单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,动物,细胞融合与单克隆抗体,1,两个细胞正在融合,受精作用,两个细胞正在融合 受精作用,2,学习目标一：动物细胞融合（细胞杂交）,1,、概念：,2,、结果：,形成单核的杂交细胞,3,、原理：,细胞膜的流动性,4,、诱导方法,物理法：离心、振动、电激,化学法：聚乙二醇（,PEG),生物法：,灭活的病毒（最常用）,“2,个或多个动物细胞”,“,1”,、“杂交单核细胞”,学习目标一：动物细胞融合（细胞杂交）1、概念：2、结果：形成,3,思考：为什么细胞融合过程中使用的病毒,需要灭活？不灭活行吗？,因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭活的话病毒会感染细胞，导致疾病。,灭活丧失感染性，但保留融合活性。,思考：为什么细胞融合过程中使用的病毒 因为灭活的病毒能使细,4,用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程：,细胞核,灭活病毒颗粒,细胞核,杂交单核细胞,用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程：细胞核灭活病毒颗粒细胞核杂,5,5,、过程：,动物细胞,A,动物细胞,B,诱导，融合,（膜、质、核融合）,1,个完整的杂交细胞,AB,6,、意义：,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段；,为制造单克隆抗体开辟了新途径。,突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。,7,、应用：,5、过程：动物细胞A诱导，融合（膜、质、核融合）1个完整的杂,6,强调：,效应,B,淋巴细胞是能够产生抗体的,B,淋巴细胞，下文将其简称为,B,淋巴细胞,抗体：能够与抗原发生特异,性结合的,免疫球蛋白,。,效应,B,细胞,(,浆细胞）,记忆,B,细胞,学习目标二：单克隆抗体,B,淋巴细胞,增殖分化,受抗原刺激,能产生抗体的细胞是,浆细胞（即效应,B,细胞）。,强调：效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞，下文将其简称,7,抗体的传统生产方法,:,抗原,反复注射动物,从动物的,血清,中分离抗体,该法制备抗体的缺点：,产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。,如何解决这个问题呢？,单克隆抗体（杂交瘤技术）,抗体的传统生产方法:抗原 反复注射动物从动物的血清中分离抗体,8,读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念,人们发现，动物在免疫反应的过程中，体内的,B,细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个,B,细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个,B,细胞进行无性繁殖，即克隆。,单克隆,抗体：,单个,B,细胞克隆产生的化学性质,单一、特异性强的抗体。,资料分析,读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，动物在免,9,提示,1,：对,B,细胞进行细胞培养可行吗？,提示,2,：,我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？,问题：,如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计,一个方案。,学习目标二：单克隆抗体,提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？提示2：问题：如何大量生,10,一个,B,淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,骨髓瘤细胞能无限增殖,杂交瘤细胞,动物细胞培养技术,设计方案：,动物细胞融合技术,单克隆抗体,既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞,1975,年英国科学家,米尔斯坦,和,柯勒,的实验,一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体杂交瘤细胞动物细胞培养技术,11,BB,、,B,瘤,、,瘤瘤,（,B,、瘤）,（一选）,选择性培养基,：只有,杂交瘤细胞,才能存活,获得产生相应抗体的,B,细胞,（二选）：,选能产生所需,专一抗体的杂交瘤细胞,体外培养,小鼠腹腔内培养,杂交瘤细胞特点：,既能产生特异性抗体，又能大量增殖。,BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）（一选）选择性培养基：只有杂交瘤,12,单克隆抗体制备过程,注射抗原,效应,B,淋巴细胞,骨髓瘤细胞,细胞融合、,筛选,杂交瘤细胞,细胞培养,筛选,，继续培养,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,体外培养,注射到小鼠腹腔,单克隆抗体,思考：,此,过程利用的原理和技术有哪些？,免疫原理,细胞融合技术,动物细胞培养技术,单克隆抗体制备过程 注射抗原效应B淋巴细胞骨髓瘤细胞细,13,3,、单克隆抗体的应用：,单克隆抗体的优点：,特异性强、灵敏度高、可大量制备,应用于,运载药物：制成“生物导弹”,治疗疾病：主要用于癌症治疗,既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。,作为诊断试剂（最广泛的用途）：,准确识别各种抗原物质，并特异性结合,优点：,准确、高效、简易、快速,“,生物导弹”单克隆抗体药物,3、单克隆抗体的应用：单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、,14,获得杂种植株,用途,诱导方法,使细胞分散后诱导细胞融合,去除细胞壁后诱导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、植物,细胞全能性,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,原理,比较植物体细胞杂交、动物细胞融合,获得杂种细胞,、,制备单克隆抗体,离心、电激、,振动、,聚乙二醇,离心、电激、,振动、,聚乙二醇,灭活病毒,获得杂种植株用途诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后,15,小结,:,三个重点过程,三个“一”,一个诱导,动物细胞融合的,新方法,灭活病毒,一个新细胞,杂交瘤细胞,一个优势,单克隆抗体特异性强、,灵敏度高、可大量制备的优势,动物细胞培养过程,单克隆抗体制备过程,细胞核移植过程,小结:三个重点过程三个“一”一个诱导动物细胞融合的新方法一个,16,