单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,一、实验目的,了解显微镜的基本构造和使用方法,掌握油镜的原理和使用方法,了解细菌的三种基本形态,一、实验目的了解显微镜的基本构造和使用方法,1,二、显微镜的基本构造,显微镜的构造,机械装置,光学系统,镜座,载物台,镜臂,标本夹和标本移动尺,粗调螺旋和细调螺旋,聚光镜升降螺旋,接目镜,接物镜及镜头转换器,聚光镜,虹彩光圈,电光源,二、显微镜的基本构造 显微镜的构造机械装置光学系统镜座,2,普通光学显微镜基本构造,普通光学显微镜基本构造,3,1,、增加照明亮度,2,、增加显微镜的分辨率,三、实验原理,2,NA,1、增加照明亮度三、实验原理2NA,4,油镜使用的原理,油镜,即油浸物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时,由于空气与玻片的密度不同,使光线受到曲折,发生散射,降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油(其折射率与玻片的相近),则几乎不发生折射,增加了视野的进光量,从而使物象更加清晰。,油镜使用的原理 油镜,即油浸物镜,5,显微镜的放大倍数、分辨率和,数值孔径,1.,放大倍数,=,物镜放大倍数,目镜放大倍数,2.,分辨率:是表示显微镜辨析物体(两端)两点之间距离的能力,可用公式表示为:,=0.61,/N.A,式中:,:,物镜分辨出物体两点间的最短距离。,:可见光的波长(平均,0.55,m),N.A:,数值孔径,3.,数值孔径,(N.A),=n,sin/2,其意为玻片和物镜之间的折射率(,n,)乘以光线投射到物镜上的最大夹角(,a,)的一半的正弦。,显微镜的放大倍数、分辨率和数值孔径,6,四、实验器材,1,、细菌三态装片,2,、显微镜,3,、香柏油,4,、擦镜纸等,四、实验器材1、细菌三态装片,7,五、操作步骤,1.,放置好显微镜,2.,调节光源,3.,低倍镜观察,4.,高倍镜观察,5.,油镜观察,6.,清洁和还原显微镜,五、操作步骤1.放置好显微镜,8,1.,放置好显微镜,置显微镜于平稳的实验台上,镜座距实验台边沿约为,34cm,。镜检者姿势要端正。,(取、放显微镜时应一手握住镜臂,一手托住底座,使显微镜保持直立、平稳。切忌用单手拎提;且不论使用单筒显微镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观察,以减少眼睛疲劳,也便于边观察边绘图或纪,录。,2.,调节好光源,接通电源,打开光源。,1.放置好显微镜,9,3.,低倍镜的观察,。将标本片放在载物台上,用标本夹夹住,调节标本移动螺旋,使观察的目的物处于物镜的正下方。,调节粗调螺旋,使物镜(,10,)与标本靠近,眼睛在测向注视物镜,防止物镜和载玻片相碰。,张开双眼向目镜里观察,如果见到目的物,但不十分清楚,可用细准焦螺旋调节,至目的物清晰为止。,通过玻片夹推进器慢慢移动玻片,认真观察标本各部分,找到合适的目的物,仔细观察并记录所观察到的结果。,3.低倍镜的观察,10,4.,高倍镜的观察,使用高倍镜前,必须先用低倍镜观察,发现目的物后将它移至视野正中处。,旋动转换器换高倍镜。如果高倍镜触及载玻片立即停止旋动,这说明原来低倍镜并没有调准,目的物并没有真正找到,必须用低倍镜重新调节。如果高倍镜下观察目的物有点模糊,调节细准焦螺旋,直到视野清晰。调节细准焦螺旋时要注意旋转方向与载物台上升或下降的关系,防止镜头与载玻片强力接触,损坏镜头或载玻片。,4.高倍镜的观察,11,5.,油镜的,观察,如果用高倍镜目的物未能看清,可用油镜。先用低倍镜和高倍镜检查标本片,将目的物移到视野正中。,下降载物台,在载玻片上滴一滴香柏油,将油镜移至正中,缓慢调节粗调螺旋使油镜头浸没在油中,刚好贴近载玻片。然后再用细准焦螺旋微微向上调(切忌用粗准焦螺旋)即可。,(应特别注意不要在升降载物台时用力过猛,或者调焦时误将粗调节螺旋向反方向转动而损坏镜头及载玻片),5.油镜的观察,12,6.,清洁显微镜和还原显微镜,.,观察结束后,调节光源到最小再关掉电源开关。调节粗调螺旋,使载物台下降到最低,取下玻片。,.,把油镜转离光轴,擦镜纸擦,1,2,次,去油,用二甲苯滴湿的擦镜纸擦,2,次,再用擦镜纸擦,1,2,次,顺镜头直径方向擦,不要圆周擦和来回擦。,擦干净镜体,罩上防尘罩,然后放回原处。,.,用,擦油镜头的方法擦玻片。,6.清洁显微镜和还原显微镜,13,六、显微结构图的绘制,严格按光学显微镜的操作方法,依低倍、高倍及油镜的次序观察细菌示范片,并绘出其形态图。,生物绘图中绘出的图要清楚,并正确的表示出形态构造的特点,绘图注意事项如下:,(1),绘图要用黑色硬铅笔,不要用软铅笔或有色铅笔,一般用,2H,铅笔为宜。,(2),图的大小及在纸上分布的位置要适当。一般画在靠近中央稍偏左方,并向右方引出注明各部名称的线条。各引出线条要整齐平列,各部名称写在线条右边,六、显微结构图的绘制 严格按光学显微镜的操作方法,依低倍、,14,(3),画图时先用轻淡小点或轻线条画出轮廓,再依照轮廓一笔画出与物象相符的线条。线条要清晰,比例要准确。较长的线条要向顺手的方向运笔,或把纸转动再画。同一线条粗细相同,中间不要有断线或开叉痕迹,线条也不要涂抹。,(4),绘出的图要正确,观察时要把混杂物、破损、重叠等现象区别清楚,不要把这些现象绘上。,(5),图的明暗及浓淡,应用细点表示,不要采用涂抹方法。点细点时,要点成圆点,不要点成小撇。,(6),整个图要美观、整洁,还要特别注意准确性。,(3)画图时先用轻淡小点或轻线条画出轮廓,再依照轮廓一笔,15,七、思考题,1,、使用油镜时,为什么要先用低倍镜观察?,2,、绘出细菌三态图。,七、思考题1、使用油镜时,为什么要先用低倍镜观察?,16,八、实验报告格式,一、实验项目名称,二、实验目的,三、实验基本原理,四、主要仪器设备及耗材,五、实验步骤,六、实验数据及处理结果,七、思考讨论题或体会或对改进实验的建议,八、实验报告格式一、实验项目名称,17,