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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,人体解剖生理学试验根本操作,常用的试验动物,动物的捉持,动物的秤重,试验动物分组及编号的标记方法,动物的麻醉,试验动物的给药方法,试验动物的取血方法,试验动物的处死方法,常用的试验动物,小鼠,在哺乳类试验动物中,由于小鼠体小,饲养治理便利,易于掌握,生产生殖快,争论最深,有明确的质量掌握标准,已拥有大量的近交系、突变系和封闭群,因此在各种试验争论中,用量最大,用途最多。,常用的试验动物,大鼠,白化型大鼠在生物医学争论中占据着重要的地位,常用的大鼠近交品系有十几个如ACI、BVF、F344、PA、M520、WAB、WAC、WKA、SD、RF等品系。常用的非近交的纯种大鼠有7种,其中以Wistar大鼠用得最多,我国医药争论中应用也比较广泛。此种大鼠白色,相当于小鼠的瑞士Swiss种。,常用的试验动物,豚鼠,豚鼠对某些药物极为敏感,因此它是争论这些药物的“特地动物”。例如豚鼠对组织胺极敏感,所以很适合作平喘药和抗组织胺药的争论;豚鼠对人型结核杆菌具有高度的敏感性,因此常用作抗结核病药物的药理学争论。,常用的试验动物,家兔,家兔体小力弱、胆小怕惊、怕热、怕潮,宠爱安静、清洁、枯燥、凉快的环境,不能忍受污秽的条件。家兔对体温变化特别灵敏。最易产生发热反响,而且发热反响典型、恒定。小鼠、大鼠和豚鼠恒温机能差。对发热刺激的反响低。有时热原性物质的刺激时。体温反响下降。,常用的试验动物,犬,犬在各个方面的争论,如心血管外科、脑外广泛用于试验外科科、断肢再植、器官或组织移植等中都比较常用。犬是目前根底医学争论和教学中最常用的动物之一,尤其在生理、药理、病理生理等试验争论中起着重要作用。,动物的麻醉,挥发性麻醉药,乙醚,乙醚麻醉的优点:深度易于把握,比较安全,麻醉后恢复比较快。,缺点:需要专人治理,麻醉初期消失猛烈的兴奋现象,对呼吸道有较强的刺激性,需在麻醉前给肯定量的吗啡和阿托品根底麻醉。,非挥发性麻醉药,苯巴比妥钠,戊巴比妥钠,氨基甲酸乙酯,水合氯醛,试验动物的给药方法,皮下注射,皮内注射,腹腔注射,肌肉注射,静脉注射,灌胃给药法,试验动物的取血方法,尾静脉,眼眶动脉和静脉,后眼眶静脉丛连续穿刺,断头,心脏,颈静脉,耳缘静脉,大,/,小鼠解剖,血液凝固,【试验目的】本试验承受兔颈总动脉放血,通过测定各种条件下的血液凝固时间,了解影响血液凝固的一些因素。,【试验原理】血液凝固可分为内源性凝血系统和外源性凝血系统。内源性凝血系统是指参与凝血过程的因子全部存在于血浆中,外源性凝血系统是指在组织因子参与的凝血过程。,【试验材料】,家兔,兔手术台、哺乳动物手术器、动脉夹、细塑料管、20毫升注射器、25%乌拉坦、试管8支、小烧杯2个,竹签1支、冰块、棉花,石蜡、肝素、草酸钾、生理盐水、肺组织浸液。,【试验方法】,1、用乌拉坦将兔麻醉,仰卧固定于兔手术台上,分别一侧颈总动脉,上端用线结扎阻断血液,下端夹上动脉夹,在动脉当中剪一小口,插入细塑料管,结扎插管备取备用。,2、将以下试管预备好试验用品后,每管参加血液2毫升。,试管1 内放少许棉花;,试管2 用石蜡油润滑整个内外表,试管3 不加任何处理,试管4 置于有冰块的小烧杯中,试管5 内加肝素8单位,试管6 内加草酸钾1-2毫克,将多余的血盛于小烧杯中,不断用竹签搅动直至纤维蛋白形成,3、记录凝血时间:每个试管加血2毫升后,即可开头计时,每隔15秒,将试管倾斜一次,观看血液是否凝固。至血液成为凝胶状不再流淌为止,几下所经时间即凝血时。另一烧杯内参加血液后马上用竹签搅动,去除纤维蛋白。5、6号试管,参加血液后,用拇指盖住试管口将管颠倒两次。,将结果及在各条件下的凝血时间按表1填写,并进展解释表1 各条件下凝血时间,实验仪器,编号,实验条件,结果及凝血时间,解释,试管(放血,2,毫升),1,2,粗糙面的影响,预先在试管内放入少许棉花,预先用石蜡油润滑整个使馆内表面,3,4,温度的影响,预先置于室温中,试管置有冰块的小烧杯中,5,6,试管内先加肝素,8,单位,试管里先加草酸钾,1-2,毫克,小烧杯,(放血,10,毫升),放血于烧杯时用竹签不断搅动,约,2-3,分钟后取出竹签,用水洗净竹签上的血液,观察纤维蛋白,烧杯内为去除纤维蛋白血,观察其是否会发生凝血。,血红蛋白含量的测定,【试验目的】把握比色法测定血红蛋白含量的方法。,【试验原理】测定血红蛋白含量的方法很多,试验常用比色法。其原理是在肯定量的血液中,血红蛋白经少量盐酸的作用,使亚铁血红素变成高铁血红素,呈现较稳定的棕色。用水稀释后与标准色比较,求出每100ml 血液中所含的血红蛋白克数。正常成年男子每100ml 血液平均含14.4g,女子为13.1。,【试验材料】兔血,沙利氏血红蛋白计一套,采血针,玻璃棒,滴管,75%酒精,95%酒精,棉球,蒸馏水,乙醚,0.1N盐酸,【试验方法】,1血红蛋白计包括标准比色架,架的两侧镶有两个棕色标准玻璃色柱。血红蛋白稀释管,有方形也有圆形的。两侧有刻度,一侧以g 为计数单位,对侧以百分率计。,2用滴管加0.1mol/LHCl 于血红蛋白稀释管内,到刻度10 处。,3用血红蛋白吸管的尖端吸上个试验中烧杯中的血,吸血至刻度20mm3 处0.02ml。,4用滤纸片或棉球擦净吸管口四周的血液,将吸管插入血红蛋白稀释管的盐酸内,轻轻吹出血液至管底部,反复吸入并吹出稀释管内上层的盐酸,洗涤吸管屡次,使吸管内的血液完全洗入稀释管内。摇匀或用小玻璃棒搅匀后,放置10min,使盐酸与血红蛋白充分作用。,5把稀释管插入标准比色架两色柱中心的空格中,使无刻度的两侧面位于空格的前前方,便于透光和比色。,6用滴管向稀释管内逐滴参加蒸馏水每加一滴要搅拌,边滴边观看颜色,直至颜色与标准玻璃色柱一样为止。稀释管上液面的刻度读数即为每100ml 血液血红蛋白的克数。,家兔动脉血压的神经、体液调整,【试验目的】,1把握测定动脉血压直接法及动脉插管方法。,2了解温血动物的麻醉、固定及手术方法。,3观看心血管活动的某些影响因素。,【试验原理】,心脏受交感神经和迷走神经支配。心交感神经兴奋,对心脏产生正性变时、变力、变传导作用,从而使心输出量增加。心迷走神经兴奋,对心脏产生负性变时、变力、变传导作用,从而使心输出量削减。支配血管的植物神经主要是交感缩血管神经,其兴奋时主要引起缩血管效应,外周阻力增加。中枢通过反射活动调整心血管的活动,转变心输出量及外周阻力,从而调整动脉血压。心血管活动尚受体液因素的调整。其中主要有肾上腺素和去甲肾上腺素。本试验是以动脉血压为指标,在整体条件下,施加某些因素,观看神经、体液因素对心、血管的调整作用。,【试验材料】,家兔,多道生理记录仪、血压换能器、动脉插管、三通管。兔手术台、哺乳类手术器破、注射器、有色丝线、纱布、棉花。25氨基甲酸乙酯、1肝素。生理盐水、l万去甲肾上腺素。,【试验方法】,1.麻醉和动物固定:兔称重后,按1gkg体重的剂量由兔耳缘静脉缓慢注入25氨基甲酸乙酯溶液将动物麻醉。注射过程中留意观看动物的肌张力、呼吸频率及角膜反射的变化,防止麻醉过深。麻醉好的动物仰卧固定于手术台上,留意颈部必需放正拉直。,2.分别颈部血管和神经:用弯剪刀剪去颈部的毛,作长57厘米的正中切口,钝性分别皮下组织和肌肉,即可见到气管,将气管两旁的肌肉拉开,便可在气管两侧的深部找到颈动脉鞘,内有颈总动脉、迷走神经、减压神经和交感神经。认真识别并留神分别,在左侧减压神经和交感神经下穿不同颜色湿丝线备用然后分别双侧的迷走神经和颈总动脉,穿线备用。,3.动脉插管:分别右侧颈总动脉3厘米左右,近心端用动脉夹夹闭,远心端用线结扎耳缘静脉注入肝素1ml,然后在结扎的近端剪一斜口,向心脏方向插入动脉插管,用线将插管与动脉扎紧,防止滑脱。放开动脉夹,记录动脉血压。,观看工程,1、观看正常血压曲线。,2、用动脉夹夹闭左侧颈总动脉510秒,观看血压变化。,3、刺激减压神经:以中等强度,频率为10-15次/秒,波宽2毫米的连续电脉冲。刺激一次减压神经,观看血压有何变化?然后用两根丝线在该神经中部两处接扎,并在两结扎间将神经切断,分别刺激切断后的神经中枢端和外周端,观看对血压影响有何不同?,4、刺激迷走神经:结扎并剪断双侧迷走神经,观看血压变化刺激右侧外周端,观看血压变化。,5、静脉注射去甲肾上腺素:由耳缘静脉注入1万去甲肾上腺素0.3 ml,观看血压变化。,6、刺激交感神经:结扎并剪断左侧交感神经,观看左侧耳都血管的变化,然后用中等强度电流连续刺激其头端,观看左侧耳部血管变化。,尿生成的影响因素,【试验目的】,1学习输尿管插管技术。,2观看影响尿量的几种因素。,【试验原理】,尿的生成过程包括:肾小球的过滤作用;肾小管与集合管的重吸取作用;肾小管与集合管的分泌作用。在整体内,这3个过程往往受到生理性的调整。凡影响这些过程的因素,都可影响尿的生成而引起尿量的转变。,【试验材料】,家兔、手术台、常用手术器械、或细塑料管、刻度试管、2ml及20ml注射器、25%氨基甲酸乙酯溶液、20%葡萄糖注射液、生理盐水、垂体后叶素5单位/ml,【试验方法】,1.麻醉:家兔一只,用25%氨基甲酸乙酯1g/kg耳缘静脉注射,麻醉后,仰位固定于手术台上。,2.插管:导尿管直接由试验动物的尿道插入,试验动物应选择雄性,插导尿管时用液体石蜡浸润后顺尿道轻轻插入膀胱。插管是假设遇阻力,不行强插,应拔出重插。,依次进展以下工程试验。,留意:每项试验前都要记录尿量作为比照。,试验观对待尿流量稳定后,即可进展以下各项试验观看。每项试验开头时,都应先记录一段尿量曲线作为比照;然后进展注射或刺激,并连续记录和观看至效应明显和恢复过程。组间比照、自身前后比照,1自耳缘静脉注射的生理盐水20ml,观看尿量的变化。,2自耳缘静脉注射20%葡萄糖液15ml,观看其变化。,3自耳缘静脉注射垂体后叶素0.2ml,观看和记录其变化20min。,(4)自耳缘静脉注射呋塞米0.2ml,观看和记录其变化20min。,结果:记录兔尿量并观看其变化。,小白鼠破坏小脑引起的共济失调,【试验目的】,一侧小脑损伤后的动物,躯体运动表现特别,通过对特别运动的观看,了解小脑的机能。,【试验原理】,小脑具有维持身体平衡,调整肌紧急和协调肌肉运动等机能。当小脑损伤后,随着破坏程度的不同,可表现出不同程度的肌紧急失调及平衡失调。,绒球小结叶古小脑前庭小脑调整肌紧急,维持身体平衡,小脑前叶旧小脑脊髓小脑掌握肌肉的张力和协调,小脑后叶新小脑大脑小脑影响运动的起始、打算和协调,包括确定运动的力气、方向和范围,【试验材料】,小白鼠4只、探针。,【试验方法】,1.观看正常小鼠的活动状况。,2.用探针破坏某一侧小脑,切勿损伤中脑,然后快速取出探针。,3.放开缚线观看小白鼠的活动状况。,4.依据切除小脑的小白鼠活动状况争论小脑的功能。,血脑屏障通透性试验,【试验目的】,证明血脑屏障的存在,血液中的细菌和某些药物不易轻易进入脑组织。,【试验原理】,血液中某些物质部易透入脑脊液。,【试验材料】,小白鼠、注射器、针头、剪刀、镊子、1%台盼兰溶液,【试验方法】,取小白鼠,腹腔注射1%台盼兰溶液0.3毫升。另一只小鼠腹腔注射生理盐水0.3毫升。30分钟后将动物处死,做全身解剖,观看脑、脊髓与其它脏器的颜色区分?,结果:说明这一现象产生的缘由及生理意义。,
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