耐药可能是由于,VEGF,的表达增强所致。,VEGF的过度表达：,27,五、检测,EGFR,基因变异的临床诊断,近年来表皮生长因子受体,（,EGFR,）,在肺癌致瘤中的作用以及,针对,EGFR,的,靶向治疗备受关注，病理学家在如何筛选合理,的,EGFR,靶,向治疗对象及判定检测结果中起着关键的作用,。,1,、通过,基因检测筛选出,对药物,敏感的患者，为患者提供个体化用药的科学依据；,2,、指导,EGFR-TKI,类药物的合理使用，帮助医生为患者选择最优的治疗方案；,3,、避免,无治疗或治疗不当造成病人病情延误，降低治疗风险；,4,、减轻,患者的经济和精神负担，节省医疗资源。,五、检测EGFR基因变异的临床诊断近年来表皮生长因子受体（E,28,目前临床实践中主要针对,EGFR,络氨酸激酶编码区,18,、,19,、,20,、,21,外显子的突变位点开展检测测方法：,1,、,TKI,药物对,18,、,19,或,21,外显子发生敏感突变的,EGFR,更为有效，而野生型则无法获益。女性、从不吸烟，亚裔被认为是与非小细胞肺癌,EGFR,基因敏感突变最重要因素。,2,、,T790M,突变获得耐药性。,3,、,KRAS,突变：,KRAS,抑制剂靶向治疗。,目前临床实践中主要针对EGFR络氨酸激酶编码区18、19、2,29,谢谢,谢谢,30,