单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真菌,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真菌,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真菌,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真菌,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真菌,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真菌,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真菌,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真菌,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真菌,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真菌,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真菌,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真菌,*,2024/11/15,真,1,白假丝酵母菌,2023/10/7真1白假丝酵母菌,2024/11/15,真,2,重点,1.,白色假丝酵母菌的生物学特性,2.,白色假丝酵母菌的微生物学检查,2023/10/7真2重点,2024/11/15,真,3,真菌学概述,概念：,是一类有典型的细胞核和完善的细胞器，不含叶绿素，无根、茎、叶分化的真核细胞型微生物。,2023/10/7真3 真菌学概述 概念：,2024/11/15,真,4,真菌的,形态特性,（一）单细胞真菌呈圆形，如酵母菌。,（二）多细胞真菌由菌丝和孢子组成，,称丝状菌或霉菌。,菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真,菌的重要依据。孢子又分为多种，如叶,状孢子、分生孢子和孢子囊孢子等。,2023/10/7真4真菌的形态特性（一）单细胞真菌呈圆形，,2024/11/15,真,5,单细胞真菌,酵母菌：孢子，无菌丝,类酵母菌：芽生孢子，假菌丝,多细胞真菌,丝状菌（霉菌）：孢子和菌丝,菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真菌的重要依,据。孢子又分为多种，如叶状孢子、分生孢子和孢,子囊孢子等。,真菌的,形态特性,2023/10/7真5单细胞真菌真菌的形态特性,2024/11/15,真,6,单细胞真菌形态,2023/10/7真6单细胞真菌形态,2024/11/15,真,7,类酵母菌,白假丝酵母菌,孢子,假菌丝,2023/10/7真7类酵母菌白假丝酵母菌孢子假菌丝,2024/11/15,真,8,多细胞真菌形态,2023/10/7真8多细胞真菌形态,2024/11/15,真,9,真菌菌落特性,1,酵母型菌落,：,是单细胞真菌的菌落，形态与细菌,菌落相似，较大，表面光滑湿润柔软、边缘整齐，如,新生隐球菌。,2.,类酵母型菌落,：,如白假丝酵母菌，形成假菌丝，,伸入培养基中。,3,霉菌型菌落,：,是多细胞真菌的菌落。菌落呈棉絮,状、绒毛状，并产生不同的色素，如皮肤癣菌。,2023/10/7真9 真菌菌落特性,2024/11/15,真,10,酵母型,菌落,2023/10/7真10酵母型菌落,2024/11/15,真,11,类酵母型,菌落,2023/10/7真11类酵母型菌落,2024/11/15,真,12,霉菌型菌落菌,2023/10/7真12 霉菌型菌落菌,2024/11/15,真,13,培养特性,真菌培养要求不高，常用沙氏,(Sabouraud),培养基,(,含,1,蛋白胨、,4,葡萄糖或麦芽糖、,2,琼脂,),培,养，适宜温度,22,28,，但深部真菌为,37,。适宜,PH,值为,4.0-6.0,。,菌落是鉴别真菌的方法。注意以下几点：,菌落性质：酵母菌还是霉菌；,菌落大小，病原性真菌菌落小，而条件致病性真菌菌落大；,菌落颜色 病原性真菌颜色淡，污染真菌颜色深；,致病性真菌菌落下沉，有时使培养基开裂；污染性真菌菌落不下沉,很少引起开裂,。,真菌依靠孢子及菌丝进行无性或有性繁殖,2023/10/7真13培养特性真菌培养要求不高，常用沙氏(,2024/11/15,真,14,变异性抵抗力,易发生变异,形态、培养性状和毒力等,抵抗力较强,对干燥、紫外线及一般消毒剂抵抗力强对热敏感，,601,小时菌丝、孢子均被杀死对,2%,石炭酸、,0.1%,升汞、,2.5%,碘酊或,10%,甲醛敏感对作用于,细菌抗生素不敏感，对二性霉素,B,制霉菌素、咪康,唑,、,酮康唑,、,氟康唑和伊曲康唑敏感。,2023/10/7真14变异性抵抗力易发生变异,2024/11/15,真,15,致病性与免疫性,致病性,1.,致病性真菌感染：,浅部真菌：角蛋白酶、机械刺激、代谢产物,深部真菌：慢性肉芽肿、组织溃疡,2.,条件致病性真菌：假丝酵母菌,3.,真菌超敏反应性疾病,4.,真菌性中毒症,5.,真菌毒素与肿瘤,免疫性,天然免疫,获得性免疫：体液免疫、细胞免疫,2023/10/7真15致病性与免疫性致病性,2024/11/15,真,16,真菌感染的病原学诊断,标本的采集,临床标本类别：,1,皮肤的角质性物质：毛发、指,(,趾,),甲、皮屑等。,2,各种分泌物和排泄物：生殖道、分泌物、耳垢、痰、,粪便、尿 液等。,3,血液和体液：体液包括胸水、腹水、脑脊液、淋巴穿,刺液等。,4,脓汁及渗出物。,2023/10/7真16真菌感染的病原学诊断标本的采集,2024/11/15,真,17,采集标本注意事项：,1.,采集的标本要适宜 不同真菌感染应采取不同的临床标本。,怀疑为浅部真菌感染如体癣，应刮取病变边缘的痂、皮屑，发,癣应取病发。深部真菌感染应取血液、脑脊液、脓汁等。,2,在用药前采集标本 一般真菌标本须在用药前采集，对已,用药者则需停药一段时间后再采集标本。,3,采集的标本量要足 血液和脑脊液,5ml,，胸腔液,20ml,，皮屑,标本两块，活体组织两份,(,一份病理检查，一份镜检和培养,),。,4,严格无菌操作 并进行消毒处理，尤其是采集血液和脑脊,液标本，要避免污染杂菌。,5,采集标本立即送检 深部真菌标本最长不得超过,2h,。,2023/10/7真17采集标本注意事项：1.采集的标本要适,2024/11/15,真,18,检验程序,P354,检验方法,直接检查不染色和染色镜检,2023/10/7真18 检验程序P354检验方法,2024/11/15,真,19,培养检查法,培养基的选择,培养方法：直接法、试管法、大培养、小培养,真菌的鉴定,生化反应,用于主要深部感染真菌如假丝酵母菌、隐球菌等。,1.,糖,(,醇,),类发酵试验,37,孵育，观察糖发酵情况。,2.,同化碳源试验 含菌生理盐水与已融化的固体同化碳源培养,基,(45),混合，然后在培养基上分别加糖，置,25,孵育观察,结果。若,24h,后无变化可重复加糖。如能同化周围有生长圈，,否则无生长。,3.,同化氮源试验 同化碳源试验相同，但需用无氮源的培养基，不要加糖类，而加入硝酸钾。,4.,明胶液化试验、尿素分解试验、测定淀粉样化合物,5.,分解牛乳试验,2023/10/7真19培养检查法,2024/11/15,真,20,抗原检测,常用的方法有胶乳凝集试验、,ELISA,、半定量放射免疫法。均,应设对照，防止发生假阳性和假阴性,。,动物实验,实验的目的是分离病原性真菌、确定真菌菌种的致病性、研究,药物对真菌的作用等。如假丝酵母菌接种家兔或小白鼠，肾脏,明显肿胀，肾皮质部位有白色脓疡。,核酸检测,从核酸碱基,G+C mol,分析、限制性片段长度多态性,(RFLP),、,Southern,印迹分析到脉冲场凝胶电泳,(PFGE),、,PCR,指纹、随机,扩增多态性,DNA(RAPD),以及,DNA,特殊片段测序等。,2023/10/7真20抗原检测,2024/11/15,真,21,主要致病性真菌,真菌按其侵犯部位和临床表现分为：,表面感染真菌,浅部感染真菌 皮肤癣真菌,皮下组织真菌感染,深部感染真菌：新生隐球菌,条件致病性真菌：假丝酵母菌,2023/10/7真21 主要致病性真菌真菌按其侵犯部位和临,2024/11/15,真,22,深部感染真菌,深部真菌是侵犯皮下组织和内脏，引起全身性感染的真菌。,多数能引起慢性肉芽肿样炎症、溃疡及坏死等病变,深部感染真菌分两大类：,1.,致病性真菌：,此类真菌在正常人体内部不存在，一旦侵入机体，即可致病，如组织胞浆菌、球孢子菌、芽生菌等，属外源性，我国少见；,2.,条件致病性真菌：,是人体正常菌群的成员，当机体抵抗力下降时才致病，如新型隐球菌、白色念珠菌、曲霉菌和毛霉菌等。,2023/10/7真22深部感染真菌深部真菌是侵犯皮下组,2024/11/15,真,23,假丝酵母菌俗称念珠菌，有,81,个种，其中有,11,种对人有致病,性：白假丝酵母菌、为最常见的致病菌。此外，热带假丝酵母,菌、克柔假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌也较多引起疾病。,白假丝酵母菌,（,canidia Albicans,）又称,白色念,珠菌,，广泛存在于自然界，也存在于正常人,口腔，上呼吸道，肠道及阴道，一般在正常机,体中数量少，不引起疾病。,为条件致病性真,菌。,2023/10/7真23假丝酵母菌俗称念珠菌，有81个种，其,2024/11/15,真,24,1,微生物特性,白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形，直径,2-4,m,。革兰阳性。出芽方式繁殖，在组织内可见芽生孢子、假菌丝，孢子可伸长成芽管，如不与母细胞脱离而形成假菌丝。,2023/10/7真241微生物特性 白假丝酵母菌呈圆形,2024/11/15,真,25,营养要求不高，在普通琼脂、血琼脂、和沙保培养基,均生长。需氧，室温或,37,，甚至,42,生长良好。菌,落呈酵母样，,有大量向下生长的营养假菌丝，,表面光,滑，呈灰白色或奶油色，有酵母味，如时间长，菌落,增大成蜂窝状。在玉米粉吐温,-80,培养基中可长出厚膜,孢子。,沙氏斜面,普通平板,血平板,2023/10/7真25营养要求不高，在普通琼脂、血琼脂、和,2024/11/15,真,26,条件致病,：,皮肤粘膜感染,鹅口疮,，阴道炎,内脏感染：肺炎、关节炎、膀胱炎，肾盂肾炎,中枢神经感染：脑膜（脑）炎、脑脓肿,2,致病性和免疫性,本菌可侵犯人体许多部位，,机体也可它产生的免疫力,过敏,2023/10/7真26条件致病：皮肤粘膜感染 鹅口疮，阴,2024/11/15,真,27,3,微生物检验,1.,标本采集：所致疾病不同，取不同标本。,2.,检验程序,P3543.,检验方法及鉴定,1,）,直接显微镜检查：取脓汁、痰和局部炎症性分泌物直接涂片，有些标本需用,KOH,先消化，革兰染色后镜检，显微镜见到革兰阳性,(,着色不均匀,),、圆形或卵圆形菌体或孢子及假菌丝，厚膜孢子较少见。,2023/10/7真273微生物检验 1.标本采集：所,2024/11/15,真,28,2,）,培养检查：将标本接种在沙氏培养基上，,25,或,37,培养,1,2d,后，可出现奶油色类酵母型菌落。镜检可见假菌丝和芽生孢子。,2023/10/7真282）培养检查：将标本接种在沙氏培养基,2024/11/15,真,29,3),鉴定试验,芽管形成试验：将假丝酵母菌接种于,0.2,0.5ml,血清中，,37,孵育,1.5,h,观察有无芽管形成。白假丝酵母菌可形成芽管，其他假丝酵母菌不形成芽管。,芽管,芽管,芽管,2023/10/7真293)鉴定试验芽管芽管芽管,2024/11/15,真,30,厚膜孢子形成试验,：,将假丝酵母菌接种于玉米粉培养基,25,孵育,1-2d