单击此处编辑母版标题样式,*,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,病原菌的采样技术,广州市,CDC,邓志爱,主要内容,如何正确采集和处理标本,选择合适的培养基和培养方法,常见病原菌标本的采集,食物中毒检材的处理,正确采集和处理标本,无菌操作,血液、脑脊液及穿刺液等,-,无菌操作,粪便、肛拭子和咽拭子等,-,避免杂菌污染,盛放容器,无菌容器,采集时间和部位,在使用抗菌药物之前；选择合适的部位,送检时间和方法,做好标记,填好送检单,立即送检,置运送培养基送检,4,保存运送,35-37,保温运送,安全防护,人、标本、环境,选择合适的培养基和培养方法,依据：标本来源、可能存在的病原菌,血液、脑脊液,1.,部分标本直接涂片染色镜检,2.,培养基：血培养瓶,/,管、,BAP,（血平板）、,MAC,（麦康凯平板）,/EMB,（伊红美蓝平板）、,CA,（巧克力平板）、,SA,（沙保培养基）,3.,培养方法：同时在需氧、厌氧和,CO,2,环境培养,粪便、肛拭子,SS,、,MAC/EMB,、,TCBS,痰、咽拭子,1.,可直接涂片染色镜检,2.BAP,、,CA,、,SA,、,BCYE,（军团菌培养基）,3.,在需氧、厌氧和,CO,2,环境培养,尿,1.,做细菌计数,2.BAP,、,MAC/EMB,、,CA,脓液、分泌物,1.,可直接涂片染色镜检,2.EB(,增菌肉汤,),、,BAP,、,MAC/EMB,、,CA,3.,在需氧、厌氧环境培养,生殖道标本,1.,部分标本直接涂片染色镜检,2.EB,、,BAP,、,MAC/EMB,、,CA,、,SA,眼耳口鼻标本,1.,部分标本直接涂片染色镜检,2.EB,、,BAP,、,MAC/EMB,、,CA,常见病原菌标本的采集,血液、脑脊液,采血时间与次数,用药前,24,小时内采,34,次血液标本，可使细菌检出率高达,99%,；,一般在病人发热初期,12,天内或发热高峰时采集,采血部位,一般从肘静脉采血，亚急性细菌性心内膜炎等病人则从肘动脉或股动脉采血,采血量,成人,510ml/,次，婴幼儿,15 ml/,次,脑脊液,采集,35ml/,次，,35-37,保温，立即送检,粪便标本,自然排便采集法,挑取有脓血、粘液或絮状物部分置采便盒,/,保存液,/,增菌液中送检,直肠拭子采集法,置,C-B,保存液,/,增菌液中送检,呼吸道标本,咽拭采集法,尽量避免口腔正常菌群污染,自然咯痰法,用清水反复漱口，用力自气管深部咳出当日第一口脓痰，置无菌容器中尽快送检,小儿取痰法,气管镜采集法,胃内采痰法,结核病人可用此法采集,气管穿刺法,主要用于厌氧培养,呼吸道标本采集注意事项,痰液标本以晨痰为佳，咳前要充分漱口，减少口腔正常菌群的污染,采集的痰液标本必须是肺深部的痰液而不是唾液,标本采集后及时送检，以防某些细菌在外环境中死亡。作结核分枝杆菌或真菌培养的痰液如不能及时送检，应放入,4,冰箱，以免杂菌生长,做,结核分枝杆菌检查，最好收集,24,小时痰液,有,1/4,到,1/2,肺部感染的病人可能发生菌血症，可同时做血培养,尿液标本,中段尿采集法,肾盂尿采集法,确定菌尿是否来自肾脏,膀胱穿刺尿采集法,主要用于厌氧菌培养,食物中毒检材的处理,肛拭,1.,采用,C-B,保存液和液体硫乙醇酸盐培养基运送。,2.C-B,管：检验人员在接到,C-B,管样后，应立即用旋涡振荡器充分振荡混匀，然后用无菌吸管分别吸取混悬液,0.51ml,放入,11,种增菌液增菌培养，,病人肛拭同时接种于,11,种平板培养基直接分离培养,。,3.,液体硫乙醇酸盐培养基：置厌氧培养箱培养，病人肛拭同时接种血平板,/SPS,平板直接分离置厌氧培养箱培养。,食品,应以无菌操作取适量食品，分别放入,12,种增菌液管中增菌培养。产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌分别按国标,GB4789.13,、,14-2003,作菌落计数。,外环境,一般不采用直接分离培养。分别放入,12,种增菌液管中增菌培养。,呕吐物,需直接进行金葡肠毒素检测，用,Mini VIDAS,全自动荧光免疫分析仪检测,。同时进行细菌学检验。,12,种增菌培养液,：,亚硒酸盐增菌液,/MM,：培养沙门菌,牛肉汤：培养金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌,1%,葡萄糖肉汤：培养链球菌,7.5%NaCl,肉汤：培养金黄色葡萄球菌,嗜盐增菌液：培养副溶血性弧菌,碱性蛋白胨水：培养霍乱弧菌,肠道增菌液：培养致泻大肠埃希菌,GN,增菌液,:,培养志贺菌、变形杆菌,LB1,增菌液：培养单核细胞增生李斯特氏菌,布氏肉汤：培养空肠弯曲菌,硫乙醇酸盐培养液,/,脑心浸液：培养产气荚膜梭菌,