Cliquez pour modifier le style du titre,Cliquez pour modifier les styles du texte du masque,Deuxime niveau,Troisime niveau,Quatrime niveau,Cinquime niveau,*,第五节 临床常用免疫学检查,第五节 临床常用免疫学检查,1,临床常用免疫学检查,血清免疫球蛋白检测,血清补体检测,细胞免疫检测,肿瘤标志物检测,自身抗体检测,器官与骨髓移植的检测,临床常用免疫学检查 血清免疫球蛋白检测,2,第五节临床常用免疫学检查课件,3,第五节临床常用免疫学检查课件,4,二免疫球蛋白（,IgA,）,正常人血清中,IgA,含量占血清总,Ig,的,10%15%,，仅次于,IgG,为（,7103350mg/L,）。,IgA,分为,血清型,IgA,与分泌型（,SIgA,）,两种。分泌型（,SIgA,）的免疫功能更重要，具有保护黏膜的功能，与局部感染、炎症、肿瘤等病变密切相关。,【,临床意义,】,增高：,IgA,型,MM,、慢性炎症、类风关、肝硬化、肾病等,。,降低：,选择性,IgA,缺乏症、重链、轻链病、呼吸道感染、,自身,免疫病、原发和继发性免疫缺陷病。,二免疫球蛋白（IgA）正常人血清中 IgA含,5,三免疫球蛋白（,IgM,）,IgM,是分子量最大的,Ig,，为,950000,，约占血清总,Ig,的,10%,，以五聚体形式存在，它不能透过血管璧，主要分布在血管内，有防止败血症的发生的重要作用。,人体感染之后，,IgM,出现最早。,【,临床意义,】,增高：,初期病毒感染、自身免疫病，原发型巨球蛋白血症。,减低：,IgG,型或,IgA,型,MM,、先天性免疫缺陷病、淋巴系统肿,瘤、肾病综合症、免疫抑制剂治疗后。,三免疫球蛋白（IgM）IgM是分子量最大的,6,四免疫球蛋白（,IgE,）,IgE,仅占血清总,Ig,的,0.002%,。,是一种亲细胞抗体，主要的生物学功能是参与,I,型变态反应。此外，还参与抗寄生虫感染等。,【,临床意义,】,增高：,IgE,型,MM,、重链病、肝病、自身免疫病、各种,过敏性疾病、寄生虫感染、免疫复合物引起的,肾炎等，,减低：,先天性和获得性丙种,Ig,缺陷病、恶性肿瘤、微,血管扩张共剂失调症、长期可的松治疗。,四免疫球蛋白（IgE）IgE仅占血清总 I,7,五种免疫球蛋白的生物化学特性,免疫球蛋白 血清含量,/L,占血清,Ig%,沉降系数 电泳位置 抗原结合价 产生顺序,IgG 816g/L 7080 7 ra-a1 2 2,血清型,IgA 7103350mg 1015 6.614 ra-a 2 3,分泌型,IgA,不等,4 3,IgM 0.482.12g 510 1819 r1-1 10 1,IgD 0.60.2mg 0.021 7 r1 2 4,IgE 0.10.9mg 0.002 8 r1 2 5,五种免疫球蛋白的生物化学特性,8,五血清,M,蛋白,M,蛋白或称单克隆免疫球蛋白，由浆细胞异常增殖所产生的，具有相同分子结构和电泳迁移率免疫球蛋白，但不具有抗体活性。,参考值,蛋白,(,免疫,),电泳、免疫比浊：正常人为阴性,【,临床意义,】,多发性骨髓瘤：,IgG,型,IgA,型，,IgD,和,IgE,罕见,巨球蛋白血症：大量的单克隆,IgM,重轻链病：,Ig,重链（,、,、,）；单克隆游离轻链,半分子病：由一条重链和一条轻链组成的单克隆,Ig,片段异常增生,7SIgG,病：恶性,M,蛋白病,五血清M蛋白 M蛋白或称单克隆免疫球蛋白，由浆,9,血清补体检测,补体,(complement,C),是一组具有酶原活性的糖蛋白,是抗体发挥溶细胞作用的必要条件。,按先后顺序分别称为,C1(C1q,、,C1r,、,C1s)C9,。参与旁路途径中的成分则以因子命名，如,B,、,D,、,P,、,H,、,I,等。,在炎症组织内的补体有,90%,是血清中扩散而来，,补体,+,体液因子,+,免疫细胞共同参与机体的抗感染免疫反应。,具有,介导细胞溶解、调理吞噬、免疫黏附以及参与炎症反应引起的机体免疫损伤,等作用。,免疫复合物既能启动补体系统活化途径，也能启动补体替代途径。,血清补体检测 补体(complement,10,补体系统的基本特征：,补体作用无特异性，,与反应体系中的抗原,抗体复合物结合。,补体系统有两个放大系统,，一是由少量,C1q,引起酶级联反应，使许多,C3,分子被分解；另一个是,C3,转化酶的正调节作用。,不稳定性,，一些补体成分（如,C1,、,C2,、,C5,、,C8,）性质不稳定，经,56,o,C30min,处理就丧失活性。即使在,10,o,C,下，其活性不能保持,34d,，故需放置,-20,o,C,以下保存。,连锁反应,，,补体成分以非活性蛋白前体存在于血浆中，当补体第,1,个成分被激活后，依次地活化直至最后一个补体成分。被激活的成分具有酶或其它生物学活性。,作用的两面性,，激活的补体有生理和病理方面作用，前者表现为抗感染防御，溶解病原体，清除免疫复合物和调节免疫功能等作用；后者表现为引起组织损伤，参与免疫病理过程。,补体系统的基本特征：补体作用无特异性，与反应体系中的抗原抗,11,一,.,总补体溶血活性（,CH,50,）测定,原理：,补体（,C1C9,）能使溶血素（抗体）致敏的绵羊红细胞溶解。既抗原抗体复合物激活待测血清中的,C1,，从而引起补体传统活化途径的连锁反应，最终导致羊红细胞溶解。,补体溶血程度与活性相关，呈一特殊的,S,曲线。一般以,50%,溶血作为检测终点（即,CH,50,）。,【,临床意义,】,活性增高：,急性炎症、感染、,组织损伤、恶性肿瘤等,活性减低：,各种免疫性复合物,性疾病，,合成不足见于急,慢性病毒性肝炎和遗传性,补体成分缺 陷症等。,一.总补体溶血活性（CH50）测定原理：【临床意义】,12,二,.,补体,C3,检测,补体,C3,是一种由肝脏合成的,2-,球蛋白，在补体系统中含量最高，是传统和旁路途径被激活的关键物质。,【,临床意义,】,1.,增高：急性炎症、传染病早期、肿瘤、排异反应等。,2.,减低：急性肾小球肾炎、部分自身免疫病患者。,3.,血清补体,C3,活性的检测对疾病的进程和疗效判断提,供了重要的依据。,二.补体C3检测 补体C3是一种由肝脏合成,13,三,.,补体旁路,B,因子检测,补体旁路,B,因子是一种不耐热的,-,球蛋白。,B,因子是补体旁路活化途径中的一个重要成分，又称,C3,激活剂前体。,【,临床意义,】,1.,增高：某些自身免疫性疾病、肿瘤、肾病综合症等,2.,减低：肝病、急性肾小球肾炎、自身免疫性溶血性,贫血等,三.补体旁路B因子检测 补体旁路B因子是一种不,14,肿瘤标志物检测,恶性肿瘤是给人类带来深重苦难的疾病，严重威胁着人类健康。据统计，我国每年约有,160,万人患肿瘤，,100,万人以上死于肿瘤,。,肿瘤的及时发现与诊断，对于肿瘤患者提高治愈率及延长生命是至关重要的。,肿瘤的诊断除了临床、影象学、病理外，临床实验室辅助检测手段，主要是测定肿瘤患者血液和体液中的肿瘤标志物。,肿瘤标志物检测 恶性肿瘤是给人类带来深重苦难,15,一肿瘤的概念,肿瘤（,tumor,）,是细胞呈现不能控制和进行性生长为特征的一类异常肿块。,肿瘤的细胞生物学行为：,生长缓慢、有完整包膜、与周围组织,良性肿瘤 分界清楚和不发生转移,肿瘤,恶性肿瘤 生长快、无完整包膜、向邻近组织侵润,生长和向远处转移，严重危害人的生命,一肿瘤的概念 肿瘤（tumor）是细胞呈现不,16,肿瘤标志物（,tumor marker,TM,）是指在肿瘤的发生和增殖过程中，由肿瘤细胞,本身所产生的,或者是由,机体肿瘤细胞反应而产生的,，反映肿瘤存在和生长的一类物质，包括蛋白质、激素酶（同工酶）、多胺及癌基,因,产物等。,可用生物化学、免疫学及分子生物学等方法进行测定。对肿瘤的辅助诊断、鉴别诊断、疗效观察、病情监测以及预后的评价具有一定的价值。,肿瘤标志物定义：,肿瘤标志物（tumor marker,TM,17,二,.,蛋白质肿瘤标志物的检测,（,1,）甲胎蛋白（,alpha-fetoprotein,，,AFP,）,参考值,RIA,和,ELISA,法,；成人,25g/L,是胎儿早期由肝脏合成的血清中主要的蛋白质。胎儿在,1216,周时血浆中含量可达到,3000g/L,，随后逐渐降低，出生后,AFP,合成很快受抑制，周岁婴儿的浓度接近成人水平。,一般健康成人血浆,AFP,浓度,20g/L,。当,肝细胞,或,生殖腺胚胎组织,发生恶性病变时，有关基因重新激活，原来已丧失合成,aFP,能力的细胞重新开始合成，血中,aFP,含量升高。,二.蛋白质肿瘤标志物的检测（1）甲胎蛋白（alpha-,18,临床意义,成人血清,AFP,升高见于,：,（,1,）,原发性肝癌,(70-90%),可在症状出现前,6-12,个月作出诊断,，,大于,300g/L,，是原发性肝癌重要的指标。但约有,18%,的病人,AFP,不升高,。,（,2,）,病毒性肝炎，肝硬化,患者,AFP,浓度有不同程度升高，但其水平通常低于,300g/L,。,（,3,）,生殖腺胚胎癌,（睾丸癌、卵巢癌、畸胎瘤 等），胃癌或胰腺癌时,AFP,升高。,（,4,）,孕妇血清,AFP,增高,，,中期达高峰，多,15 g/L,。,二.蛋白质肿瘤标志物的检测 （2）癌胚抗原（Carcin,20,临床意义,（,1,）,消化道恶性肿瘤：,整个胃肠道恶性肿瘤均可增高。,非消化道恶性肿瘤,：如卵巢癌、乳腺癌、肺癌等也有不同程度升高。,（,2,）,CEA,连续随访监测,，可用于恶性肿瘤手术后或化疗患者的疗效观察及预后判断。一般情况下，病情好转时血清,ECA,浓度下降，病情恶化时升高。,（,3,）,CEA,与其它肿瘤标志物结合,测定可提高癌肿的检出率。,检测胸、腹水或胃液的,CEA,含量对鉴别诊断有意义。,（,4,）非肿瘤性疾病：,肠道憩室、直肠息肉、结肠炎、肝硬化、肝炎和肺部疾病,ECA,也有不同程度的升高，但阳性率较低。大量吸烟者、妊娠也可增高。,临床意义（1）消化道恶性肿瘤：整个胃肠道恶性肿瘤均可增高,21,二,.,蛋白质肿瘤标志物的检测,（,3,）前列腺特异性抗原,(Prostate specific antigen,，,PSA),血清,PSA,分子形式：,复合型,PSA(,t-PSA),参考值,4.0 g/L,F/T,比值,0.25,游离型,PSA(f-PSA),参考值,1 g/L,（,PSA,）是一种仅由前列腺上皮细胞分泌的糖蛋白，当正常腺管结构遭到良性、恶性肿瘤或炎症的破坏时，其血浆中,PSA,水平升高。正常人血清中,PSA4ug/L,。,注意：,采集病人的血清标本前，若进行前列腺按摩，将导,致血清,PSA,升高。,二.蛋白质肿瘤标志物的检测（3）前列腺特异性抗原(Pr,22,临床意义,（,1,）,前列腺癌,患者可见血清,PSA,浓度升高。,t-PSA,血清浓度和阳性率随着病程的进展而增高，因此，,PSA,可作为监测前列腺癌病情变化和疗效的重要指标。,（,2,）前列腺肥大、前列腺炎,，也可见,t-PSA,和,f-PSA,水平轻度升高，必须结合其它检查进行鉴别。,（,3,）,单独使用,t-PSA,和,f-PSA,升高来诊断前列腺癌时很难排除前列腺增生症，特别是当,t-PSA,在,5 g/L-10 g/L,时。此时应用,t-PSA,和,f-PSA,来判断。,t-PSA/f-PSA25%,时提示前列腺增生症,。,临床意义（1）前列腺癌患者可见血清PSA浓度升高。t-P,23,二,.,糖脂类肿瘤标志物检测,（,1,）,CA19-9,、,CA50,CA19-9,在,消化道腺癌,病人血清中的浓度可明显升高，是,胰腺癌和胆管癌,的肿瘤标志物。,（,2,）,CA125,CA125,是存在于卵巢肿瘤的上皮细胞内的糖蛋白类相关抗原，作为,卵巢