,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,菊花的组织培养经典课件,菊花的组织培养,第1页/共27页,通过必修课的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？,组织培养,营养繁殖,扦插,嫁接,压条,第2页/共27页,扦插,嫁接,压条,第3页/共27页,指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或,原生质体,），在人工控制的,培养基及环境条件,（温度及光照）下，得以生长和,分化,成完整植株的一种无菌培养技术。,又称：,植物离体培养,一、,植物组织培养的概念,第4页/共27页,第5页/共27页,阅读课题背景,总结,:,什么是植物组织培养,?,思考：,一、基础知识,1,、细胞分化,（,1,）概念：,在生物个体发育过程中，细胞在形态、结构、功能上产生稳定性差异的过程。,（,2,）特点：,持久性：发生在整个生活活动过程中，胚胎期分化程度达到最大。,不可逆性,：,稳定性：分化过程，遗传物质是不变的，稳定的。,（,3,）原因：,基因选择性表达的结果,（,4,）结果：,产生不同的组织和器官,第6页/共27页,2,、植物细胞的全能性,（,1,）概念：,高度分化的植物细胞，仍具有发育成完整植株的潜能。,（,2,）特点：,受精卵生殖细胞体细胞,体细胞中：分生区细胞成熟区细胞,高度分化的动物体细胞全能性受到限制，但体细胞核仍具有全能性。,（,3,）原因,：,体细胞都是通过有丝分裂由同一个受精卵增殖形成的，遗传物质（染色体）相同，携带有本物种的全部遗传信息。,（）表达的条件：,离体、在一定的营养物质、激素和其它外界条件,(,适宜的温度、,PH,值、光照等,),才能表达。,第7页/共27页,3,、植物组织培养,（,1,）概念：,是指离体的植物器官、组织或细胞，在无菌条件下，通过脱分化和再分化形成完成植株的过程。,（,2,）过程：,人工种子,植株,外植体,愈伤组织,胚状体,脱分化,再分化,加上人工种皮,外植体：,离体的植物器官、组织或细胞,脱分化：,由高度分化的植物组织或细胞，恢复分裂增生能力，产生愈伤组织的过程,愈伤组织：,外植体在培养过程中，通过细胞分裂所产生的、排列疏松不规则、高度液泡化的薄壁细胞群,再分化：,愈伤组织通过细胞分裂、分化（表达全能性）形成根、芽等器官的过程,胚状体：,有类似胚根、胚芽结构的新植物幼体,第8页/共27页,植物组织培养过程示意图,2,、上面的示意图中还有什么地方不够完善的？,没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。,第9页/共27页,污染的预防措施,（一）防止外植体带菌,（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌,（三）操作人员严格遵守无菌操作规程,（四）保证接种与培养环境清洁,第10页/共27页,二、植物组织培养的基本过程,第11页/共27页,愈伤组织,第12页/共27页,三、影响植物组织培养的因素：,1,、外植体的选取,不同植物的组织培养难度不同,同一种植物的不同组织培养难度不同,2,、培养基的配制,(MS,培养基,),大量元素：,C,、,H,、,O,、,N,、,P,、,K,、,Ca,、,Mg,、,S,微量元素：,B,、,Mn,、,Cu,、,Zn,、,Fe,、,Mo,、,I,、,Co,有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等,植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等,未开花植物的茎上部新萌生的侧枝,第13页/共27页,微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，,MS,培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。,阅读课文，思考以下问题,1.,同微生物培养基相比，,MS,培养基的配方有哪些明显的不同？,2,、你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？这些步骤的适宜条件是什么？,组织的脱分化及愈伤组织的再分化。,植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素，细胞分裂素与生长素之间的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。,第14页/共27页,3,、不同植物激素使用顺序,使用顺序,实验结果,先生长素，,后细胞分裂素,有利于细胞分裂但不分化,先细胞分裂素，,后生长素,细胞既分裂也分化,同时使用,分化频率提高,第15页/共27页,4,、不同植物激素使用量,生长素,/,细胞分裂素比值,结果,比值高时,促根分化，,抑芽形成,比值低时,促芽分化，,抑根形成,比值适中,促进愈伤组织生长,第16页/共27页,思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？,生长素,/,细胞分裂素,高 利于根和愈伤组织的形成,适中 利于根芽的分化,第17页/共27页,5,、,pH,、温度、光照,（菊花组培）,pH=5.8,温度控制在,1822,每日光照,12h,6,、消毒,在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境,第18页/共27页,同常规的无性繁殖方法相比，组织培养快速繁殖法主要具有以下优点：,（,1,）快速,采用常规的方法如分株法，一棵花卉一年一般只能生产几株或几十株，但用组织培养的方法则每年可以繁殖出几万甚至数百万的小植株。,（,2,）周年生产,花卉组织培养快速繁殖是在实验室中进行，因条件可控，所以不受季节限制，可以全年进行连续生产。而常规的无性繁殖则受季节限制，只能在花卉生长季节进行繁殖。,（,3,）经济效益高,花卉组织培养快速繁殖所需要的空间小，在一个,200,平方米的培养室内一年可生产试管苗上百万株。如按每株,1,元计算，每年产值上百万元。,（,4,）以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因,所以使用这项技术可让优良的品种不断地延续。,组织培养与常规繁殖相比优点众多,第19页/共27页,制备,MS,固体培养基,外植体消毒,接种,培 养,栽 培,四、实验操作,移 栽,冲洗,酒精,无菌水冲洗,氯化汞,无菌水冲洗至少三次之上,配制各种母液,配制培养基,灭毒,第20页/共27页,（）外植体消毒（茎段）,流水冲洗,加洗衣粉，软刷刷洗,流水冲洗,20min,无菌吸水纸吸干,无菌吸水纸吸干,70%,酒精摇动,6-7s,无菌水清洗,无菌吸水纸吸干,0.1%HgCl,浸泡,1-2min,无菌水清洗至少,3,次,漂净消毒液,第21页/共27页,1,、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）,2,、外植体的消毒（酒精、氯化汞）,3,、接种的无菌操作（酒精、酒精灯,灼烧）,4,、无菌箱中的培养；,5,、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。,在整个操作过程中，是如何来实现,无菌,环境的？,第22页/共27页,结果分析与评价,（一）对接种操作中污染情况的分析,（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化,（三）是否进行了统计、对照与记录,（四）生根苗的移栽是否合格,第23页/共27页,课题延伸（略）,练习,1.,答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。,2.,答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。,第24页/共27页,本课题内容小结,菊花组织培养,基础知识,实验操作,植物体的组织培养,影响组织培养的因素,细胞分化,细胞全能性,组织培养过程,营养,激素,环境条件,MS,固体培养基制备,外植体消毒,接种,培养,移栽,栽培,第25页/共27页,作业：,P36,1,、在植物组织培养过程中，为什么要进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。,2,、在选取菊花茎段是，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？,第26页/共27页,感谢您的观看。,第27页/共27页,