,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第九章 肠杆菌科,内容提要,第一节 埃希菌属,第二节 沙门氏菌属,第三节 耶尔森菌属,第四节 其他肠道杆菌属,第九章 肠杆菌科内容提要第一节 埃希菌属,1,本科共同特性：,*革兰氏,阴性、无芽孢的兼性厌氧菌,*多为正常,肠道菌群成员,*部分菌,对人和动物有广泛的致病性,*公共卫生,和兽医临有重要意义。,第一节 埃希菌属(,Escherichia),本属现有5个种，其中最重要的种是,大肠埃希菌,(,E.coli,)，,俗称,大肠杆菌,，下分血清型。本菌系人和温血动物,肠道内正常菌群成员之一,。,一、形态染色特性,革兰氏阴性,无芽孢的杆菌，,散在，周生鞭毛，多有菌毛。,大肠杆菌光镜照片,大肠杆菌电镜照片,本科共同特性：*革兰氏阴性、无芽孢的兼性厌氧菌*多为正常,2,生化特性,分解多种糖类产酸产气，,分解乳糖、,蔗糖,产酸产气,致病性菌株，呈,溶血,二、培养及生化特性,兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好，最适生长温度,为37（15-42），,PH 7.2-7.4。,培养特性,普通肉汤,：,普通琼脂平板,伊红美蓝琼脂平板：,麦康凯琼脂平板：,三糖铁（,TSI）,培养基：,血液琼脂平板：,肉汤,:37,24,h,混浊，沉淀，菌环，粪臭味,琼脂：,形成湿润、光滑、隆起、圆形、灰白色,形成,红色菌落,紫黑色带金属光泽的菌落,高层和斜面均呈黄色,伊红美蓝,麦康凯琼脂,三糖铁,SS,琼脂,菌落呈红色,生化特性 分解多种糖类产酸产气，分解乳糖、蔗糖产酸产气致病性,3,三、抗原及血清型,1.菌体抗原（,O,抗原）：,2.K,抗原：,3.鞭毛抗原（,H,抗原）,*多糖-,类脂-蛋白质复合物（,LPS）,耐热,*173种,O,抗原（,O,1,O,173,）,*每个,菌株只含有一种,O,抗原,171个,血清型,*被膜,或荚膜、菌毛抗原,多糖或蛋白质,*K,抗原有80种，,分三个型（,A-,耐热、,B、L-,不耐热）,*K,抗原,是区分血清型或亚型的根据,*不,耐热的鞭毛蛋白抗原,*,80,或经乙醇即破坏其抗原性,*H,抗原有56种,大肠杆菌抗原,O：K：H,排列表示,其血清型。如,O8:K23(L):H19,三、抗原及血清型1.菌体抗原（O抗原）：2.K抗原：3.鞭毛,4,四、致病性,*,大肠杆菌,条件性病原菌,在特定条件下，可引起疾病,*有极,少数大肠杆菌,病原性大肠杆菌，引起,人和动物疾病,产肠毒素大肠杆菌,(,ETEC)：,初生仔猪腹泻等疾病。,产类志贺毒素大肠杆菌,(,SLTEC)：,猪水肿病、犊牛出血性结肠炎等。,肠致病性大肠杆菌,(,EPEC)：,兔腹泻、猪腹泻等。,败血性大肠杆菌,(,SEPEC)：,多种动物的,败血症。,尿道致病性大肠杆菌,(,UPEC)：,尿道及生殖器官感染，引起炎症。,病原性大肠杆菌,四、致病性*大肠杆菌条件性病原菌在特定条件下，可引起疾,5,1.产肠毒素大肠杆菌(,ETEC),ETEC,致人和幼畜腹泻，仔猪黄痢、犊牛及断奶仔猪腹泻等,毒力因子,黏附素,(,adhesin),定居因子,(,colonization factor)，,*黏附,素不是导致宿主腹泻的直接致病因子,*使菌体,黏附于小肠上皮细胞,，,定居和繁殖，发挥致病作用,如,F4(K88)、F5(K99)、F6(987P),和,F41,等,黏附素性菌毛,肠毒素,不耐热肠毒素(,LT),耐热肠毒素(,ST),肠细胞分泌机能亢进，引起腹泻,一种蛋白质性毒素,1.产肠毒素大肠杆菌(ETEC)ETEC致人和幼畜腹泻，,6,2.产类志贺毒素大肠杆菌(,SLTEC),*体内或,体外生长时可,产生类志贺毒素,(,SLT),的病原性大肠杆菌,*SLTEC,可致,猪的水肿病,头部、肠系膜和胃壁浆液性水肿为特征,毒力因子,：,粘附性菌毛,细菌在猪肠黏膜上皮细胞定居和繁殖。,F18,菌毛，猪水肿病，毒力因子,致水肿病2型类志贺毒素,2.产类志贺毒素大肠杆菌(SLTEC)*体内或体外生长时可,7,五、微生物学诊断,黏附素,和,毒素,的定型，确定其属于何类致病性大肠杆菌,*病料,麦康凯平板,、,血平板,上划线分离培养,可疑菌落,纯培养物做,O、K,抗原鉴定,1.采病料及染色镜检,2.,分离培养,3.,生化鉴定：,4.,纯培养物抗原鉴定,5.,检测毒力因子：,*腹泻,、猪水肿病,小肠内容物或黏膜刮取物、肠系膜淋巴结,*败血症,病例,：采集内脏组织（肝、脾、肾等）,*革兰氏染色,阴性菌,五、微生物学诊断黏附素和毒素的定型，确定其属于何类致病性大肠,8,病料,粪便、肠内容物、粘膜刮取物,血、肠淋巴结、其他病变组织,麦康凯,或,伊红美蓝,琼脂平板划线分离,血液、麦康凯琼脂平板分离划线分离,挑取疑似菌落5-10个，分别接种于,三糖铁,（,TSI）、,普通琼脂斜面,三糖铁(,TSI）,产酸呈黄色,反应者,其,TSI,生长物或,普通琼脂斜面培养物,革兰氏染色,镜检形态，,不符合可终止鉴定,生化实验证实,为大肠杆菌,猪水肿病菌株,SLT-2e,鉴定,血清型鉴定,O：K：H,ETEC,菌株毒力因子鉴定,粘附素专用培养基,CAYE,培养基,粘附素,抗原鉴定,肠毒素,鉴定,（LT,和,ST）,大肠杆菌分离鉴定程序,病料粪便、肠内容物、粘膜刮取物血、肠淋巴结、其他病变组织麦康,9,六、防治,1.菌苗预防,3.抗菌药物:,耐药菌株产生，药敏试验。,2.生物学方法:,微生态制剂。,*粘附素,的含单价或多价,菌毛抗原的灭活全菌苗,或,亚单位苗,*,抗肠毒素,的类毒素苗,*基因工程,菌苗,*菌苗免疫,怀孕母畜,仔猪获母源抗体,免疫保护,*大肠杆菌,灭活油佐剂菌苗,六、防治1.菌苗预防3.抗菌药物:耐药菌株产生，药敏试验。,10,第二节 沙门氏菌属(,Salmonella),一、形态及染色特性,*形态,染色特性与同科其他菌属相似（大肠杆菌）,革兰氏阴性,*有,周生鞭毛可运动（少数无）,二、培养及生化特性,*与埃希,氏菌属相似,*不发酵,乳糖而形成无色菌落,三糖铁（,TSI）,培养基,：,高层,黄色,和斜面呈,红色,麦康凯琼脂平板：,无色或淡桔红色菌落,(不分解乳糖),普通肉汤、普通琼脂平板,类似,第二节 沙门氏菌属(Salmonella)一、形态及染色特性,11,三、抗原及变异,抗原,O、H、K,和菌毛抗原，,血清型抗原,1.O,抗原,：,*细菌,细胞壁的成分（,LPS）,，耐热多糖抗原，,58种,主要,O,抗原：,一群细菌所独有的抗原,，分为,42个群（,A-F,）,2(,A)、4(B)、7,和8(,C)、9(D)、3,和10(,E)、11(F)、13,等,次要,O,抗原,几种细菌,所共有的抗原，如1、5、6、12等,*O,抗原,制备：,细菌,酒精,处理破坏鞭毛抗原的菌液,2.H,抗原:,*,鞭毛抗原，,63种,，,热，酒精、稀酸破坏其抗原性,，能抵抗甲醛,第1相：,仅为少数细菌所独有，特异性较高。小写英文字母表示,第2相：,特异性较低，为几种细菌所共有。阿拉伯数字表示（1-7）,3.K,抗原：,三、抗原及变异抗原O、H、K和菌毛抗原，血清型抗原1.,12,四、致病性,五、致病性类型,致病性类型根据对宿主嗜性不同，可将沙门氏菌分成三群。,*对人,、多种动物有致病性，,人畜共患病,*侵害,幼、青年动物,败血症,、,胃肠炎、,局部,炎症、流产,*主要,传染途径是,消化道,第一群：,具有高度,专嗜性,沙门氏菌，产生特定的疾病。,例如,鸡白痢,和,鸡伤寒,沙门氏菌,第二群：,是在一定程度适应于特定动物的,偏嗜性,沙门氏菌，,猪霍乱,第三群：,是,泛嗜性,沙门氏菌，它们有广泛宿主谱，能引起人和各,种动物的沙门氏菌病，公共卫生意义、,鼠伤寒,和,肠炎,四、致病性五、致病性类型*对人、多种动物有致病性，人畜共患,13,毒力因子多种,主要脂多糖,(,LPS),、,肠毒素,、,细胞毒素,及,毒力基因,脂多糖,(,LPS)：,细胞壁的成分，构成,O,抗原和内毒素。重要的毒力因子。,抗吞噬作用、白细胞减少、发热、粘膜出血等症状有关。,体液抗体与细胞免疫在抗沙门氏菌感染中都很重要。认为,细胞免疫,在抗沙门氏菌感染中具有重要作用。,七、免疫性,六、毒力因子,肠毒素：,鼠伤寒沙门氏菌、,毒力基因：,毒性质粒（,spv),和染色体的毒力基因(,invA,基因）,毒力因子多种主要脂多糖(LPS)、肠毒素、细胞毒素及毒力基,14,八、微生物学诊断,1.采病料及分离培养,未污染病料：,污染材料：,增菌培养基：,2.培养特性和生化特性检查,鉴别培养基,：,生化试验：,3.血清型分,4.其他鉴定和分型技术,八、微生物学诊断1.采病料及分离培养未污染病料：污染材料：增,15,病料,肠道杆菌,鉴别培养基,上划线分离,用肠道杆菌,增菌培养基,增菌,三糖铁(,TSI）,高层呈黄色斜面呈红色反应者；,尿素分解阴者,菌株鉴定,沙门氏菌属常规,生化项目鉴定,沙门氏,杆菌属的分离鉴定程序,沙门氏菌,A-F,群多价,O,血清玻板凝集,报告初步鉴定结果，必要时进一步鉴定,系统,生化试验,血清型鉴定,报告最后鉴定结果,挑取疑似菌落5-10个分别接种于,三糖铁,（,TSI）,和,尿素琼脂,普通琼,脂斜面,纯培养,物,未污染者,污染者,病料肠道杆菌鉴别培养基上划线分离用肠道杆菌增菌培养基增菌三糖,16,预防接种,：目前的疫苗多限于预防各种家畜特有的沙门氏菌病，例如猪副伤寒、马流产以及牛、羊的都柏林等沙门氏菌的灭活菌苗。,九、防制,抗生素治疗,：常用抗生素如庆大霉素、卡那霉素、氯霉素、,呋喃唑酮等。但本菌属耐药菌株不断在增加，用药前应做,药敏试验后选择用药。,预防接种：目前的疫苗多限于预防各种家畜特有的沙门氏菌病，例如,17,第九章 肠杆菌科复习思考题,1.,简述大肠杆菌的形态染色特征、培养及生化特性。,2.,致病性大肠杆菌的分类及毒力因子相关性如何？,3.,叙述大肠杆菌的微生物学诊断程序。,4.,简述沙门氏菌的形态染色特征、培养及生化特性。,3.,叙述,沙门氏菌的,第九章 肠杆菌科复习思考题1.简述大肠杆菌的形态染色特征、培,18,