单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验六 霉菌的小培养和形态观察,实验六 霉菌的小培养和形态观察,1,学习并掌握观察霉菌形态的基本方法,2,了解四类常见霉菌的基本形态,一、实验目的,1学习并掌握观察霉菌形态的基本方法一、实验目的,二、实验原理,霉菌:,凡在营养基质上形成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网形的丝状菌体的真菌,统称为霉菌。霉菌包括分类学上许多不同纲或类的真菌,它们分别属于藻状菌纲、子囊菌纲、担子菌纲和半知菌类。,霉菌可产生复杂分枝的菌丝体,分基内菌丝和气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。,二、实验原理霉菌:凡在营养基质上形成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网形,载玻片培养观察法:,用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上,接种后盖上盖玻片培养,霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后,将载玻片上的培养物置显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态,还便于观察不同发育期的培养物。,载玻片培养观察法:,三、实验材料,1,菌种,:,黄曲霉、青霉、黑根霉和毛霉培养,2-5d,的马铃薯琼脂平板培养物。,2,培养基,:土豆琼脂或察氏琼脂乳酸石炭酸棉兰染液、碘液、酒精、蒸馏水等,3,仪器或其他用具,:平皿,盖玻片,,U,形玻棒,解剖刀,,20%,的甘油以及显微镜等。,三、实验材料1菌种:黄曲霉、青霉、黑根霉和毛霉培养2-5d,霉菌小培养,四、实验步骤,霉菌小培养四、实验步骤,1,、培养小室的灭菌:,在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片,再放一,U,形玻棒,其上放一洁净载玻片和两块盖玻片,盖上皿盖,包扎后于,121,灭菌,30min,,烘干备用。,2,、琼脂块的制作:,取已灭菌的马铃薯琼脂(或察氏琼脂)培养基,6-7ml,注入另一块灭菌平皿中,使之凝固成薄层。用解剖刀切成,0.5-1cm,2,的琼脂块,并将其移至上述培养室中的载玻片上(每块放两片)。注意无菌操作,1、培养小室的灭菌:在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片,3,、接种:,用尖细的接种针挑取很少量的孢子接种于琼脂块的边缘上,用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。接种量要少,尽可能将分散的孢子接种在琼脂块的边缘上,否则培养后菌丝过于稠密影响观察。,4,、培养,:现在平皿的滤纸上加,3-5ml,灭菌到,20%,的甘油(保持湿度),盖上平皿,,28,培养。,5,、镜检,:根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察,必要时换高倍镜观察。,3、接种:用尖细的接种针挑取很少量的孢子接种于琼脂块的边缘上,a.,观察黑根霉菌丝情况和孢子情况(着重辨认,匍匐菌丝、假根、包囊梗、孢子囊,):,a.观察黑根霉菌丝情况和孢子情况(着重辨认匍匐菌丝、假根、包,根霉,假根,根霉假根,孢囊孢子(,sporangiospore,),孢囊孢子(sporangiospore),b.,观察毛霉菌丝情况和孢子情况(着重辨认,孢囊梗、孢子囊,):,b.观察毛霉菌丝情况和孢子情况(着重辨认孢囊梗、孢子囊):,c.,观察黄曲霉菌丝,分隔,情况和分生孢子着生情况(着重辨认,足细胞、分生孢子梗和分生孢子,):,c.观察黄曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着生情况(着重辨认足,黑曲霉,黑曲霉,实验六+霉菌形态观察课件,足细胞,足细胞,d.,观察青霉菌丝,分隔,和分生孢子着生情况,(,着重辨认,帚状分支的分生孢子梗,):,d.观察青霉菌丝分隔和分生孢子着生情况,青霉,青霉,菌落特征:,霉菌的菌落大、疏松、干燥、不透明,多呈绒毛状、絮状或网状等,菌体可沿培养基表面蔓延生长,由于不同的真菌孢子含有不同的色素,所以菌落可呈红、黄、绿、青绿、青灰、黑、白、灰等多种颜色。,菌落特征:霉菌的菌落大、疏松、干燥、不透明,多呈绒毛状、絮状,实验六+霉菌形态观察课件,五、实验结果,绘四种霉菌的形态特征:,黄曲霉:,有隔菌丝,外生孢子(分生孢子),有足细胞,顶囊,分生孢子梗,青霉:,有隔菌丝,外生孢子(分生孢子),为,帚状分生孢子穗,,初级小梗,次级小梗;,黑根霉:,无隔菌丝,内生孢子(孢囊孢子),孢囊梗,匍匐枝和假根;,毛霉:,无隔菌丝,内生孢子(孢囊孢子),孢囊梗,五、实验结果绘四种霉菌的形态特征:,六、思考题,1,、你主要根据哪些形态特征来区分上述四种霉菌?,P,46,,(,1,),2,、你认为在显微镜下,细菌,放线菌,酵母菌和霉菌的主要区别是什么?,P,46,,(,2,),六、思考题 1、你主要根据哪些形态特征来区分上述四种霉菌?,1.,镜检时,你如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝?,P,42,,,2,(,3,),镜检时,基内菌丝色暗,分枝较少,而气生菌丝色深,分枝多且向上分化出孢子丝。,上次实验习题解答,1.镜检时,你如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝?P42,请确保镜头擦拭干净!,请确保镜头擦拭干净!,谢谢观看!,2020,谢谢观看!,